一种提取浒苔色素的方法
【专利摘要】本发明公开了一种提取浒苔色素的方法，是将浒苔洗涤干燥和粉碎之后，用酒精浸泡提取；浸提液过滤取滤液，回收酒精后用乙酸乙酯萃取得到色素液；用硅胶树脂色谱柱上样，石油醚或者石油醚与乙酸乙酯的混合液或者乙酸乙酯作为洗涤剂洗脱，收集色素组分，浓缩去除溶剂。本方法在色素粗提液加工过程中所用试剂为水和酒精，且酒精回收，无环境污染，色素纯化过程所用有机溶剂也可回收，所提色素性状稳定，生产成本低廉，操作简便，作为食品添加剂或染色剂开发具有广阔的前景。
【专利说明】一种提取浒苔色素的方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明属于水产品加工领域，尤其是藻类加工，具体涉及浒苔色素制备。
【背景技术】
[0002]浒苔属于绿藻门、绿藻纲、石莼目、石莼科，是一种大型海洋绿藻。浒苔具有极强抗逆生长能力，在中国黄海海域已连续暴发7年的绿潮，其优势种即为浒苔。浒苔本身无毒，但形成的绿潮可能引起害虫的暴发，藻类沉积海底会引起水体缺氧导致水生生物死亡，并改变沉积物的理化性质，对海洋底栖生态系统产生严重影响。但浒苔所含生物质资源可被开发利用。浒苔可加工成苔条食用，或者提取多糖等营养物。从浒苔中制备多糖时需要事先将浒苔脱色以提高糖纯度，本发明提供一种提取浒苔色素的方法，旨在利用上述脱除的將苔色素。
【发明内容】
[0003]本发明的目的是提供一种提取浒苔色素的方法。
[0004]技术方案为，一种提取浒苔色素的方法，是将浒苔洗涤干燥和粉碎之后，用酒精浸泡提取；浸提液过滤取滤液，回收酒精后用乙酸乙酯萃取得到色素液；用硅胶树脂色谱柱上样，石油醚或者石油醚与乙酸乙酯的混合液作为洗涤剂洗脱，收集色素组分，浓缩去除溶剂。
[0005]具体的步骤包括: [0006](I)收割浒苔，弃除杂质，淡水洗涤至漂洗液电导率不超过0.02ms ；
[0007](2)去除水分并40~75°C烘干，优选在60°C加热烘干；
[0008](3)将浒苔粉碎为3mm以下的碎片；优选为，采用捣碎机干法捣碎至碎片在3mm以下；
[0009](4) 75%~95% (体积浓度)的酒精浸泡过夜，浸提液用200-800目筛絹过滤，取滤液，滤液在40-60°C下旋转蒸发回收酒精；滤渣可以进一步用于提取多糖或加工为浒苔泥；
[0010](5)余液用乙酸乙酯萃取色素，取上层溶液，得到色素液；
[0011](6)用石油醚悬浮硅胶树脂，装色谱柱；乙酸乙酯萃取的色素液用硅胶吸干，上样；
[0012](7)用石油醚或者石油醚与乙酸乙酯的混合液或者乙酸乙酯作为洗涤剂洗脱，收集色素组分，浓缩去除溶剂；
[0013]具体的，用石油醚作为洗涤剂洗脱，收集色素组分，得到玉米黄素类色素；
[0014]或者，用石油醚洗脱至无色后，再用石油醚与乙酸乙酯混合液(体积比为4:1，7:3,3:2，1:1)作为洗脱剂先后洗脱，收集色素组分，依次得到脱镁叶绿素酸酯a，叶绿素酸酯a，叶绿素a和叶黄素，最后用乙酸乙酯作为洗脱剂洗脱，收集得到叶绿素氧化物。
[0015]然后再用丙酮、二氯甲烷或者甲醇作为洗脱液，可继续洗脱得到棕黄色的叶绿素氧化物。[0016]本方法在色素粗提液加工过程中所用试剂为水和酒精，且酒精回收，无环境污染；色素纯化过程中所用的有机溶剂也可回收。所制备提取的色素性状稳定，生产成本低廉，操作简便，作为食品添加剂或染色剂开发具有广阔的前景。色素提取后的副产品是脱色的浒苔，可进一步加工成浒苔多糖、浒苔泥等。本发明可充分利用浒苔的经济价值，减少废弃物。
【专利附图】
【附图说明】
[0017]图1为实施例1中，所得玉米黄素类色素的吸收光谱。
[0018]图2为实施例2中，所得脱镁叶绿素酸酯a色素的吸收光谱。
[0019]图3为实施例6中，所得叶绿素氧化物色素的吸收光谱。
【具体实施方式】 [0020]为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面进一步阐述本发明。
[0021]实施例1
[0022](I)收割浒苔，弃除杂质，用淡水洗涤至漂洗液的电导率不超过0.02ms。(2)去除水分，60°C加热烘干。(3)采用捣碎机干法，将烘干的浒苔捣碎至碎片的尺寸为3_。(4)用体积浓度75%酒精浸泡过夜，浸提液用600目筛絹过滤，取滤液，将滤液在50°C下旋转蒸发回收酒精。(5)余液用乙酸乙酯萃取色素，取上层溶液，得到色素液。
[0023](6)用石油醚悬浮硅胶树脂，装色谱柱。乙酸乙酯萃取的色素液用硅胶吸干，置于硅胶色谱柱中上样。
[0024](7)用石油醚作为洗涤剂洗脱收集色素组分，旋干浓缩。取样做薄层层析，用提取剂 (丙酮/石油醚=3/2体积比)溶解，展开剂(石油醚/丙酮=3/1体积比)展开，测定Rf值。取样扫描吸收光谱，用石油醚做溶剂和空白对照，扫描范围为300-700nm，间隔lnm。结果初步鉴定如下:
[0025]
色素颜色实测最大吸收峰(nm) Rf值
玉米黄素 M 450053
[0026]吸收光谱如图1所示。鉴定结果为玉米黄素类色素。用该色素染白色布料、筛絹及防水面巾，待溶剂挥发后，布料、筛絹及防水面巾变为黄色。色素用水无法洗去，洗涤50次以上，或者用水浸泡5天以上，颜色不变，初步表明该色素具有染色效果。
[0027]实施例2
[0028](I)收割浒苔，弃除杂质，用淡水洗涤至漂洗液的电导率不超过0.02ms。(2)去除水分，60°C加热烘干。(3)采用捣碎机干法，将烘干的浒苔捣碎至碎片的尺寸为3_。(4)用体积浓度75%酒精浸泡过夜，浸提液用600目筛絹过滤，取滤液，将滤液在45°C下旋转蒸发回收酒精。(5)余液用乙酸乙酯萃取色素，取上层溶液，得到色素液。
[0029](6)用石油醚悬浮硅胶树脂，装色谱柱。乙酸乙酯萃取的色素液用硅胶吸干，置于硅胶色谱柱中上样。
[0030](7)先用石油醚作为洗涤剂洗脱至无色，再用体积比为4:1的石油醚/乙酸乙酯混合溶剂洗脱收集色素组分，旋干浓缩。取样做薄层层析，用提取剂(丙酮/石油醚=3/2体积比)溶解，展开剂(石油醚/丙酮=3/1体积比)展开，测定Rf值。取样扫描吸收光谱，用石油醚/乙酸乙酯=3/1的混合溶剂做溶剂和空白对照，扫描范围为300-700nm，间隔lnm。结果初步鉴定如下:
【权利要求】
1.一种提取浒苔色素的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)将浒苔用淡水洗涤至漂洗液电导率不超过0.02ms ； (2)去除水分，40~75°C下烘干； (3)将干燥后的浒苔粉碎为3mm以下的碎片； (4)75%~95%的酒精浸泡过夜，浸提液用200-800目筛絹过滤，取滤液，在40~60°C下旋转蒸发回收酒精； (5)余液用乙酸乙酯萃取，取上层溶液，得到色素液； (6)用石油醚悬浮硅胶树脂，装色谱柱；步骤(5)中乙酸乙酯萃取的色素液用硅胶吸干，上样； (7)用石油醚或者石油醚与乙酸乙酯的混合液或者乙酸乙酯作为洗涤剂洗脱，收集色素组分，浓缩去除溶剂。
2.权利要求1所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，步骤(7)中，用石油醚作为洗涤剂洗脱，收集色素组分，得到玉米黄素类色素。
3.权利要求1或2所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，步骤(7)中，用石油醚洗脱至无色后，再用体积比为4:1的石油醚与乙酸乙酯混合液作为洗脱剂洗脱，收集色素组分，得到脱镁叶绿素酸酯a。
4.权利要求3所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，再用体积比为7:3石油醚与乙酸乙酯混合液作为洗脱剂洗脱，收集色素组分，得到叶绿素酸酯a。
5.权利要求4所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，再用体积比为3:2石油醚与乙酸乙酯混合液作为洗脱剂洗脱，收集色素组分，得到叶绿素a。
6.权利要求5所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，再用体积比为1:1石油醚与乙酸乙酯混合液作为洗脱剂洗脱，收集色素组分，得到叶黄素。
7.权利要求6所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，再用乙酸乙酯作为洗脱剂洗脱，收集得到叶绿素氧化物。
8.权利要求7所述提取浒苔色素的方法，其特征在于，继续用丙酮、二氯甲烷或者甲醇作为洗脱液，洗脱，收集得到叶绿素氧化物。
【文档编号】C07D487/22GK103725033SQ201310724512
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年12月24日 优先权日:2013年12月24日
【发明者】蔡春尔, 杨亚云, 何培民, 贾睿, 胡燕, 杨欣欣, 吴维宁, 耿中雷, 张林慧, 韦章良 申请人:上海海洋大学