碱性嫩黄o标准检测样品的制备方法
【专利摘要】碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，涉及一种标准检测样品的制备方法，所述方法包括：碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨气进行搅拌反应，反应后，加入氯化氨，继续通氨气反应后，冷却、结晶、过滤、然后加盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品；该方法制得纯度高、含量准确、均匀性和稳定性均符合要求的标准样品，解决我国检测用标准品依赖进口，为我国食品安全检验检测提供全面实物标准保障，为我国各级政府食品安全监控提供了技术支撑。
【专利说明】碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种标准检测样品的制备方法，特别是涉及一种碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法。
【背景技术】
[0002]标准样品是具足够均匀的一种或多种化学的、物理的、生物学的、工程技术的或感官的等性能特征，经技术鉴定，并附有说明有关性能数据证书的一批样品。是以其性质与供试样品进行比较的质量均一的实物样品，并且有适合使用目的的纯度。
[0003]碱性嫩黄O是一种工业染料，主要用主要用于麻、纸、皮革、草编织品、人造丝等的染色，也用于印染棉织品。其色淀用于制墙纸、色纸、油墨和油漆等。也可用于皮革、纸、麻和粘胶的染色。由于能起染色作用，一些不法商贩把碱性嫩黄加入到腐竹中，这对皮肤黏膜有轻度刺激，可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激症状，人接触或者吸入碱性嫩黄都会引起中毒。
[0004]因此，及时准确判断食品中是否存在这三种非食用色素，建立快速、准确的食品中非食用色素碱性嫩黄O的测定方法是非常必要的。而进行定量方法的开发就需要高纯度的标准品，采用标准样品， 才能保证检测结果在国际交往中的准确性、可比性、可溯源性。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，该方法制得纯度高、含量准确、均匀性和稳定性均符合要求的标准样品，解决我国检测用标准品依赖进口，为我国食品安全检验检测提供全面实物标准保障，为我国各级政府食品安全监控提供了技术支撑。
[0006]本发明的目的是通过以下技术方案实现的:
碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，所述方法包括:碱性嫩黄O的合成与纯化:在三口反应瓶内加入乙二醇作溶剂，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨气进行搅拌反应,反应后，加入氯化氨，继续通氨气反应后，冷却、结晶、过滤、然后加盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品；粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为I:13时，样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品；取粗品与硅胶搅拌均匀后，装柱后依次用石油醚润洗、二氯甲烷洗涤后，用二氯甲烷/甲醇洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测；碱性嫩黄O的合成与纯化:在三口反应瓶内加入30 g乙二醇作溶剂,加入4，4 一二甲氨基二苯甲烧(甲烧贝司)15 g、硫磺6 g,通氨气进行搅拌反应，反应温度控制在140±5°C，反应5 h后，加入氯化氨8 g，继续通氨气反应16 h后，冷却、结晶、过滤、然后加入30%盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品约15 g,粗品含量在80%左右，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品。[0007]所述的碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，所述碱性嫩黄O的合成与纯化:粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1:13时，在薄层上主产物与其他杂质得到很好的分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品，取1.2 g粗品与25 g硅胶100-140目搅拌均匀后，装柱后依次用100 mL石油醚润洗、200 mL 二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇13:1洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1为本发明碱性嫩黄O标准样品的液相色谱图。
【具体实施方式】
[0009]下面结合附图所示实施例，对本发明作进一步详述。
[0010]实施例1:
碱性嫩黄O的合成与纯化:在三口反应瓶内加入30 g乙二醇作溶剂，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷(甲烷贝司)15 g、硫磺6 g，通氨气进行搅拌反应，反应温度控制在140±5°C，反应5 h后，加入氯化氨8 g,继续通氨气反应16 h后，冷却、结晶、过滤、然后加入30%盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品约15 g。粗品含量在80%左右，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品。
[0011]粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1:13时，在薄层上主产 物与其他杂质得到很好的分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，，洗脱液氮吹后干燥的纯品。取1.2 g粗品与25 g硅胶(100-140目)搅拌均匀后，装柱后依次用100 mL石油醚润洗、200 mL 二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇(13:1)洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测。
[0012]将上述制得碱性嫩黄O标准品，用棕色瓶进行分装，编号后置于室温、通风密封保存。
[0013]进行纯度检查及含量测定:薄层色谱纯查，HPLC纯度检查:在碱性嫩黄O标准样品的制备中，选择HPLC峰面积归一法进行含量测定。
[0014]所用仪器及条件:高效液相色谱仪(岛津LC-20A)，配二极管阵列检测器或可变波长紫外检测器；色谱柱:C18 (250 mmX4.6mm, 5 μπι)或相当者。
[0015]操作条件:碱性嫩黄O:流动相:甲醇八20 mM)醋酸铵=70/30 ;流速:1.0 mL/min ；柱温:25 V ;检测波长:436 nm ;进样量:10 μ L。
[0016]定量测定:测试液配置:准确称取1.0 g的样品，经50 mL乙醇溶解，水稀释定容后，配制成10 mg/L的样液，在上述液相色谱法条件下进行面积归一法定量。色谱条件应保证试样中所有杂质能够与待测物分离，并且碱性嫩黄O的保留时间合适。进样测定，计算试样中碱性嫩黄O的纯度。在所选择的色谱条件下，碱性嫩黄O的保留时间为4.77 min。
[0017]仪器与设备:高效液相色谱仪(日本岛津公司LC-20A)，紫外-可见分光光度仪(日本岛津公司)，液质质联用仪(美国AB公司)，IN0VA-600核磁共振仪(Varian公司)。
[0018]材料与试剂:浓盐酸、苯胺、亚硝酸钠、尿素、间苯二胺、对氨基苯磺酸钠、2-萘酚、氯化钠、乙二醇、4，4 一二甲氨基二苯甲烷、硫磺、氯化氨、分析纯95%乙醇、分析纯甲醇(上海安谱科学仪器有限公司)。液相用甲醇(色谱纯，TEDIA `COMPANY );水为去离子水。
【权利要求】
1.碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，其特征在于，所述方法包括:碱性嫩黄O的合成与纯化:在三口反应瓶内加入乙二醇作溶剂，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨气进行搅拌反应，反应后，加入氯化氨，继续通氨气反应后，冷却、结晶、过滤、然后加盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品；粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1:13时，样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品；取粗品与硅胶搅拌均匀后，装柱后依次用石油醚润洗、二氯甲烷洗涤后，用二氯甲烷/甲醇洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测；碱性嫩黄O的合成与纯化:在三口反应瓶内加入30 g乙二醇作溶剂，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷(甲烷贝司)15 g、硫磺6 g，通氨气进行搅拌反应，反应温度控制在140±5°C，反应5 h后，加入氯化氨8 g，继续通氨气反应16 h后，冷却、结晶、过滤、然后加入30%盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品约15 g，粗品含量在80%左右，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品。
2.根据权利要求1所述的碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，其特征在于，所述碱性嫩黄O的合成与纯化:粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1:13时，在薄层上主产物与其他杂质得到很好的分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品，取1.2 g粗品与25 g硅胶100-140目搅拌均匀后，装柱后依 次用100 mL石油醚润洗、200 mL 二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇13:1洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测。
【文档编号】C07C251/24GK103755591SQ201410032980
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2014年1月23日 优先权日:2014年1月23日
【发明者】苏锡辉, 李乃洁, 张凯 申请人:沈阳产品质量监督检验院