一种从塞隆骨中提取7-β-羟基胆固醇的方法
【专利摘要】本发明提供一种从塞隆骨中提取7-β-羟基胆固醇的方法，包括以下步骤：用1-15％乙醇-正己烷溶解塞隆骨至50-200mg/mL；一维液相色谱：A相正己烷，B相乙醇，洗脱方式为B相1％等度12min、5％等度10min、8％等度10min、15％等度10min、30％等度25min、50％等度15min、70％等度15min、100％等度15min，根据紫外吸收光谱收集目的组分；用2-15％乙醇-正己烷溶解至50-100mg/mL；二维液相色谱：A相正己烷，B相乙醇，5％B相等度30min洗脱，根据紫外吸收光谱收集目的组分，即得到目的提取物。该方法得到的7-β-羟基胆固醇纯度可达到99％以上。
【专利说明】-种从塞隆骨中提取7-P -羟基胆固醇的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药制品【技术领域】，具体涉及一种从塞隆骨中提取高纯度7-0-羟基 胆固醇的方法。
【背景技术】
[0002] 留体类化合物在中药动物药中分布广泛，其化学结构复杂多样，生物活性显著。一 些结构新颖的动物留体具有引人注目的生理和药理活性，有可能是治疗一系列人类重大疾 病药物的重要来源。7-3-羟基胆固醇就是这样的一种留体类化合物，是广泛存在于动物体 内的一种重要的天然活性成分，其结构如下：
【权利要求】
1. 一种从塞隆骨中提取7-β -羟基胆固醇的方法，其特征在于包括以下步骤： (1) 以塞隆骨为原料，磨成粉末状后，用乙醇体积分数为1-15%的乙醇-正己烷二元混 合溶剂溶解，得到塞隆骨浓度为50-200mg/mL的提取液； (2) 对得到的提取液进行一维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中 A相是正己烷，B相是乙醇；进样量为1000-5000 μ L/针；流动相流速为50-200mL/min ;检 测器为紫外检测器，检测波长200-260nm ;等度洗脱方式：B相浓度1%等度12min、5%等度 lOmiruS%等度 lOmirulS1%等度 lOminJO1%等度 Ζδη?ΓκδΟ1%等度 lSmiruiO1%等度 15min、 100%等度15min ;根据紫外吸收光谱收集目的组分，旋转蒸发至干，得到一维液相组分； (3) 用乙醇体积分数为2-15%的乙醇-正己烷二元混合溶剂溶解一维液相组分，溶解 至浓度为50-100mg/mL ; (4) 进行二维液相色谱分离：采用的流动相为二元混合有机相，其中A相是正己烷，B相 是乙醇；进样量为500-2000μ L/针；流动相流速为10-30mL/min ;检测器为紫外检测器，检 测波长200-260nm ;等度洗脱方式：5% B相等度30min洗脱；根据紫外吸收光谱收集目的组 分，旋转蒸发浓缩至干，即得到目的提取物。
2. 根据权利要求1所述的一种从塞隆骨中提取7-β -羟基胆固醇的方法，其特征在于： 所述步骤（2)中一维液相色谱采用的色谱柱为正相硅胶轴向加压色谱柱，使用时柱温为室 温或 25-40°C。
3. 根据权利要求1所述的一种从塞隆骨中提取7-β -羟基胆固醇的方法，其特征在于： 所述步骤（4)中二维液相色谱采用的色谱柱为Kromasil硅胶色谱柱，使用时柱温为室温或 25-40。。。
【文档编号】C07J9/00GK104277091SQ201410472564
【公开日】2015年1月14日 申请日期:2014年9月17日 优先权日:2014年9月17日
【发明者】张耀洲, 江磊, 陶雁铎, 王丹 申请人:正源堂（天津滨海新区）生物科技有限公司