一种新型半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光探针的制备与应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种可以用于半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光识别的新型化合物，具体涉及一种新型荧光探针的制备方法及其应用，属于化学分析检测【技术领域】。其分子结构式如下：该荧光探针用于环境或生物样品中的半胱氨酸和同型半胱氨酸的荧光传感分析，对半胱氨酸和同型半胱氨酸的选择性好，抗干扰能力强，可以灵敏快速地从多种氨基酸中区分出半胱氨酸和同型半胱氨酸，具有很好的应用前景。
【专利说明】一种新型半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光探针的制备与应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及的是化学分析检测【技术领域】，具体涉及一种新型半胱氨酸和同型半胱 氨酸荧光探针的制备方法以及该荧光探针在检测亚硫酸根离子方面的应用。
【背景技术】
[0002] 氨基酸是构成蛋白质的基本物质，并且与生物的生命活动有着密切的联系。半胱 氨酸（Cysteine,Cys)和同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy)是含有巯基（-SH)并且结构相 差很小的两种氨基酸，在生理过程中有着重要的作用，医学研究表明他们与很多疾病有关， 比如肾功能衰竭、老年痴呆症、帕金森疾病、心血管疾病、冠心病，它们在生物体内含量变化 可以作为这些疾病诊断的依据。因此，人们投注了很大的精力来研究快速灵敏并且有选择 性的检测半胱氨酸和同型半胱氨酸的技术，目前已经应用的技术包括高效液相色谱法、毛 细管电泳法、电化学检测、光学分析和质谱鉴定，这些方法可以在体外监测半胱氨酸和同型 半胱氨酸，不能在活细胞中的监测。荧光分子探针不仅灵敏度高选择性好，而且能够在活细 胞中检测分析物，所以研究者们开始关注将荧光分子探针的这项技术应用于对体外或者细 胞内的半胱氨酸和同型半胱氨酸进行监测或者细胞荧光成像。目前已经报导了多种基于化 学反应的该类探针，例如Michael加成、醒环化反应和裂解反应。在这些方法中，在突光分 子内引入荧光淬灭剂2, 4-二硝基-苯磺酸盐或2, 4-二硝基苯磺酰胺基团，导致荧光猝灭， 在半胱氨酸或同型半胱氨酸诱导下发生的裂解，荧光得以恢复，这是一种特别有效的方法。 这类荧光探针中的大部分水溶解性较差，只能在有机溶剂或者有机溶剂与水的混合溶剂中 对半胱氨酸和同型半胱氨酸进行监测，使其在生物样品或者活体中的应用受到了限制，因 此研发能够在水溶液或者需要很少量有机溶剂的该类探针是很有意义的。
【发明内容】
[0003] 本发明目的之一是提供一种合成简单、反应条件温和、成本较低的荧光探针合成 方法；目的之二是提供一种灵敏度高、选择性好，抗干扰能力强，能够对体外或者细胞内的 半胱氨酸和同型半胱氨酸进行监测或者细胞荧光成像的荧光探针。
[0004] 本发明解决问题采取的技术方案为，一种荧光增强法检测半胱氨酸和同 型半胱氨酸的荧光探针，其分子结构式如下：
【权利要求】
1. 一种新型半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光探针，其结构为：
2. 如权利要求1所述的半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光探针的制备方法，其特征在于按 以下步骤进行制备： (a) 将2-甲氧基-6-乙酰基萘溶于二氯甲烷中，再加入浓盐酸，加热至85°C回流4h，停 止加热冷却至室温，用50%氢氧化钠溶液调节pH至中性，析出固体，过滤、滤饼为产物，蒸 馏水洗涤3次，真空干燥24h，得到中间产物； (b) 将上步所得产物2-羟基-6-乙酰基萘溶于无水二氯甲烷中，再加入三乙胺，将 2, 4-二硝基苯磺酰氯溶于无水二氯甲烷中，冰水浴下缓慢滴加到反应液中，继续搅拌lh， 停止反应，旋蒸除去溶剂，经柱层析分离得到产物，真空干燥24h，得到浅黄色固体，即探针 分子。
3. 根据权利要求1所述的半胱氨酸和同型半胱氨酸荧光探针的用途，其特征在于该酸 荧光探针用于环境或生物样品中半胱氨酸和同型半胱氨酸的荧光检测和分析。
【文档编号】C07C309/73GK104447421SQ201410586419
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年10月28日 优先权日:2014年10月28日
【发明者】宋相志, 刘兴江 申请人:苏州罗兰生物科技有限公司