与人g蛋白偶联的孤儿受体的制作方法

专利名称：与人g蛋白偶联的孤儿受体的制作方法
技术领域：
本专利申请文件中所公开的发明涉及跨膜受体，进一步地讲，涉及与人G蛋白偶联的内源孤儿受体(GPCR)。
背景技术：
尽管在人体内有很多种类的受体，但到目前为止最丰富和最与治疗有关的是G蛋白偶联受体(GPCR)。据估计，在人类基因组内有大约100,000个基因，它们中的大约2％即2,000个基因被估计用来编码GPCR。包括GPCR在内，其内源配体已被认识的受体被称为“已知”受体，内源配体尚不知晓的受体被称为“孤儿”受体。GPCR代表着药物产品开发的一个重要领域60％的处方药物开发自100个已知GPCR中的大约20个。这种区别并不仅是语义上的，尤其是对GPCR来说。因此，孤儿GPCR对于制药工业来说就象金子对于19世纪晚期的加利福尼亚州一样，是一个驱动成长、扩张、提高和发展的机会。
GPCR都具有一个相同的基元(motif)。所有这些受体具有七个由22到24个疏水氨基酸组成的序列，它们组成七个α螺旋，每个α螺旋都跨过膜(每个跨度都以数字表示，例如，跨膜-1(TM-1)、跨膜-2(TM-2)等)。跨膜螺旋通过氨基酸链连接，在细胞膜的外部即“细胞外”一边的氨基酸链分别在跨膜-2和跨膜-3、跨膜-4和跨膜-5、跨膜-6和跨膜-7之间(这些分别被称为“细胞外”区1、2和3(EC-1、EC-2和EC-3))。在细胞膜内部即“细胞内”一边，跨膜螺旋也通过氨基酸链进行连接，这些氨基酸链分别在跨膜-1和跨膜-2、跨膜-3和跨膜-4、跨膜-5和跨膜-6之间(这些分别被称为“细胞内”区1、2和3(IC-1、IC-2和IC-3))。受体的“羧基”(“C”)端是在细胞内的区域，受体的“氨基”(“N”)端在细胞外的区域。
一般来说，当内源配体与受体结合时(经常被称为受体的“活化”)，细胞内区域的构象发生变化，以容许细胞内区域和细胞内“G-蛋白”进行偶联。据报道，GPCR对于G蛋白而言是“混杂的”，也就是说，可与不只一个G蛋白相互作用。参见，Kenakin，T.，43，生活科学(LifeSciences)1095(1988)。尽管存在其他G蛋白，但当前已被识别的G蛋白是Gq、Gs、Gi和Go。内源配体活化的GPCR与G-蛋白的偶联引发一个信号级联过程(被称为“信号传导”)。在通常情形下，信号传导最终导致细胞活化或细胞抑制。据认为，受体的IC-3环与羧基端都和G蛋白相互作用。
在生理条件下，GPCR存在于细胞膜上，并在“非活化”状态和“活化”状态这两种不同构象之间保持平衡。在非活性状态下的受体不能与细胞内信号传导途径相偶联以产生生物学反应。受体构象向活性状态的转变就使它与传导途径相偶联(通过G-蛋白)并产生生物学反应。可通过内源配体或化合物如药物将受体稳定在其活性状态。
发明概述这里公开的是人与G蛋白偶联的内源孤儿受体。
附图的简要描述

图1A和1B提供的是本文提供的某些斑点印迹的参照“格栅”(分别参见图2A和2B)。
图2A和2B再现的是从hCHN3和hCHN8得到的某些斑点印迹分析的结果(分别参见图1A和1B)。
图3再现的是hRUP3的RT-PCR分析结果。
图4再现的是hRUP4的RT-PCR分析结果。
图5再现的是hRUP6的RT-PCR分析结果。
详细描述本科学文献涉及受体并采用一些术语来描述对受体具有不同作用的配体。为了清楚和前后一致，在本发明文献中将由始至终使用下列定义。在这些定义与这些词语的其他定义冲突时，选择下列定义在此应用的氨基酸缩写列于下表
组合物 是指至少包含一种成分的物质。
内源 意味着由物种的基因组天然产生的物质。关于内源的受体，意味着由哺乳动物(例如但不限于人)或病毒天然产生的物质，这些只作为例证但却不是限制。与之相对比，术语“非内源”在本文中意味着不是由哺乳动物(例如但不限于人)或病毒天然产生的。
宿主细胞 意味着能在其中插入质粒和/或载体的细胞。在原核宿主细胞情形下，当宿主细胞复制时质粒典型地以自主分子方式复制(在一般情况下，质粒在复制后被分离出来以被引入真核宿主细胞中)；在真核宿主细胞情形下，质粒被整合进宿主细胞的细胞DNA中，因而，当真核细胞复制时，质粒复制。为在此公开的本发明的目的，宿主细胞优选是真核细胞，更优选是哺乳动物细胞，最优选地是从293、293T和COS-7细胞中选择出来的细胞。
配体 意味着对内源的天然产生的受体特异的内源的天然产生的分子。
非孤儿受体 是指天然存在的内源分子，对天然存在的内源配体表现出特异性，配体与受体的结合使胞内信号途经得以活化。
孤儿受体 意味着这样的内源受体，其特异的内源配体尚未被识别或尚未知。
质粒 意味着载体和cDNA的结合体。一般，为cDNA复制和/或表达蛋白质的目的将质粒引进宿主细胞。
针对cDNA的载体 意味着能够将至少一个cDNA掺入其中且能导入到宿主细胞中的环形DNA。
下面部分的顺序安排是为了表达效果，而不能被解释为对下面的公开或权利要求的限制。人GPCR的确认人类基因组计划的实施导致位于人类基因组内有关核酸序列的大量信息的识别，经过这种努力，事实上，我们无需了解或认识任何特定的基因组序列是否包含翻译人类蛋白的可读框信息，即可获得遗传序列信息，几种识别人类基因组中核酸序列的方法都是本领域普通技术人员所熟悉的，比如(但不限定)，此处公开的大量人类GPCR，即是通过回顾GenBankTM数据库而发现的，并通过应用先前已测序的GPCR核酸序列，检索BLASTTM的EST数据库，发现了其他的GPCR。下面的表A，列出了几个与GPCR各自的同源受体一道被我们发现的内源GPCR。
表A公开的人类 入藏登记可读框与指明的GPCR 参考同源孤儿GPCR (碱基对)同源性比率 GPCR(编号)hARE-3 AL033379 1,260bp52.3％LPA-RU92642hARE-4 AC006087 1,119bp 36％P2Y5AF000546hARE-5 AC006255 1,104bp 32％OryziaslatipesD43633hGPR27 AA775870 1,128bphARE-1 AI090920 999bp 43％ D13626KIAA001hARE-2 AA359504 1,122bp53％GPR27hPPR1 H672241,053bp39％EBI1 L31581hG2A AA754702 1,113bp31％GPR4 L36148hRUP3 AI035423 1,005bp30％果蝇 2133653hRUP4 AI307658 1,296bp32％pNPGPR NP_004876
28％斑马鱼Ya AAC41276和29％斑马鱼Yb，AAB94616hRUP5AC0058491,413bp 25％DEZ Q9978823％FMLPR P21462hRUP6AC0058711,245bp 48％GPR66 NP_006047hRUP7AC0079221,173bp 43％H3R AF140538hCHN3EST365811,113bp 53％GPR27hCHN4AA8045311,077bp 32％凝血酶4503637hCHN6EST2134670 1,503bp 36％edg-1 NP_001391hCHN8EST764455 1,029bp 47％ D13626KIAA0001hCHN9EST1541536 1,077bp 41％LTB4R NM_000752hCHN10 EST1365839 1,055bp 35％P2Y NM_002563受体同源性对于进一步了解受体在人体中的作用是有用的。另外，这种同源性可以用来洞察可能是本文公开的孤儿GPCR的天然激活剂的可能的内源配体。
B.受体筛选因为受体的传统研究一直是基于这样的前置假定(基于历史)，即内源配体必须首先被识别，然后才能发现可以作用于受体的拮抗剂和其他分子，所以，在过去的几年中，用于进行内源配体识别(该识别主要是为了提供进行受体结合测定(该测定需要受体的内源配体)的各种方法)的技术越来越容易找到。甚至在拮抗剂被首先发现的情况下，搜索的目光也立即延伸到查找内源配体上去。即使在发现组成型活化受体之后，这种思维模式也一直在受体研究中持续。在此之前没有被认识到的是，是受体的活性状态对发现受体的激活剂、部分激活剂和反激活剂是最有用的。对于那些因为受体的过度活化和不够活化而导致的疾病来说，希望得到的治疗药物是能分别用来减少受体的活性状态或增强受体活性的化合物，而并不需要是对抗内源配体的拮抗剂。这是因为，一个降低或增强活化态受体活性的化合物并不需要结合在和内源配体一样的位点上。因而，正如本发明的一个方法所说的那样，对治疗性化合物的任何搜索可通过筛选针对配体非依赖性活性态的化合物而开始。
如在本领域已知的情形，GPCR即使是在没有该受体的内源配体与之结合的情况下，在其内源状态GPCR也可能是“活化的”。这种天然活化的受体可被直接识别(即，不需要受体的内源配体存在)、特别是反激活剂的直接识别所筛选。另外，该受体也可通过例如受体的突变以建立该受体的非内源形式来进行活化，所述非内源形式在没有受体的内源配体存在下也处于活性状态。
对应于此处公开的人孤儿GPCR的内源或非内源组成型活化形式的候选化合物进行筛选，可直接识别在细胞表面受体上起作用的候选化合物，而不需要使用受体的内源配体。通过确定此处公开的人GPCR的内源形式在体内表达或过表达的区域，有可能确定与受体表达或过表达关联的相关疾病/紊乱，这种方法在本专利申请文件中得以公开。
制造可以证明此处公开的人孤儿GPCR组成型活化的突变的技术，是基于与脯氨酸残基的距离，据估计此残基位于GPCR的TM6内部，通常在TM6/IC3交界处附近(该脯氨酸残基看起来非常保守)。通过使距该残基16个氨基酸残基处的氨基酸残基(估计位于受体的IC3区)发生突变，最好是突变为赖氨酸，可以获得这种活化。其他氨基酸在此位置上的突变可用来达到此目的。
C.疾病/紊乱识别和/或选择优选人孤儿GPCR的DNA序列被用来制作探针，用于进行(a)针对组织mRNA的斑点印迹和(b)组织样品中所述受体表达的RT-PCR识别。在组织或疾病组织中受体的存在，或者与正常组织相比在疾病组织中受体的浓度提高，可被优选地用来识别治疗方法(包括但不限于)与那种疾病的关联。用这种方法也可很好地把受体定位于器官的区域。基于受体被定位于其中的特定组织的已知功能，受体假想的功能性角色可被推导出来。
D.候选化合物的筛选1.一般GPCR的筛选测定技术当一种G蛋白受体变为组成型活化(即，在没有内源配体与之结合的情况下活化)时，它与G蛋白(例如，Gq、Gs、Gi、Go)偶联并刺激GTP与G蛋白结合。接着，借助受体在正常情况下失活，G蛋白作为GTP酶慢慢地把GTP水解为GDP，然而，组成型活化的受体继续把GDP转化为GTP。GTP非可水解的类似物[35S]GTPγS，可被用来监测与表达组成型活化受体的膜的结合。据报道，[35S]GTPγS可被用来监测在配体存在或不存在的情形下G蛋白与膜的偶联。在本领域中著名和可行的其他例证中有此种监测的一个例证，它由Traynor和Nahorski在1995年所报道。本测定系统的一个优选的应用是为了初步筛选候选化合物，因为本系统对所有G蛋白-偶联受体一般可行，而不考虑与受体的细胞内结构域相互作用的那一种特别的G蛋白。2.特定的GPCR筛选测定技术一旦应用“一般”G蛋白偶联的受体测定方法(即筛选是激活剂、部分激活剂或反激活剂的化合物的方法)识别出候选化合物，优选进一步筛选以确认作用在受体位点的化合物。例如，应用“一般”测定方法识别的化合物可以不与受体结合，但也可以仅仅从细胞内结构域与G蛋白“解偶联”。a.Gs和GiGs刺激腺苷酸环化酶。另一方面，Gi(和Go)抑制该酶。腺苷酸环化酶催化ATP向cAMP的转化；因此，与Gs蛋白偶联的组成型活化的GPCR与升高的细胞内cAMP水平相关联。在另一方面，与Gi(或Go)蛋白偶联的组成型活化的GPCR与降低的细胞内cAMP水平相关联。一般情况参见“突触传导的非直接机制(Indirect Mechanisms ofSynaptic Transmission)”，第8章，从神经到大脑(From Neuron ToBrain)(第三版)，Nichols，J.G.等编，Sinauer Associates，Inc.(1992)。因此，检测cAMP的方法可被用来确定一个竞争性的化合物是否是受体的反激活剂(即这样的一个化合物将能降低cAMP的水平)等。本领域已知的测定cAMP的不同方法可以被利用；最优选的方法依赖于在基于ELISA的方法中应用抗-cAMP的抗体。可被应用的另一类测定方法是一种全细胞第二信使报告基因系统测定法。基因上的启动子驱动由一个特别的基因所编码的蛋白质的表达。环AMP通过以下步骤促进基因的表达，即它响应促进cAMP的DNA结合蛋白或转录因子(CREB)的结合，转录因子接着在被称为cAMP效应元件的特别位点与启动子结合并驱动基因表达。报告基因系统可被构建为具有一个启动子，该启动子在报告基因的前面含有多个cAMP效应元件，例如β-半乳糖苷酶或荧光素酶。因而，一个被组成型活化的连接Gs的受体引起cAMP的积累，cAMP接着激活报告蛋白质的基因和表达。β-半乳糖苷酶或荧光素酶等报告蛋白质可用标准生化方法检测到(Chen等，1995)。b.Go和GqGo和Gq与磷脂酶C的活化相联系，磷脂酶随后水解磷酸酯PIP2，并释放两种细胞内信使二酰甘油(DAG)和肌醇-1，4，5-三磷酸(IP3)。积累增加的IP3与Gq-和Go-关联的受体相关联。一般情况参见“突触传导的非直接机制(Indirect Mechanisms of Synaptic Transmission)”，第8章，从神经到大脑(From Neuron To Brain)(第三版)，Nichols，J.G.等编，Sinauer Associates，Inc.(1992)。测定IP3积累的方法可被用来确定一个候选化合物是否是例如针对Gq-或Go-关联受体等的反激活剂(即如此的化合物能降低IP3的水平)。Gq关联受体也可用AP1报告基因测定方法来检测，因为Gq依赖的磷脂酶C引起含有AP1元件的基因活化；因而，活化的Gq关联受体将导致如此基因的表达增高，而其反激活剂将导致如此表达的降低，激活剂将导致如此表达的升高。进行如此测定的商业可得的方法是可得的。
3.GPCR融合蛋白内源组成型活化的孤儿GPCR或非内源组成型活化的孤儿GPCR，用于筛选候选化合物，直接识别反激活剂、激活剂和部分激活剂，提出了一个独特的筛选难题，确切地说，在没有内源配体结合的情况下，受体仍有活性。因此，使用能加强由该活化的受体获得的信号的方法是经常有用的。优选的办法就是使用GPCR融合蛋白。
一般来讲，应用上述分析技术(还有其它的技术)一旦确定GPCR是或已被组成型活化的，就可能确定与内源GPCR偶联的优势G蛋白，G蛋白与GPCR的偶联提供了可被估计的信号途径。因为最好是使用哺乳动物表达系统进行筛选，就希望在这个系统中有内源G蛋白存在，确切来说，该组成型活化的孤儿GPCR在这个系统中持续产生信号。从这点上，优选使信号得到加强，从而在(例如)受体的反激活剂存在时，很可能更方便地区分与反激活剂接触的不同受体，特别是在筛选的整个过程中。
GPCR融合蛋白的作用是增加G蛋白与非内源GPCR偶联的效应，GPCR融合蛋白优选用于筛选非内源组成型活化的GPCR，因为这种方法增强对这样的筛选技术非常有用的信号，虽然该GPCR融合蛋白也可(而且优选)与内源组成型活化的GPCR一起使用。重要的是有助于产生很大的“信噪”比，这种大信噪比对筛选此处公开的候选化合物是特别优选的。
用于GPCR融合蛋白表达的构建体的构建技术是本领域普通技术人员所熟悉，商业可获得的表达载体和系统为实验者提供了各种可以满足特殊需要的方法，这种GPCR融合蛋白构建体重要的衡量标准，就是内源GPCR序列与G蛋白序列都符合读框(最好是，内源GPCR的序列位于G蛋白序列上游)，以及必须去除或替代GPCR的“终止”密码子，从而随着GPCR的表达，G蛋白也能表达。GPCR可以直接连到G蛋白上，或在两者之间存在间隔残基(最好不超过12个，虽然本领域的普通技术人员可以很方便得知这一数字)。我们喜欢使用间隔子(其于方便)，表达中不被有效利用的限制位点组成了间隔子。在制造GPCR融合蛋白构建体之前，优选首先确认与GPCR偶联的G蛋白，因为只有很少的G蛋白已被识别，所以优选包含G蛋白序列(如通用G蛋白构建体)的构建体可在其中插入内源GPCR序列，这样可有效地大规模筛选大量具有不同序列的内源GPCR。
E.其他应用尽管本文公开的人孤儿GPCR的一个优选的应用是为了直接识别作为反激活剂、激活剂或部分激活剂(优选地作为药物使用)的候选化合物，人GPCR的这些形式也可被用于研究之用。例如，带有GPCR的体外或体内系统可被用来阐释和理解这些受体在正常和患病的人体状况中的作用，也可理解当它应用于理解信号级联反应时组成型活化的角色。这些人孤儿GPCR的价值在于它们作为研究工具的用途被强化了，即使在其内源配体被识别之前，由于其能够确定这些受体在人体内的位置，该GPCR可被用来理解这些受体在人体中的作用。此处所公开的受体的其他应用对于本领域的技术人员将是明显的，特别是当他们阅读了本申请文件之后。
实施例下面提供的实施例，目的是要阐明而不是限制本发明。特异的核酸序列和氨基酸序列在此公开时，本领域的普通技术人员能够对这些序列进行较小的修饰，并且得到与下面报告的相同或基本相似的结果。除非下文另外指明，对于所公开的人内源孤儿GPCR的所有核酸序列均进行了测序并得到了证实。对于受体的等同物，本领域的普通技术人员可以容易地想到的是可对所公开序列进行保守取代以获得功能上等同的受体。实施例1内源人GPCR1.人GPCR的识别在浏览GenBank数据库信息的基础上，识别了一些已公开的内源人GPCR。在检索数据库的同时，下列cDNA克隆也得以识别，列表如下。
用下列EST克隆作为询问序列，对EST数据库(dbest)进行BLASTTM检索，识别出其他已公开的人内源GPCR。然后将下列已确认的EST克隆用作探针筛选人的基因组文库。已公开的人询问 EST克隆/ 可读框核酸序列氨基酸序列孤儿GPCR (序列)入藏登记号(碱基对) SEQ.ID.NOSEQ.ID.NOhGPCR27 鼠 AA775870 1,125bp 15 16GPCR27hARE-1 TDAG 1689643 999bp 17 18AI090920hARE-2 GPCR27 685301,122bp 19 20AA359504hPPR1牛 238667 1,053bp2122PPR1 H67224hG2A 鼠 参见实施例1,113bp23241179426 2(a)hCHN3N.A.EST36581 1,113bp2526(全长)hCHN4 TDAG 1184934 1,077bp2728AA804531hCHN6N.A.EST2134670 1,503bp2930(全长)hCHN8 KIAA0001 EST7644551,029bp3132hCHN9 1365839 EST1541536 1,077bp3334hCHN10 鼠EST人13658391,005bp35361365839hRUP4N.A.AI307658 1,296bp3738N.A.＝“不适用”2全长克隆a.hG2A(Seq.Id.No.23&24)利用鼠EST克隆1179426获取包含几乎所有三氨基酸hG2A编码序列的人基因组克隆，该编码序列通过5′RACETM获得，PCR模板为Clontech’s Human Spleen Marathon-ReadyTMcDNA。已被公开的人G2A用PCR扩增，第一和第二轮PCR使用G2A cDNA特异引物，其为SEQ.ID.NO.39和SEQ.ID.NO.40如下5′-CTGTGTACAGCAGTTCGCAGAGTG-3′(SEQ.ID.NO.39，第一轮PCR)5′-GAGTGCCAGGCAGAGCAGGTAGAC-3′(SEQ.ID.NO.40，第二轮PCR)用AdvantageTMGC Polymerase试剂盒进行PCR(Clontech按商家说明进行操作)，94℃ 30秒；94℃ 5秒，72℃ 4分钟，5个循环；94℃ 5秒，70℃ 4分钟，30个循环。将大约1.3kb PCR片段从琼脂糖凝胶中纯化出来，经Hind III和XbaI酶切，克隆到表达载体pRC/CMV2(Invitrogen)中。被克隆的插入片段用T7 SequenaseTM试剂盒(USBAmersham；按商家说明进行操作)进行测序，并将所得序列与已存在的序列进行比较。人G2A的表达通过用P32标记片段与RNA点印迹杂交进行测定(clontech；按商家说明进行操作)。
b.hCHN9(Seq.Id.No.33&34)EST克隆1541536的测序表明，hCHN9为cDNA克隆的一部分，只有起始密码子，即，没有终止密码子。用hCHN9检索数据库进行比较发现，hCHN9的3′端序列与白细胞三烯B4受体cDNA 5′端非翻译区100％同源，该cDNA带有一个与hCHN9编码序列符合读框的终止密码子。为了确定LTB4R cDNA5′端非翻译区是否是hCHN9的3′端序列，进行了PCR扩增，所用引物是以在hCHN9中发现的起始密码子的5′端侧翼序列和在LTB4R 5′端非翻译区中发现的终止密码子的3′端侧翼序列为基础。所用的5′端引物序列如下5′-CCCGAATTCCTGCTTGCTCCCAGCTTGGCCC-3′(SEQ.ID.NO.41，有义)5′-TGTGGATCCTGCTGTCAAAGGTCCCATTCCGG-3′(SEQ.ID.NO.42，反义)以胸腺cDNA为模板，并用商家提供的缓冲液系统及rTth聚合酶(PerkinElmer)进行PCR，每种引物0.25μM，4种核苷酸每种0.2mM。循环条件为94℃ 1分钟，65℃ 1分钟，72℃ 1分10秒，30个循环，由PCR获得了与预计大小一致的1.1kb片段，将该PCR片段亚克隆到pCMV中(参见下文)并测序(参见SEQ.ID.NO.33)。
c.hRUP4(Seq.Id.No.37&38)以人脑cDNA(clontech)为模板，经RT-PCR克隆了全长hRUP4。
5′-TCACAATGCTAGGTGTGGTC-3′(SEQ.ID.NO.43，有义)
5′-TGCATAGACAATGGGATTACAG-3′(SEQ.ID.NO.44，反义)使用Taqplas PrecisionTM聚合酶(Stratagene按商家说明)进行PCR，经以下循环94℃ 2分钟；94℃ 30秒；55℃ 30秒；72℃ 45秒；72℃ 10分钟。循环2到循环4重复30次。
PCR产物在1％琼脂糖凝胶上分离，提取500bp PCR片段，并克隆到pCRII-TOPO载体(Invitrogen)中，用T7 SequeraseTM试剂盒(Amsham)和SP6/T7引物(Stratagene)进行测序。序列分析表明，该PCR片段确实是AI307658的另一种剪接形式，带有一个与其他GPCR相似的连续的可读框，该PCR片段的全序列如下5’-TCACAATGCTAGGTGTGGTCTGGCTGGTGGCAGTCATCGTAGGATCACCCATGTGGCACGTGCAACAACTTGAGATCAAATATGACTTCCTATATGAAAAGGAACACATCTGCTGCTTAGAAGAGTGGACCAGCCCTGTGCACCAGAAGATCTACACCACCTTCATCCTTGTCATCCTCTTCCTCCTGCCTCTTATGGTGATGCTTATTCTGTACGTAAAATTGGTTATGAACTTTGGATAAAGAAAAGAGTTGGGGATGGTTCAGTGCTTCGAACTATTCATGGAAAAGAAATGTCCAAAATAGCCAGGAAGAAGAAACGAGCTGTCATTATGATGGTGACAGTGGTGGCTCTCTTTGCTGTGTGCTGGGCACCATTCCATGTTGTCCATATGATGATTGAATACAGTAATTTTGAAAAGGAATATGATGATGTCACAATCAAGATGATTTTTGCTATCGTGCAAATTATTGGATTTTCCAACTCCATCTGTAATCCCATTGTCTATGCA-3’(SEQ.ID.NO.45)以上面的序列为基础，制备两个有义寡核苷酸引物5′-CTGCTTAGAAGAGTGGACCAG-3′(SEQ.ID.NO.46，寡聚核苷酸引物1)5′-CTGTGCACCAGAAGATCTACAC-3′(SEQ.ID.NO.47， 寡聚核苷酸引物2)两个反义寡核苷酸引物5′-CAAGGATGAAGGTGGTGTAGA-3′(SEQ.ID.NO.48，寡聚核苷酸引物3)5′-GTGTAGATCTTCTGGTGCACAGG-3′(SEQ.ID.NO.49，寡聚核苷酸引物4)用于3′端和5′端RACE PCR，以人脑Marathon-ReadyTMcDNA(clontech，Cat#7400-1)为模板，按商家说明进行。经RACE PCR产生的DNA片段克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)中，用SP6/T7引物(Stratagene)和一些中间引物测序，3′端RACE产物带有一个poly(A)尾巴和一个结束于TAA终止密码子的完整的可读框，5′端RACE产物包含不完整的5′端，即，起始密码子ATG没有出现。
基于新的5′端序列，寡聚核苷酸引物3和下列引物5′-GCAATGCAGGTCATAGTGAGC-3′(SEQ.ID.NO.50，寡聚核苷酸引物5)用于第二轮的5′端RACE PCR，对PCR产物象上面一样进行分析。第三轮的5′端RACE PCR用反义引物进行5′-TGGAGCATGGTGACGGGAATGCAGAAG-3′(SEQ.ID.NO.51，寡聚核苷酸引物6)5′-GTGATGAGCAGGTCACTGAGCGCCAAG-3′(SEQ.ID.NO.52，寡聚核苷酸引物7)5′端RACE PCR产物序列显示存在起始密码子ATG，再下一轮的5′RACE PCR没有产生更多的5′序列，通过利用有义引物5′-GCAATGCAGGCGCTTAACATTAC-3′(SEQ.ID.NO.53，寡聚核苷酸引物8)和寡聚核苷酸引物4为引物进行的RT-PCR，以及由人脑和心cDNA模板(Clontech、Cat#7404-1)产生的650bp PCR产物的序列分析，证实了上述完整的5′端序列。通过利用寡聚核苷酸引物2和下列反义引物的RT-PCR5′-TTGGGTTACAATCTGAAGGGCA3′(SEQ.ID.NO.54，寡聚核苷酸引物9)以及由人脑和心cDNA模板(Clontech，Cat#7404-1)产生的670bp PCR产物的序列分析，证实了上述完整的3′端序列。
d.hRUP5(Seq.Id.No.9&10)以人的外周白细胞cDNA(Clontech)为模板，通过RT-PCR克隆了全长的hRUP5，所用引物为在ATG起始密码子上游的有义引物(SEQ.ID.NO.55)，以及包含TCA为终止密码子的反义引物(SEQ.ID.NO.56)，其序列如下
5′-ACTCCGTGTCCAGCAGGACTCTG-3′(SEQ.ID.NO.55)5′-TGCGTGTTCCTGGACCCTCACGTG-3′(SEQ.ID.NO.56)Advantage cDNA聚合酶(Clontech)用于50μl反应，经下列循环进行扩增，其中第二步到第四步重复30次94℃ 30秒；94℃ 15秒；69℃ 40秒；72℃ 3分钟；72℃ 6分钟。分离得到1.4kb PCR片段，并克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)，用T7 DNA SequenaseTM试剂盒(Amsham)进行全序列测定，参见SEQ.ID.NO.9。
e.hRUP6(Seq.Id.No.11&12)用下列引物及人的胸腺Marathon-ReadyTMcDNA(Clontech)为模板，通过RT-PCR克隆了全长hRUP6。
5′-CAGGCCTTGGATTTTAATGTCAGGGATGG-3′(SEQ.ID.NO.57)5′-GGAGAGTCAGCTCTGAAAGAATTCAGG-3′(SEQ.ID.NO.58)AdvantageTMcDNA聚合酶(Clontech，按商家说明)用于50μl反应，经下列循环进行扩增94℃ 30秒；94℃ 5秒；66℃ 40秒；72℃ 2.5秒和72℃ 7分钟，循环2到循环4重复30次。分离得到1.3kb PCR片段，并克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)，用ABI Big Dye TerminatorTM试剂盒(P.E.Biosystem)进行全序列测定(参见，SEQ.ID.NO.11)。
f.hRUP7(Seq.Id.No.13&14)用下列引物及人的外周白细胞cDNA(Clontech)为模板，通过RT-PCR克隆了全长PUP7，5′-TGATGTGATGCCAGATACTAATAGCAC-3′(SEQ.ID.NO.59，有义)5′-CCTGATTCATTTAGGTGAGATTGAGAC-3′(SEQ.ID.NO.60，反义)AdvantageTMcDNA聚合酶(Clontech)用于50μl反应，经下列循环进行扩增，其中第二步到第四步重复30次94℃ 2分钟94℃ 15秒；60℃ 20秒；72℃ 2分钟；72℃ 10分钟。分离得到1.25kb PCR片段，并克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)，用ABI Big Dye TerminatorTM试剂盒(P.E.Biosystem)进行全序列测定。(参见，SEQ.ID.NO.13)g.hARE-5(Seq.Id.No.5&6)采用hARE-5特异的引物5′-CAGCGCAGGGTGAAGCCTGAGAGC-3′SEQ.ID.NO.69(有义，位于起始密码子ATG的5′端)和5′-GGCACCTGCTGTGACCTGTGCAGG-3′SEQ.ID.NO.70(反义，位于终止密码子TGA的3′端)并用人基因组DNA为模板，通过PCR来克隆全长hARE-5。按照下列循环采用TaqPlus PrecisionTMDNA聚合酶(Stratagene)来扩增，其中第2步至第4步重复35次96℃ 2分钟；96℃ 20秒；58℃ 30秒；72℃ 2分钟；72℃ 10分钟。
分离到预计大小的1.1Kb PCR片段并克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)，用T7 DNA SequenaseTM试剂盒(Amsham)进行全序列测定(SEQ.ID.NO.5)。
h.hARE-4(Seq.Id.No.3&4)采用hARE-4特异的引物5′-CTGGTGTGCTCCATGGCATCCC-3′SEQ.ID.NO.67(有义，位于起始密码子ATG的5′端)和5′-GTAAGCCTCCCAGAACGAGAGG-3′SEQ.ID.NO.68(反义，位于终止密码子TGA的3′端)并用人基因组DNA为模板，通过PCR来克隆全长hARE-4。采用Taq DNA聚合酶(Stratagene)和5％DMSO，按照下列循环来扩增，其中第2步至第3步重复35次94℃ 3分钟；94℃ 30秒；59℃ 2分钟；72℃ 10分钟。
分离到预计大小的1.12Kb PCR片段并克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)，用T7 DNA SequenaseTM试剂盒(Amsham)进行全序列测定(SEQ.ID.NO.3)。
i.hARE-3(Seq.Id.No.1&2)采用hARE-3特异的引物5′-gatcaagcttCCATCCTACTGAAACCATGGTC-3′SEQ.ID.NO.65(有义，小写字母核苷酸代表Hind III突出端，ATG为起始密码子)和5′-gatcagatctCAGTTCCAATATTCACACCACCGTC-3′SEQ.ID.NO.66(反义，小写字母核苷酸代表Xba I突出端，TCA为终止密码子)并用人基因组DNA为模板，通过PCR来克隆全长hARE-3。采用TaqPlusPrecisionTMDNA聚合酶(Stratagene)，按照下列循环来扩增，其中第2步至第4步重复35次94℃ 3分钟；94℃ 1分钟；55℃ 1分钟；72℃ 2分钟；72℃ 10分钟。
分离到预计大小的1.3Kb PCR片段并用Hind III和Xba I消化，克隆到pRC/CMV载体(Invitrogen)的Hind III和Xba I位点，用T7 DNASequenaseTM试剂盒(Amsham)进行全序列测定(SEQ.ID.NO.1)。
j.hRUP3(Seq.Id.No.7&8)采用hRUP3特异的引物5′-GTCCTGCCACTTCGAGACATGG-3′SEQ.ID.NO.71(有义，ATG为起始密码子)和5′-GAAACTTCTCTGCCCTTACCGTC-3′SEQ.ID.NO.72(反义，位于终止密码子TAA的3′端)并用人基因组DNA为模板，通过PCR来克隆全长hRUP3。采用TaqPlus PrecisionTMDNA聚合酶(Stratagene)，按照下列循环来扩增，其中第2步至第4步重复35次94℃ 3分钟；94℃ 1分钟；58℃ 1分钟；72℃ 2分钟；72℃ 10分钟。
分离到预计大小的1.0Kb PCR片段并克隆到pCRII-TOPOTM载体(Invitrogen)，用T7 DNA SequenaseTM试剂盒(Amsham)进行全序列测定(SEQ.ID.NO.7)。实施例2受体表达尽管在本领域中有多种细胞可用于蛋白质的表达，但最优选应用的是哺乳动物细胞。据预测，其基本原因是实用性，即例如表达GPCR的酵母细胞的应用，有可能把一种非哺乳动物细胞引入到程序中，此细胞可能不(其实，对于酵母来说，是不)包括偶联受体、遗传机制和分泌途径，而这些是经过进化用于哺乳动物系统的。因此，在非哺乳动物细胞中得到的结果，尽管是可能有用的，但并不如从哺乳动物细胞中得到的结果优选。在哺乳动物细胞中，COS-7、293和293T细胞是特别优选的，尽管应用的特定哺乳动物细胞可按技术人员的特别需要而被判定。用于表达所公开的GPCR的一般步骤如下。
第一天，将1×107个293T细胞接种到150mm的培养板上。第二天，准备两支试管(比例是每板用于一支试管)通过混合20μg DNA(例如pCMV载体、带有受体cDNA的pCMV载体，等)在1.2ml无血清的DMEM(Irvine Scientific，Irvine，CA)来制备试管A；通过混合120μllipofectamine(Gibco BRL)在1.2ml无血清DMEM中制备试管B。把试管A和B互倾混合(几次)，然后在室温下温育30-45分钟。组合物被称为“转染组合物”。植出的293T细胞用1×PBS洗涤，然后加入10ml无血清的DMEM。把2.4ml转染组合物加入到细胞中去，然后在37℃/5％CO2下温育4小时。接着通过抽吸移去转染组合物，然后加入25ml的DMEM/10％胎牛血清。接着细胞在37℃/5％CO2温育。72小时后收获细胞并用来进行分析。实施例3所公开的人GPCR的组织分布可用几中方法来测定本文所公开的GPCR的组织分布。
1.斑点印迹分析应用商业可得的人组织斑点印迹系统，探查内源孤儿GPCR以确定这些受体所存在的区域。实施例1的GPCR的cDNA片段(放射标记的)被(或可被)用作探针按照制造商的指令，应用Prime-It IITM随机引物标记试剂盒(Stratagene，#300385)，用完全受体cDNA(从载体中切下)产生(或可产生)放射标记的探针。把人RNA Master BlotTM(Clontech，#7770-1)与内源人GPCR放射标记的探针杂交，并按照制造商的指令在严谨条件下洗涤。印迹曝光于Kodak BioMaxTM放射自显影底片，在-80℃过夜。几种受体的结果在表B和表C中列出(参见图1A和1B，其中分别列出了各种组织和其位置)。用hCHN3和hCHN8得到的结果显示在图2A和2B所示的典型斑点印迹中。
表B孤儿GPCR 组织分布(在斑点印迹中相对于其它组织的最高水平)hGPCR27 胎脑、壳、脑下垂体、尾状核hARE-1 脾、外周血白细胞、胎脾hPPR1脑下垂体、心、唾液腺、小肠、睾丸hRUP3 胰腺hCHN3 胎脑、壳、枕皮质hCHN9 胰腺、小肠、肝hCHN10肾、甲状腺表C孤儿GPCR 组织分布(在斑点印迹中相对于其它组织的最高水平)hARE-3 左小脑、右小脑、睾丸、AccumbenshGPCR3 尸体collusum、尾状核、肝、心、心脏室间隔膜hARE-2 左小脑、右小脑、黑质hCHN8 左小脑、右小脑、肾、肺2.RT-PCRa.hRUP3为证实hRUP3 mRNA的组织分布，采用hRUP3特异的引物和作为模板的人多组织cDNA板(MTC，Clontech)进行RT-PCR。采用Taq DNA聚合酶(Stratagene)并按照下列循环在40微升反应液中来进行该PCR反应94℃ 2分钟；94℃ 15秒；55℃ 30秒；72℃ 1分钟；72℃ 10分钟。所用引物如下5′-GACAGGTACCTTGCCATCAAG-3′(SEQ.ID.NO.61；有义)5′-CTGCACAATGCCAGTGATAAGG-3′(SEQ.ID.NO.62；反义)。
将20微升反应液上样到1％琼脂糖凝胶中，结果如图3所示。
正如图3中的数据所支持的那样，在所使用的cDNA板的16个组织(脑、结肠、心、肾、肺、卵巢、胰腺、胎盘、前列腺、骨、小肠、脾、睾丸、胸腺白细胞和肝)中，只有胰腺显示了一条hRUP3带。hRUP3的蛋白质序列与其它GPCR的进一步的对比分析表明hRUP3与具有小分子内源配体的GPCR有关，由此可以做出这样的预测hRUP3的内源配体是小分子。
b.hRUP4采用作为引物的hRUP4的寡聚核苷酸引物8和4和作为模板的人多组织cDNA板(MTC，Clontech)进行RT-PCR。采用Taq DNA聚合酶(Stratagene)并按照下列循环在40微升反应液中来进行扩增94℃ 30秒；94℃ 10秒；55℃ 30秒；72℃ 2分钟；72℃ 5分钟，其中循环2到循环4重量复30次。
将20微升反应液上样到1％琼脂糖凝胶中来分析该RT-PCR的产物，发现hRUP4 mRNA在许多人组织中表达，但在心和肾中表达最强。(参见图4)。为证实这些PCR片段的真实性，使用从hRUP4的5′末端产生的300bp片段做探针，进行Souther印迹分析。该探针用32p-dCTP采用Prime-It IITM随机引物标记试剂盒(Stratagore)进行标记，并用ProbeQuantTMG-50微型柱(Amershan)进行纯化。进行12小时的预杂交，然后在42℃杂交过夜。最后，在65℃用0.1×SSC对印迹进行洗涤。该Southern印迹没有证实hRUP4的PCR片段。
c.hRUP5采用hRUP5的下列特异的引物和作为模板的人多组织cDNA板(MTC，Clontech)进行RT-PCR5′-CTGACTTCTTGTTCCTGGCAGCAGCGG-3′(SEQ.ID.NO.63；有义)
5′-AGACCAGCCAGGGCACGCTGAAGAGTG-3′(SEQ.ID.NO.64；反义)。
采用Taq DNA聚合酶(Stratagene)并按照下列循环在40微升反应液中来进行扩增94℃ 30秒；94℃ 10秒；62℃ 1分30秒；72℃ 5分钟；其中第2步至第3步重复30次。将20微升反应液上样到1.5％琼脂糖凝胶中来分析该RT-PCR的产物，发现hRUP5 mRNA仅在外周血白细胞中表达(数据未显示)。
d.hRUP6采用RT-PCR来证实hRUP6的表达并确定hRUP6的组织分布。基于AC005871和GPR66片断的对齐排比，采用具有下列序列的寡聚核苷酸和作为模板的人多组织cDNA板(MTC，Clontech)5′-CCAACACCAGCATCCATGGCATCAAG-3′(SEQ.ID.NO.73有义)5′-GGAGAGTCAGCTCTGAAAGAATTCAGG-3′(SEQ.ID.NO.74；反义)。采用TaqPlus PrecisionTMDNA聚合酶(Stratagene，按照厂商的指令)并按照下列循环在40微升反应液中来进行PCR94℃ 30秒；94℃ 5秒；66℃ 40秒；72℃ 2分30秒；和72℃ 7分钟。其中第2至第4循环重复30次。
将20微升反应液上样到1.2％琼脂糖凝胶中来分析该RT-PCR的产物，代表hRUP6的特异760bp DNA片段主要在胸腺中表达，而在心、肾、肺、前列腺、小肠和睾丸中仅少量表达。(参见图5)。
本专利申请文件中提到的每个专利、申请及印刷出版物以其全文引入本申请作参考。
本领域的普通技术人员将认识到在不背离本发明精神和实质的前提下，可以对本发明的优选实施方案做许多许多改变和修改。这些修改和变化均在本发明的范围之内。
虽然本领域的普通技术人员可以得到许多不同的载体为内源和非内源GPCR的目的使用，但最好是用pCMV载体。按照国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约，该载体于1998年10月13日保存在美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)(ATCC)(University Blvd，Manassas，VA20110-2209 USA7)。其DNA经ATCC测定并得到确认，ATCC为pCMV给出了下列保藏号ATCC#203351。
序列表(1)一般资料(i)申请人陈若平；邓杭；廖王蓁；林伊玲(ii)发明名称与人G蛋白偶联的孤儿受体(iii)序列数74(iv)通讯地址(A)收信人阿瑞那制药公司(B)Nancy Ridge大道6166号(C)城市圣地亚哥(D)州加利福尼亚州(E)国家美国(F)邮编92121(v)计算机可读形式(A)介质类型软盘(B)计算机IBM个人兼容机(C)操作系统PC-DOS/MS-DOS(D)软件PatentIn Release#1.0，#1.30版(vi)本申请资料(A)申请号(B)申请日(C)分类号(viii)代理人信息(A)姓名Burgoon，Richard P.
(B)登记号34787(ix)电讯信息(A)电话(858)453-7200(B)电传(858)453-7210(2)SEQ ID NO1的资料(i)序列特征(A)长度1260个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO1的序列描述ATGGTCTTCT CGGCAGTGTT GACTGCGTTC CATACCGGGA CATCCAACAC AACATTTGTC 60GTGTATGAAA ACACCTACAT GAATATTACA CTCCCTCCAC CATTCCAGCA TCCTGACCTC 120AGTCCATTGC TTAGATATAG TTTTGAAACC ATGGCTCCCA CTGGTTTGAG TTCCTTGACC 180GTGAATAGTA CAGCTGTGCC CACAACACCA GCAGCATTTA AGAGCCTAAA CTTGCCTCTT 240CAGATCACCC TTTCTGCTAT AATGATATTC ATTCTGTTTG TGTCTTTTCT TGGGAACTTG 300GTTGTTTGCC TCATGGTTTA CCAAAAAGCT GCCATGAGGT CTGCAATTAA CATCCTCCTT 360GCCAGCCTAG CTTTTGCAGA CATGTTGCTT GCAGTGCTGA ACATGCCCTT TGCCCTGGTA 420ACTATTCTTA CTACCCGATG GATTTTTGGG AAATTCTTCT GTAGGGTATC TGCTATGTTT 480TTCTGGTTAT TTGTGATAGA AGGAGTAGCC ATCCTGCTCA TCATTAGCAT AGATAGGTTC 540CTTATTATAG TCCAGAGGCA GGATAAGCTA AACCCATATA GAGCTAAGGT TCTGATTGCA 600GTTTCTTGGG CAACTTCCTT TTGTGTAGCT TTTCCTTTAG CCGTAGGAAA CCCCGACCTG 660CAGATACCTT CCCGAGCTCC CCAGTGTGTG TTTGGGTACA CAACCAATCC AGGCTACCAG 720GCTTATGTGA TTTTGATTTC TCTCATTTCT TTCTTCATAC CCTTCCTGGT AATACTGTAC 780TCATTTATGG GCATACTCAA CACCCTTCGG CACAATGCCT TGAGGATCCA TAGCTACCCT 840GAAGGTATAT GCCTCAGCCA GGCCAGCAAA CTGGGTCTCA TGAGTCTGCA GAGACCTTTC 900CAGATGAGCA TTGACATGGG CTTTAAAACA CGTGCCTTCA CCACTATTTT GATTCTCTTT 960GCTGTCTTCA TTGTCTGCTG GGCCCCATTC ACCACTTACA GCCTTGTGGC AACATTCAGT 1020AAGCACTTTT ACTATCAGCA CAACTTTTTT GAGATTAGCA CCTGGCTACT GTGGCTCTGC 1080TACCTCAAGT CTGCATTGAA TCCGCTGATC TACTACTGGA GGATTAAGAA ATTCCATGAT 1140GCTTGCCTGG ACATGATGCC TAAGTCCTTC AAGTTTTTGC CGCAGCTCCC TGGTCACACA 1200AAGCGACGGA TACGTCCTAG TGCTGTCTAT GTGTGTGGGG AACATCGGAC GGTGGTGTGA 1260(3)SEQ ID NO2的资料(i)序列特征(A)长度419个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO2的序列描述Met Val Phe Ser Ala Val Leu Thr Ala Phe His Thr Gly Thr Ser Asn1 5 10 15Thr Thr Phe Val Val Tyr Glu Asn Thr Tyr Met Asn Ile Thr Leu Pro20 25 30Pro Pro Phe Gln His Pro Asp Leu Ser Pro Leu Leu Arg Tyr Ser Phe35 40 45Glu Thr Met Ala Pro Thr Gly Leu Ser Ser Leu Thr Val Asn Ser Thr50 55 60Ala Val Pro Thr Thr Pro Ala Ala Phe Lys Ser Leu Asn Leu Pro Leu65 70 75 80Gln Ile Thr Leu Ser Ala Ile Met Ile Phe Ile Leu Phe Val Ser Phe85 90 95Leu Gly Asn Leu Val Val Cys Leu Met Val Tyr Gln Lys Ala Ala Met100 105 110Arg Ser Ala Ile Asn Ile Leu Leu Ala Ser Leu Ala Phe Ala Asp Met115 120 125Leu Leu Ala Val Leu Asn Met Pro Phe Ala Leu Val Thr Ile Leu Thr130 135 140Thr Arg Trp Ile Phe Gly Lys Phe Phe Cys Arg Val Ser Ala Met Phe145 150 155 160Phe Trp Leu Phe Val Ile Glu Gly Val Ala Ile Leu Leu Ile Ile Set165 170 175Ile Asp Arg Phe Leu Ile Ile Val Gln Arg Gln Asp Lys Leu Asn Pro180 185 190Tyr Arg Ala Lys Val Leu Ile Ala Val Ser Trp Ala Thr Ser Phe Cys195 200 205Val Ala Phe Pro Leu Ala Val Gly Asn Pro Asp Leu Gln Ile Pro Ser210 215 220Arg Ala Pro Gln Cys Val Phe Gly Tyr Thr Thr Asn Pro Gly Tyr Gln225 230 235 240Ala Tyr Val Ile Leu Ile Ser Leu Ile Set Phe Phe Ile Pro Phe Leu245 250 255Val Ile Leu Tyr Ser Phe Met Gly Ile Leu Asn Thr Leu Arg His Asn260 265 270Ala Leu Arg Ile His Ser Tyr Pro Glu Gly Ile Cys Leu Ser Gln Ala275 280 285Ser Lys Leu Gly Leu Met Ser Leu Gln Arg Pro Phe Gln Met Ser Ile290 295 300Asp Met Gly Phe Lys Thr Arg Ala Phe Thr Thr Ile Leu Ile Leu Phe305 310 315 320Ala Val Phe Ile Val Cys Trp Ala Pro Phe Thr Thr Tyr Ser Leu Val325 330 335Ala Thr Phe Ser Lys His Phe Tyr Tyr Gln His Asn Phe Phe Glu Ile340 345 350Ser Thr Trp Leu Leu Trp Leu Cys Tyr Leu Lys Ser Ala Leu Asn Pro355 360 365Leu Ile Tyr Tyr Trp Arg Ile Lys Lys Phe His Asp Ala Cys Leu Asp370 375 380Met Met Pro Lys Ser Phe Lys Phe Leu Pro Gln Leu Pro Gly His Thr385 390 395 400Lys Arg Arg Ile Arg Pro Ser Ala Val Tyr Val Cys Gly Glu His Arg405 410 415Thr Val Val(4)SEQ ID NO3的资料(i)序列特征(A)长度1119个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO3的序列描述ATGTTAGCCA ACAGCTCCTC AACCAACAGT TCTGTTCTCC CGTGTCCTGA CTACCGACCT 60ACCCACCGCC TGCACTTGGT GGTCTACAGC TTGGTGCTGG CTGCCGGGCT CCCCCTCAAC 120GCGCTAGCCC TCTGGGTCTT CCTGCGCGCG CTGCGCGTGC ACTCGGTGGT GAGCGTGTAC 180ATGTGTAACC TGGCGGCCAG CGACCTGCTC TTCACCCTCT CGCTGCCCGT TCGTCTCTCC 240TACTACGCAC TGCACCACTG GCCCTTCCCC GACCTCCTGT GCCAGACGAC GGGCGCCATC 300TTCCAGATGA ACATGTACGG CAGCTGCATC TTCCTGATGC TCATCAACGT GGACCGCTAC 360GCCGCCATCG TGCACCCGCT GCGACTGCGC CACCTGCGGC GGCCCCGCGT GGCGCGGCTG 420CTCTGCCTGG GCGTGTGGGC GCTCATCCTG GTGTTTGCCG TGCCCGCCGC CCGCGTGCAC 480AGGCCCTCGC GTTGCCGCTA CCGGGACCTC GAGGTGCGCC TATGCTTCGA GAGCTTCAGC 540GACGAGCTGT GGAAAGGCAG GCTGCTGCCC CTCGTGCTGC TGGCCGAGGC GCTGGGCTTC 600CTGCTGCCCC TGGCGGCGGT GGTCTACTCG TCGGGCCGAG TCTTCTGGAC GCTGGCGCGC 660CCCGACGCCA CGCAGAGCCA GCGGCGGCGG AAGACCGTGC GCCTCCTGCT GGCTAACCTC 720GTCATCTTCC TGCTGTGCTT CGTGCCCTAC AACAGCACGC TGGCGGTCTA CGGGCTGCTG 780CGGAGCAAGC TGGTGGCGGC CAGCGTGCCT GCCCGCGATC GCGTGCGCGG GGTGCTGATG 840GTGATGGTGC TGCTGGCCGG CGCCAACTGC GTGCTGGACC CGCTGGTGTA CTACTTTAGC 900GCCGAGGGCT TCCGCAACAC CCTGCGCGGC CTGGGCACTC CGCACCGGGC CAGGACCTCG 960GCCACCAACG GGACGCGGGC GGCGCTCGCG CAATCCGAAA GGTCCGCCGT CACCACCGAC 1020GCCACCAGGC CGGATGCCGC CAGTCAGGGG CTGCTCCGAC CCTCCGACTC CCACTCTCTG 1080TCTTCCTTCA CACAGTGTCC CCAGGATTCC GCCCTCTGA1119(5)SEQ ID NO4的资料(i)序列特征(A)长度372个氨基酸
(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓扑学不相关(ii)分子类型蛋白质(xi)SEQ ID NO4的序列描述Met Leu Ala Asn Ser Ser Ser Thr Asn Ser Ser Val Leu Pro Cys Pro1 5 10 15Asp Tyr Arg Pro Thr His Arg Leu His Leu Val Val Tyr Ser Leu Val20 25 30Leu Ala Ala Gly Leu Pro Leu Asn Ala Leu Ala Leu Trp Val Phe Leu35 40 45Arg Ala Leu Arg Val His Ser Val Val Ser Val Tyr Met Cys Asn Leu50 55 60Ala Ala Ser Asp Leu Leu Phe Thr Leu Ser Leu Pro Val Arg Leu Ser65 70 75 80Tyr Tyr Ala Leu His His Trp Pro Phe Pro Asp Leu Leu Cys Gln Thr85 90 95Thr Gly Ala Ile Phe Gln Met Asn Met Tyr Gly Ser Cys Ile Phe Leu100 105 110Met Leu Ile Asn Val Asp Arg Tyr Ala Ala Ile Val His Pro Leu Arg115 120 125Leu Arg His Leu Arg Arg Pro Arg Val Ala Arg Leu Leu Cys Leu Gly130 135 140Val Trp Ala Leu Ile Leu Val Phe Ala Val Pro Ala Ala Arg Val His145 150 155 160Arg Pro Ser Arg Cys Arg Tyr Arg Asp Leu Glu Val Arg Leu Cys Phe165 170 175Glu Ser Phe Ser Asp Glu Leu Trp Lys Gly Arg Leu Leu Pro Leu Val180 185 190Leu Leu Ala Glu Ala Leu Gly Phe Leu Leu Pro Leu Ala Ala Val Val195 200 205Tyr Ser Ser Gly Arg Val Phe Trp Thr Leu Ala Arg Pro Asp Ala Thr210 215 220Gln Ser Gln Arg Arg Arg Lys Thr Val Arg Leu Leu Leu Ala Asn Leu225 230 235 240Val Ile Phe Leu Leu Cys Phe Val Pro Tyr Asn Ser Thr Leu Ala Val245 250 255Tyr Gly Leu Leu Arg Ser Lys Leu Val Ala Ala Ser Val Pro Ala Arg260 265 270Asp Arg Val Arg Gly Val Leu Met Val Met Val Leu Leu Ala Gly Ala275 280 285Asn Cys Val Leu Asp Pro Leu Val Tyr Tyr Phe Ser Ala Glu Gly Phe290 295 300Arg Asn Thr Leu Arg Gly Leu Gly Thr Pro His Arg Ala Arg Thr Ser305 310 315 320Ala Thr Asn Gly Thr Arg Ala Ala Leu Ala Gln Set Glu Arg Ser Ala325 330 335Val Thr Thr Asp Ala Thr Arg Pro Asp Ala Ala Ser Gln Gly Leu Leu340 345 350Arg Pro Ser Asp Ser His Ser Leu Ser Ser Phe Thr Gln Cys Pro Gln355 360 365Asp Ser Ala Leu370(6)SEQ ID NO5的资料(i)序列特征(A)长度1107个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO5的序列描述ATGGCCAACT CCACAGGGCT GAACGCCTCA GAAGTCGCAG GCTCGTTGGG GTTGATCCTG 60GCAGCTGTCG TGGAGGTGGG GGCACTGCTG GGCAACGGCG CGCTGCTGGT CGTGGTGCTG 120CGCACGCCGG GACTGCGCGA CGCGCTCTAC CTGGCGCACC TGTGCGTCGT GGACCTGCTG 180GCGGCCGCCT CCATCATGCC GCTGGGCCTG CTGGCCGCAC CGCCGCCCGG GCTGGGCCGC 240GTGCGCCTGG GCCCCGCGCC ATGCCGCGCC GCTCGCTTCC TCTCCGCCGC TCTGCTGCCG 300GCCTGCACGC TCGGGGTGGC CGCACTTGGC CTGGCACGCT ACCGCCTCAT CGTGCACCCG 360CTGCGGCCAG GCTCGCGGCC GCCGCCTGTG CTCGTGCTCA CCGCCGTGTG GGCCGCGGCG 420GGACTGCTGG GCGCGCTCTC CCTGCTCGGC CCGCCGCCCG CACCGCCCCC TGCTCCTGCT 480CGCTGCTCGG TCCTGGCTGG GGGCCTCGGG CCCTTCCGGC CGCTCTGGGC CCTGCTGGCC 540TTCGCGCTGC CCGCCCTCCT GCTGCTCGGC GCCTACGGCG GCATCTTCGT GGTGGCGCGT 600CGCGCTGCCC TGAGGCCCCC ACGGCCGGCG CGCGGGTCCC GACTCCGCTC GGACTCTCTG 660GATAGCCGCC TTTCCATCTT GCCGCCGCTC CGGCCTCGCC TGCCCGGGGG CAAGGCGGCC 720CTGGCCCCAG CGCTGGCCGT GGGCCAATTT GCAGCCTGCT GGCTGCCTTA TGGCTGCGCG 780TGCCTGGCGC CCGCAGCGCG GGCCGCGGAA GCCGAAGCGG CTGTCACCTG GGTCGCCTAC 840TCGGCCTTCG CGGCTCACCC CTTCCTGTAC GGGCTGCTGC AGCGCCCCGT GCGCTTGGCA 900CTGGGCCGCC TCTCTCGCCG TGCACTGCCT GGACCTGTGC GGGCCTGCAC TCCGCAAGCC 960TGGCACCCGC GGGCACTCTT GCAATGCCTC CAGAGACCCC CAGAGGGCCC TGCCGTAGGC 1020CCTTCTGAGG CTCCAGAACA GACCCCCGAG TTGGCAGGAG GGCGGAGCCC CGCATACCAG 1080GGGCCACCTG AGAGTTCTCT CTCCTGA 1107(7)SEQ ID NO6的资料(i)序列特征(A)长度368个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓扑学不相关(ii)分子类型蛋白质(xi)SEQ ID NO6的序列描述Met Ala Asn Ser Thr Gly Leu Asn Ala Ser Glu Val Ala Gly Ser Leu1 5 10 15Gly Leu Ile Leu Ala Ala Val Val Glu Val Gly Ala Leu Leu Gly Asn20 25 30Gly Ala Leu Leu Val Val Val Leu Arg Thr Pro Gly Leu Arg Asp Ala35 40 45Leu Tyr Leu Ala His Leu Cys Val Val Asp Leu Leu Ala Ala Ala Ser50 55 60Ile Met Pro Leu Gly Leu Leu Ala Ala Pro Pro Pro Gly Leu Gly Arg65 70 75 80Val Arg Leu Gly Pro Ala Pro Cys Arg Ala Ala Arg Phe Leu Ser Ala85 90 95Ala Leu Leu Pro Ala Cys Thr Leu Gly Val Ala Ala Leu Gly Leu Ala100 105 110Arg Tyr Arg Leu Ile Val His Pro Leu Arg Pro Gly Ser Arg Pro Pro115 120 125Pro Val Leu Val Leu Thr Ala Val Trp Ala Ala Ala Gly Leu Leu Gly130 135 140Ala Leu Ser Leu Leu Gly Pro Pro Pro Ala Pro Pro Pro Ala Pro Ala145 150 155 160Arg Cys Ser Val Leu Ala Gly Gly Leu Gly Pro Phe Arg Pro Leu Trp165 170 175Ala Leu Leu Ala Phe Ala Leu Pro Ala Leu Leu Leu Leu Gly Ala Tyr180 185 190Gly Gly Ile Phe Val Val Ala Arg Arg Ala Ala Leu Arg Pro Pro Arg195 200 205Pro Ala Arg Gly Ser Arg Leu Arg Ser Asp Ser Leu Asp Ser Arg Leu210 215 220Ser Ile Leu Pro Pro Leu Arg Pro Arg Leu Pro Gly Gly Lys Ala Ala225 230 235 240Leu Ala Pro Ala Leu Ala Val Gly Gln Phe Ala Ala Cys Trp Leu Pro245 250 255Tyr Gly Cys Ala Cys Leu Ala Pro Ala Ala Arg Ala Ala Glu Ala Glu260 265 270Ala Ala Val Thr Trp Val Ala Tyr Ser Ala Phe Ala Ala His Pro Phe275 280 285Leu Tyr Gly Leu Leu Gln Arg Pro Val Arg Leu Ala Leu Gly Arg Leu290 295 300Ser Arg Arg Ala Leu Pro Gly Pro Val Arg Ala Cys Thr Pro Gln Ala305 310 315 320Trp His Pro Arg Ala Leu Leu Gln Cys Leu Gln Arg Pro Pro Glu Gly325 330 335Pro Ala Val Gly Pro Ser Glu Ala Pro Glu Gln Thr Pro Glu Leu Ala340 345 350Gly Gly Arg Ser Pro Ala Tyr Gln Gly Pro Pro Glu Ser Ser Leu Ser355 360 365(8)SEQ ID NO7的资料(i)序列特征(A)长度1008个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO7的序列描述ATGGAATCAT CTTTCTCATT TGGAGTGATC CTTGCTGTCC TGGCCTCCCT CATCATTGCT 60ACTAACACAC TAGTGGCTGT GGCTGTGCTG CTGTTGATCC ACAAGAATGA TGGTGTCAGT 120CTCTGCTTCA CCTTGAATCT GGCTGTGGCT GACACCTTGA TTGGTGTGGC CATCTCTGGC 180CTACTCACAG ACCAGCTCTC CAGCCCTTCT CGGCCCACAC AGAAGACCCT GTGCAGCCTG 240CGGATGGCAT TTGTCACTTC CTCCGCAGCT GCCTCTGTCC TCACGGTCAT GCTGATCACC 300TTTGACAGGT ACCTTGCCAT CAAGCAGCCC TTCCGCTACT TGAAGATCAT GAGTGGGTTC 360GTGGCCGGGG CCTGCATTGC CGGGCTGTGG TTAGTGTCTT ACCTCATTGG CTTCCTCCCA 420CTCGGAATCC CCATGTTCCA GCAGACTGCC TACAAAGGGC AGTGCAGCTT CTTTGCTGTA 480TTTCACCCTC ACTTCGTGCT GACCCTCTCC TGCGTTGGCT TCTTCCCAGC CATGCTCCTC 540TTTGTCTTCT TCTACTGCGA CATGCTCAAG ATTGCCTCCA TGCACAGCCA GCAGATTCGA 600AAGATGGAAC ATGCAGGAGC CATGGCTGGA GGTTATCGAT CCCCACGGAC TCCCAGCGAC 660TTCAAAGCTC TCCGTACTGT GTCTGTTCTC ATTGGGAGCT TTGCTCTATC CTGGACCCCC 720TTCCTTATCA CTGGCATTGT GCAGGTGGCC TGCCAGGAGT GTCACCTCTA CCTAGTGCTG 780GAACGGTACC 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(A)长度1173个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO13的序列描述ATGCCAGATA CTAATAGCAC AATCAATTTA TCACTAAGCA CTCGTGTTAC TTTAGCATTT 60TTTATGTCCT TAGTAGCTTT TGCTATAATG CTAGGAAATG CTTTGGTCAT TTTAGCTTTT 120GTGGTGGACA AAAACCTTAG ACATCGAAGT AGTTATTTTT TTCTTAACTT GGCCATCTCT 180GACTTCTTTG TGGGTGTGAT CTCCATTCCT TTGTACATCC CTCACACGCT GTTCGAATGG 240GATTTTGGAA AGGAAATCTG TGTATTTTGG CTCACTACTG ACTATCTGTT ATGTACAGCA 300TCTGTATATA ACATTGTCCT CATCAGCTAT GATCGATACC TGTCAGTCTC AAATGCTGTG 360TCTTATAGAA CTCAACATAC TGGGGTCTTG AAGATTGTTA CTCTGATGGT GGCCGTTTGG 420GTGCTGGCCT TCTTAGTGAA TGGGCCAATG ATTCTAGTTT CAGAGTCTTG GAAGGATGAA 480GGTAGTGAAT GTGAACCTGG ATTTTTTTCG GAATGGTACA TCCTTGCCAT CACATCATTC 540TTGGAATTCG TGATCCCAGT CATCTTAGTC GCTTATTTCA ACATGAATAT TTATTGGAGC 600CTGTGGAAGC GTGATCATCT CAGTAGGTGC CAAAGCCATC CTGGACTGAC TGCTGTCTCT 660TCCAACATCT GTGGACACTC ATTCAGAGGT AGACTATCTT CAAGGAGATC TCTTTCTGCA 720TCGACAGAAG TTCCTGCATC CTTTCATTCA GAGAGACAGA GGAGAAAGAG TAGTCTCATG 780TTTTCCTCAA GAACCAAGAT GAATAGCAAT ACAATTGCTT CCAAAATGGG TTCCTTCTCC 840CAATCAGATT CTGTAGCTCT TCACCAAAGG GAACATGTTG AACTGCTTAG AGCCAGGAGA 900TTAGCCAAGT CACTGGCCAT TCTCTTAGGG GTTTTTGCTG TTTGCTGGGC TCCATATTCT 960CTGTTCACAA TTGTCCTTTC ATTTTATTCC TCAGCAACAG GTCCTAAATC AGTTTGGTAT 1020AGAATTGCAT TTTGGCTTCA GTGGTTCAAT TCCTTTGTCA ATCCTCTTTT GTATCCATTG 1080TGTCACAAGC GCTTTCAAAA GGCTTTCTTG AAAATATTTT GTATAAAAAA GCAACCTCTA 1140CCATCACAAC ACAGTCGGTC AGTATCTTCT TAA 1173(15)SEQ ID NO14的资料(i)序列特征(A)长度390个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓扑学不相关(ii)分子类型蛋白质(xi)SEQ ID NO14的序列描述Met Pro Asp Thr Asn Ser Thr Ile Asn Leu Ser Leu Ser Thr Arg Val1 5 10 15Thr Leu Ala Phe Phe Met Ser Leu Val Ala Phe Ala Ile Met Leu Gly20 25 30Asn Ala Leu Val Ile Leu Ala Phe Val Val Asp Lys Asn Leu Arg His35 40 45Arg Ser Ser Tyr Phe Phe Leu Asn Leu Ala Ile Ser Asp Phe Phe Val50 55 60Gly Val Ile Ser Ile Pro Leu Tyr Ile Pro His Thr Leu Phe Glu Trp65 70 75 80Asp Phe Gly Lys Glu Ile Cys Val Phe Trp Leu Thr Thr Asp Tyr Leu85 90 95Leu Cys Thr Ala Ser Val Tyr Asn Ile Val Leu Ile Ser Tyr Asp Arg100 105 110Tyr Leu Ser Val Ser Asn Ala Val Ser Tyr Arg Thr Gln His Thr Gly115 120 125Val Leu Lys Ile Val Thr Leu Met Val Ala Val Trp Val Leu Ala Phe130 135 140Leu Val Asn Gly Pro Met Ile Leu Val Ser Glu Ser Trp Lys Asp Glu145 150 155 160Gly Ser Glu Cys Glu Pro Gly Phe Phe Ser Glu Trp Tyr Ile Leu Ala165 170 175Ile Thr Ser Phe Leu Glu Phe Val Ile Pro Val Ile Leu Val Ala Tyr180 185 190Phe Asn Met Asn Ile Tyr Trp Ser Leu Trp Lys Arg Asp His Leu Ser195 200 205Arg Cys Gln Ser His Pro Gly Leu Thr Ala Val Ser Ser Asn Ile Cys210 215 220Gly His Ser Phe Arg Gly Arg Leu Ser Ser Arg Arg Ser Leu Ser Ala225 230 235 240Ser Thr Glu Val Pro Ala Ser Phe His Ser Glu Arg Gln Arg Arg Lys245 250 255Ser Ser Leu Met Phe Ser Ser Arg Thr Lys Met Asn Ser Asn Thr Ile260 265 270Ala Ser Lys Met Gly Ser Phe Ser Gln Ser Asp Ser Val Ala Leu His275 280 285Gln Arg Glu His Val Glu Leu Leu Arg Ala Arg Arg Leu Ala Lys Ser290 295 300Leu Ala Ile Leu Leu Gly Val Phe Ala Val Cys Trp Ala Pro Tyr Ser305 310 315 320Leu Phe Thr Ile Val Leu Ser Phe Tyr Ser Ser Ala Thr Gly Pro Lys325 330 335Ser Val Trp Tyr Arg Ile Ala Phe Trp Leu Gln Trp Phe Asn Ser Phe340 345 350Val Asn Pro Leu Leu Tyr Pro Leu Cys His Lys Arg Phe Gln Lys Ala355 360 365Phe Leu Lys Ile Phe Cys Ile Lys Lys Gln Pro Leu Pro Ser Gln His370 375 380Ser Arg Ser Val Ser Ser385 390(16)SEQ ID NO15的资料(i)序列特征(A)长度1128个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO15的序列描述ATGGCGAACG CGAGCGAGCC GGGTGGCAGC GGCGGCGGCG AGGCGGCCGC CCTGGGCCTC 60AAGCTGGCCA CGCTCAGCCT GCTGCTGTGC GTGAGCCTAG CGGGCAACGT GCTGTTCGCG 120CTGCTGATCG TGCGGGAGCG CAGCCTGCAC CGCGCCCCGT ACTACCTGCT GCTCGACCTG 180TGCCTGGCCG ACGGGCTGCG CGCGCTCGCC TGCCTCCCGG CCGTCATGCT GGCGGCGCGG 240CGTGCGGCGG CCGCGGCGGG GGCGCCGCCG GGCGCGCTGG GCTGCAAGCT GCTCGCCTTC 300CTGGCCGCGC TCTTCTGCTT CCACGCCGCC TTCCTGCTGC TGGGCGTGGG CGTCACCCGC 360TACCTGGCCA TCGCGCACCA CCGCTTCTAT GCAGAGCGCC TGGCCGGCTG GCCGTGCGCC 420GCCATGCTGG TGTGCGCCGC CTGGGCGCTG GCGCTGGCCG CGGCCTTCCC GCCAGTGCTG 480GACGGCGGTG GCGACGACGA GGACGCGCCG TGCGCCCTGG AGCAGCGGCC CGACGGCGCC 540CCCGGCGCGC TGGGCTTCCT GCTGCTGCTG GCCGTGGTGG TGGGCGCCAC GCACCTCGTC 600TACCTCCGCC TGCTCTTCTT CATCCACGAC CGCCGCAAGA TGCGGCCCGC GCGCCTGGTG 660CCCGCCGTCA GCCACGACTG GACCTTCCAC GGCCCGGGCG CCACCGGCCA GGCGGCCGCC 720AACTGGACGG CGGGCTTCGG CCGCGGGCCC ACGCCGCCCG CGCTTGTGGG CATCCGGCCC 780GCAGGGCCGG GCCGCGGCGC GCGCCGCCTC CTCGTGCTGG AAGAATTCAA GACGGAGAAG 840AGGCTGTGCA AGATGTTCTA CGCCGTCACG CTGCTCTTCC TGCTCCTCTG GGGGCCCTAC 900GTCGTGGCCA GCTACCTGCG GGTCCTGGTG CGGCCCGGCG CCGTCCCCCA GGCCTACCTG 960ACGGCCTCCG TGTGGCTGAC CTTCGCGCAG GCCGGCATCA ACCCCGTCGT GTGCTTCCTC 1020TTCAACAGGG AGCTGAGGGA CTGCTTCAGG GCCCAGTTCC CCTGCTGCCA GAGCCCCCGG 1080ACCACCCAGG CGACCCATCC CTGCGACCTG AAAGGCATTG GTTTATGA 1128(17)SEQ ID NO16的资料(i)序列特征
(A)长度375个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓扑学不相关(ii)分子类型蛋白质(xi)SEQ ID NO16的序列描述Met Ala Asn Ala Ser Glu Pro Gly Gly Ser Gly Gly Gly Glu Ala Ala1 5 10 15Ala Leu Gly Leu Lys Leu Ala Thr Leu Ser Leu Leu Leu Cys Val Ser20 25 30Leu Ala Gly Asn Val Leu Phe Ala Leu Leu Ile Val Arg Glu Arg Ser35 40 45Leu His Arg Ala Pro Tyr Tyr Leu Leu Leu Asp Leu Cys Leu Ala Asp50 55 60Gly Leu Arg Ala Leu Ala Cys Leu Pro Ala Val Met Leu Ala Ala Arg65 70 75 80Arg Ala Ala Ala Ala Ala Gly Ala Pro Pro Gly Ala Leu Gly Cys Lys85 90 95Leu Leu Ala Phe Leu Ala Ala Leu Phe Cys Phe His Ala Ala Phe Leu100 105 110Leu Leu Gly Val Gly Val Thr Arg Tyr Leu Ala Ile Ala His His Arg115 120 125Phe Tyr Ala Glu Arg Leu Ala Gly Trp Pro Cys Ala Ala Met Leu Val130 135 140Cys Ala Ala Trp Ala Leu Ala Leu Ala Ala Ala Phe Pro Pro Val Leu145 150 155 160Asp Gly Gly Gly Asp Asp Glu Asp Ala Pro Cys Ala Leu Glu Gln Arg165 170 175Pro Asp Gly Ala Pro Gly Ala Leu Gly Phe Leu Leu Leu Leu Ala Val180 185 190Val Val Gly Ala Thr His Leu Val Tyr Leu Arg Leu Leu Phe 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(A)长度1053个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO21的序列描述ATGGCTTTGG AACAGAACCA GTCAACAGAT TATTATTATG AGGAAAATGA AATGAATGGC 60ACTTATGACT ACAGTCAATA TGAATTGATC TGTATCAAAG AAGATGTCAG AGAATTTGCA 120AAAGTTTTCC TCCCTGTATT CCTCACAATA GCTTTCGTCA TTGGACTTGC AGGCAATTCC 180ATGGTAGTGG CAATTTATGC CTATTACAAG AAACAGAGAA CCAAAACAGA TGTGTACATC 240CTGAATTTGG CTGTAGCAGA TTTACTCCTT CTATTCACTC TGCCTTTTTG GGCTGTTAAT 300GCAGTTCATG GGTGGGTTTT AGGGAAAATA ATGTGCAAAA TAACTTCAGC CTTGTACACA 360CTAAACTTTG TCTCTGGAAT GCAGTTTCTG GCTTGCATCA GCATAGACAG ATATGTGGCA 420GTAACTAATG TCCCCAGCCA ATCAGGAGTG GGAAAACCAT GCTGGATCAT CTGTTTCTGT 480GTCTGGATGG CTGCCATCTT GCTGAGCATA CCCCAGCTGG TTTTTTATAC AGTAAATGAC 540AATGCTAGGT GCATTCCCAT TTTCCCCCGC TACCTAGGAA CATCAATGAA AGCATTGATT 600CAAATGCTAG AGATCTGCAT TGGATTTGTA GTACCCTTTC TTATTATGGG GGTGTGCTAC 660TTTATCACGG CAAGGACACT CATGAAGATG CCAAACATTA AAATATCTCG ACCCCTAAAA 720GTTCTGCTCA CAGTCGTTAT AGTTTTCATT GTCACTCAAC TGCCTTATAA CATTGTCAAG 780TTCTGCCGAG CCATAGACAT CATCTACTCC 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960AGCAGATGGG CTCATGAACT CCTACTTTCA TTCAGAGAAA AGTGA 1005(37)SEQ ID NO36的资料(i)序列特征(A)长度334个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓扑学不相关(ii)分子类型蛋白质(xi)SEQ ID NO36的序列描述Met Leu Gly Ile Met Ala Trp Asn Ala Thr Cys Lys Asn Trp Leu Ala1 5 l0 15Ala Glu Ala Ala Leu Glu Lys Tyr Tyr Leu Ser Ile Phe Tyr Gly Ile20 25 30Glu Phe Val Val Gly Val Leu Gly Asn Thr Ile Val Val Tyr Gly Tyr35 40 45Ile Phe Ser Leu Lys Asn Trp Asn Ser Ser Asn Ile Tyr Leu Phe Asn50 55 60Leu Ser Val Ser Asp Leu Ala Phe Leu Cys Thr Leu Pro Met Leu Ile65 70 75 80Arg Ser Tyr Ala Asn Gly Asn Trp Ile Tyr Gly Asp Val Leu Cys Ile85 90 95Ser Asn Arg Tyr Val Leu His Ala Asn Leu Tyr Thr Ser Ile Leu Phe100 105 110Leu Thr Phe Ile Ser Ile Asp Arg Tyr Leu Ile Ile Lys Tyr Pro Phe115 120 125Arg Glu His Leu Leu Gln Lys Lys Glu Phe Ala Ile Leu Ile Ser Leu130 135 140Ala Ile Trp Val Leu Val Thr Leu Glu Leu Leu Pro Ile Leu Pro Leu145 150 155 160lle Asn Pro Val Ile Thr Asp Ash Gly Thr Thr Cys Asn Asp Phe Ala165 170 175Ser Ser Gly Asp Pro Asn Tyr Asn Leu Ile Tyr Ser Met Cys Leu Thr180 185 190Leu Leu Gly Phe Leu Ile Pro Leu Phe Val Met Cys Phe Phe Tyr Tyr195 200 205Lys Ile Ala Leu Phe Leu Lys Gln Arg Asn Arg Gln Val Ala Thr Ala210 215 220Leu Pro Leu Glu Lys Pro Leu Asn Leu Val Ile Met Ala Val Val Ile225 230 235 240Phe Ser Val Leu Phe Thr Pro Tyr His Val Met Arg Asn Val Arg Ile245 250 255Ala Ser Arg Leu Gly Ser Trp Lys Gln Tyr Gln Cys Thr Gln Val Val260 265 270Ile Asn Ser Phe Tyr Ile Val Thr Arg Pro Leu Ala Phe Leu Asn Ser275 280 285Val Ile Asn Pro Val Phe Tyr Phe Leu Leu Gly Asp His Phe Arg Asp290 295 300Met Leu Met Asn Gln Leu Arg His Asn Phe Lys Ser Leu Thr Ser Phe305 310 315 320Ser Arg Trp Ala His Glu Leu Leu Leu Ser Phe Arg Glu Lys325 330(38)SEQ ID NO37的资料(i)序列特征(A)长度1296个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO37的序列描述ATGCAGGCGC TTAACATTAC CCCGGAGCAG TTCTCTCGGC TGCTGCGGGA CCACAACCTG 60ACGCGGGAGC AGTTCATCGC TCTGTACCGG CTGCGACCGC TCGTCTACAC CCCAGAGCTG 120CCGGGACGCG CCAAGCTGGC CCTCGTGCTC ACCGGCGTGC TCATCTTCGC CCTGGCGCTC 180TTTGGCAATG CTCTGGTGTT CTACGTGGTG ACCCGCAGCA AGGCCATGCG CACCGTCACC 240AACATCTTTA TCTGCTCCTT GGCGCTCAGT GACCTGCTCA TCACCTTCTT CTGCATTCCC 300GTCACCATGC TCCAGAACAT TTCCGACAAC TGGCTGGGGG GTGCTTTCAT TTGCAAGATG 360GTGCCATTTG TCCAGTCTAC CGCTGTTGTG ACAGAAATGC TCACTATGAC CTGCATTGCT 420GTGGAAAGGC ACCAGGGACT TGTGCATCCT TTTAAAATGA AGTGGCAATA CACCAACCGA 480AGGGCTTTCA CAATGCTAGG TGTGGTCTGG CTGGTGGCAG TCATCGTAGG ATCACCCATG 540TGGCACGTGC AACAACTTGA GATCAAATAT GACTTCCTAT ATGAAAAGGA ACACATCTGC 600TGCTTAGAAG AGTGGACCAG CCCTGTGCAC CAGAAGATCT ACACCACCTT CATCCTTGTC 660ATCCTCTTCC TCCTGCCTCT TATGGTGATG CTTATTCTGT ACAGTAAAAT TGGTTATGAA 720CTTTGGATAA AGAAAAGAGT TGGGGATGGT TCAGTGCTTC GAACTATTCA TGGAAAAGAA 780ATGTCCAAAA TAGCCAGGAA GAAGAAACGA GCTGTCATTA TGATGGTGAC AGTGGTGGCT 840CTCTTTGCTG TGTGCTGGGC ACCATTCCAT GTTGTCCATA TGATGATTGA ATACAGTAAT 900TTTGAAAAGG AATATGATGA TGTCACAATC AAGATGATTT TTGCTATCGT GCAAATTATT 960GGATTTTCCA ACTCCATCTG TAATCCCATT GTCTATGCAT TTATGAATGA AAACTTCAAA 1020AAAAATGTTT TGTCTGCAGT TTGTTATTGC ATAGTAAATA AAACCTTCTC TCCAGCACAA 1080AGGCATGGAA ATTCAGGAAT TACAATGATG CGGAAGAAAG CAAAGTTTTC CCTCAGAGAG 1140AATCCAGTGG AGGAAACCAA AGGAGAAGCA TTCAGTGATG GCAACATTGA AGTCAAATTG 1200TGTGAACAGA CAGAGGAGAA GAAAAAGCTC AAACGACATC TTGCTCTCTT TAGGTCTGAA 1260CTGGCTGAGA ATTCTCCTTT AGACAGTGGG CATTAA 1296(39)SEQ ID NO38的资料(i)序列特征(A)长度431个氨基酸(B)类型氨基酸(C)链型(D)拓扑学不相关(ii)分子类型蛋白质(xi)SEQ ID NO38的序列描述Met Gln Ala Leu Asn Ile Thr Pro Glu Gln Phe Ser Arg Leu Leu Arg1 5 10 15Asp His Asn Leu Thr Arg Glu Gln Phe Ile Ala Leu Tyr Arg Leu Arg20 25 30Pro Leu Val Tyr Thr Pro Glu Leu Pro Gly Arg Ala Lys Leu Ala Leu35 40 45Val Leu Thr Gly Val Leu Ile Phe Ala Leu Ala Leu Phe Gly Asn Ala50 55 60Leu Val Phe Tyr Val Val Thr Arg Ser Lys Ala Met Arg Thr Val Thr65 70 75 80Asn Ile Phe Ile Cys Ser Leu Ala Leu Ser Asp Leu Leu Ile Thr Phe85 90 95Phe Cys Ile Pro Val Thr Met Leu Gln Asn Ile Ser Asp Asn Trp Leu100 105 110Gly Gly Ala Phe Ile Cys Lys Met Val Pro Phe Val Gln Ser Thr Ala115 120 125Val Val Thr Glu Met Leu Thr Met Thr Cys Ile Ala Val Glu Arg His130 135 140Gln Gly Leu Val His Pro Phe Lys Met Lys Trp Gln Tyr Thr Asn Arg145 150 155 160Arg Ala Phe Thr Met Leu Gly Val Val Trp Leu Val Ala Val Ile Val165 170 175Gly Ser Pro Met Trp His Val Gln Gln Leu Glu Ile Lys Tyr Asp Phe180 185 190Leu Tyr Glu Lys Glu His Ile Cys Cys Leu Glu Glu Trp Thr Ser Pro195 200 205Val His Gln Lys Ile Tyr Thr Thr Phe Ile Leu Val Ile Leu Phe Leu210 215 220Leu Pro Leu Met Val Met Leu Ile Leu Tyr Ser Lys Ile Gly Tyr Glu225 230 235 240Leu Trp Ile Lys Lys Arg Val Gly Asp Gly Ser Val Leu Arg Thr Ile245 250 255His Gly Lys Glu Met Ser Lys Ile Ala Arg Lys Lys Lys Arg Ala Val260 265 270Ile Met Met Val Thr Val Val Ala Leu Phe Ala Val Cys Trp Ala Pro275 280 285Phe His Val Val His Met Met Ile Glu Tyr Ser Asn Phe Glu Lys Glu290 295 300Tyr Asp Asp Val Thr Ile Lys Met Ile Phe Ala Ile Val Gln Ile Ile305 310 315 320Gly Phe Ser Asn Ser Ile Cys Asn Pro Ile Val Tyr Ala Phe Met Asn325 330 335Glu Asn Phe Lys Lys Asn Val Leu Ser Ala Val Cys Tyr Cys Ile Val340 345 350Asn Lys Thr Phe Ser Pro Ala Gln Arg His Gly Asn Ser Gly Ile Thr355 360 365Met Met Arg Lys Lys Ala Lys Phe Ser Leu Arg Glu Asn Pro Val Glu370 375 380Glu Thr Lys Gly Glu Ala Phe Ser Asp Gly Asn Ile Glu Val Lys Leu385 390 395 400Cys Glu Gln Thr Glu Glu Lys Lys Lys Leu Lys Arg His Leu Ala Leu405 410 415Phe Arg Ser Glu Leu Ala Glu Asn Ser Pro Leu Asp Ser Gly His420 425 430(40)SEQ ID NO39的资料(i)序列特征(A)长度24个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO39的序列描述CTGTGTACAG CAGTTCGCAG AGTG 24(41)SEQ ID NO40的资料(i)序列特征(A)长度24个碱基对(B)类型核酸
(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO40的序列描述GAGTGCCAGG CAGAGCAGGT AGAC 24(42)SEQ ID NO41的资料(i)序列特征(A)长度31个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO41的序列描述CCCGAATTCC TGCTTGCTCC CAGCTTGGCC C 31(43)SEQ ID NO42的资料(i)序列特征(A)长度32个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO42的序列描述TGTGGATCCT GCTGTCAAAG GTCCCATTCC GG 32(44)SEQ ID NO43的资料(i)序列特征(A)长度20个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO43的序列描述TCACAATGCT AGGTGTGGTC 20(45)SEQ ID NO44的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO44的序列描述TGCATAGACA ATGGGATTAC AG 22(46)SEQ ID NO45的资料(i)序列特征(A)长度511个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO45的序列描述TCACAATGCT AGGTGTGGTC TGGCTGGTGG CAGTCATCGT AGGATCACCC ATGTGGCACG 60TGCAACAACT TGAGATCAAA TATGACTTCC TATATGAAAA GGAACACATC TGCTGCTTAG 120AAGAGTGGAC CAGCCCTGTG CACCAGAAGA TCTACACCAC CTTCATCCTT GTCATCCTCT 180TCCTCCTGCC TCTTATGGTG ATGCTTATTC TGTACGTAAA ATTGGTTATG AACTTTGGAT 240AAAGAAAAGA GTTGGGGATG GTTCAGTGCT TCGAACTATT CATGGAAAAG AAATGTCCAA 300AATAGCCAGG AAGAAGAAAC GAGCTGTCAT TATGATGGTG ACAGTGGTGG CTCTCTTTGC 360TGTGTGCTGG GCACCATTCC ATGTTGTCCA TATGATGATT GAATACAGTA ATTTTGAAAA 420GGAATATGAT GATGTCACAA TCAAGATGAT TTTTGCTATC GTGCAAATTA TTGGATTTTC 480CAACTCCATC TGTAATCCCA TTGTCTATGC A511(47)SEQ ID NO46的资料(i)序列特征(A)长度21个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO46的序列描述CTGCTTAGAA GAGTGGACCA G 21(48)SEQ ID NO47的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO47的序列描述CTGTGCACCA GAAGATCTAC AC22(49)SEQ ID NO48的资料(i)序列特征(A)长度21个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO48的序列描述CAAGGATGAA GGTGGTGTAG A 21(50)SEQ ID NO49的资料(i)序列特征(A)长度23个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO49的序列描述GTGTAGATCT TCTGGTGCAC AGG 23(51)SEQ ID NO50的资料(i)序列特征(A)长度21个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(xi)SEQ ID NO50的序列描述GCAATGCAGG TCATAGTGAG C 21(52)SEQ ID NO51的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iii)推定的是(iv)反义是(xi)SEQ ID NO51的序列描述TGGAGCATGG TGACGGGAAT GCAGAAG 27(53)SEQ ID NO52的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO52的序列描述GTGATGAGCA GGTCACTGAG CGCCAAG 27(54)SEQ ID NO53的资料(i)序列特征(A)长度23个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO53的序列描述GCAATGCAGG CGCTTAACAT TAC 23(55)SEQ ID NO54的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO54的序列描述TTGGGTTACA ATCTGAAGGG CA22(56)SEQ ID NO55的资料(i)序列特征(A)长度23个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO55的序列描述ACTCCGTGTC CAGCAGGACT CTG 23(57)SEQ ID NO56的资料(i)序列特征(A)长度24个碱基对(B)类型核酸
(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO56的序列描述TGCGTGTTCC TGGACCCTCA CGTG24(58)SEQ ID NO57的资料(i)序列特征(A)长度29个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO57的序列描述CAGGCCTTGG ATTTTAATGT CAGGGATGG 29(59)SEQ ID NO58的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO58的序列描述GGAGAGTCAG CTCTGAAAGA ATTCAGG 27(60)SEQ ID NO59的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO59的序列描述TGATGTGATG CCAGATACTA ATAGCAC 27(61)SEQ ID NO60的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO60的序列描述CCTGATTCAT TTAGGTGAGA TTGAGAC 27(62)SEQ ID NO61的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO61的序列描述GACAGGTACC TTGCCATCAA G 21(63)SEQ ID NO62的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO62的序列描述CTGCACAATG CCAGTGATAA GG22(64)SEQ ID NO63的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO63的序列描述CTGACTTCTT GTTCCTGGCA GCAGCGG 27(65)SEQ ID NO64的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO64的序列描述AGACCAGCCA GGGCACGCTG AAGAGTG 27(66)SEQ ID NO65的资料(i)序列特征(A)长度32个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO65的序列描述GATCAAGCTT CCATCCTACT GAAACCATGG TC 32(67)SEQ ID NO66的资料(i)序列特征
(A)长度35个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO66的序列描述GATCAGATCT CAGTTCCAAT ATTCACACCA CCGTC 35(68)SEQ ID NO67的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO67的序列描述CTGGTGTGCT CCATGGCATC CC 22(69)SEQ ID NO68的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO68的序列描述GTAAGCCTCC CAGAACGAGA GG 22(70)SEQ ID NO69的资料(i)序列特征(A)长度24个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链
(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO69的序列描述CAGCGCAGGG TGAAGCCTGA GAGC 24(71)SEQ ID NO70的资料(i)序列特征(A)长度24个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO70的序列描述GGCACCTGCT GTGACCTGTG CAGG 24(72)SEQ ID NO71的资料(i)序列特征(A)长度22个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO71的序列描述GTCCTGCCAC TTCGAGACAT GG22(73)SEQ ID NO72的资料(i)序列特征(A)长度23个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO72的序列描述GAAACTTCTC TGCCCTTACC GTC 23(74)SEQ ID NO73的资料(i)序列特征(A)长度26个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组的)(iv)反义否(xi)SEQ ID NO73的序列描述CCAACACCAG CATCCATGGC ATCAAG26(75)SEQ ID NO74的资料(i)序列特征(A)长度27个碱基对(B)类型核酸(C)链型单链(D)拓扑学线形(ii)分子类型DNA(基因组)(iv)反义是(xi)SEQ ID NO74的序列描述GGAGAGTCAG CTCTGAAAGA ATTCAGG 2权利要求
1.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.1。
2.由SEQ.ID.NO.1所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.2。
3.含有载体和SEQ.ID.NO.1所示cDNA的质粒。
4.含有权利要求3所述的质粒的宿主细胞。
5.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.3。
6.由的SEQ.ID.NO.3所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.4。
7.含有载体和SEQ.ID.NO.3所示的cDNA的质粒。
8.含有权利要求7所述的质粒的宿主细胞。
9.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.5。
10.由SEQ.ID.NO.5所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.6。
11.含有载体和SEQ.ID.NO.5所示cDNA的质粒。
12.含有权利要求11所述的质粒的宿主细胞。
13.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.7。
14.由SEQ.ID.NO.7所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.8。
15.含有载体和SEQ.ID.NO.7所示的cDNA的质粒。
16.含有权利要求15所述的质粒的宿主细胞。
17.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.9。
18.由SEQ.ID.NO.9所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.10。
19.含有载体和SEQ.ID.NO.9所示cDNA的质粒。
20.含有权利要求19所述的质粒的宿主细胞。
21.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.11。
22.由SEQ.ID.NO.11所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.12。
23.含有载体和SEQ.ID.NO.11所示的cDNA的质粒。
24.含有权利要求23所述的质粒的宿主细胞。
25.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.13。
26.由SEQ.ID.NO.13所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.14。
27.含有载体和SEQ.ID.NO.13所示cDNA的质粒。
28.含有权利要求27所述的质粒的宿主细胞。
29.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.15。
30.由SEQ.ID.NO.15所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.16。
31.含有载体和SEQ.ID.NO.15所示的cDNA的质粒。
32.含有权利要求31所述的质粒的宿主细胞。
33.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.17。
34.由SEQ.ID.NO.17所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.18。
35.含有载体和SEQ.ID.NO.17所示cDNA的质粒。
36.含有权利要求35所述的质粒的宿主细胞。
37.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.19。
38.由SEQ.ID.NO.19所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.20。
39.含有载体和SEQ.ID.NO.19所示的cDNA的质粒。
40.含有权利要求39所述的质粒的宿主细胞。
41.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.21。
42.由SEQ.ID.NO.21所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.22。
43.含有载体和SEQ.ID.NO.21所示cDNA的质粒。
44.含有权利要求43所述的质粒的宿主细胞。
45.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.23。
46.由SEQ.ID.NO.23所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.24。
47.含有载体和SEQ.ID.NO.23所示的cDNA的质粒。
48.含有权利要求47所述的质粒的宿主细胞。
49.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.25。
50.由SEQ.ID.NO.25所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.26。
51.含有载体和SEQ.ID.NO.25所示cDNA的质粒。
52.含有权利要求51所述的质粒的宿主细胞。
53.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.27。
54.由SEQ.ID.NO.27所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.28。
55.含有载体和SEQ.ID.NO.27所示的cDNA的质粒。
56.含有权利要求55所述的质粒的宿主细胞。
57.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.29。
58.由SEQ.ID.NO.29所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.30。
59.含有载体和SEQ.ID.NO.29所示cDNA的质粒。
60.含有权利要求59所述的质粒的宿主细胞。
61.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.31。
62.由SEQ.ID.NO.31所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.32。
63.含有载体和SEQ.ID.NO.31所示的cDNA的质粒。
64.含有权利要求63所述的质粒的宿主细胞。
65.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.33。
66.由SEQ.ID.NO.33所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.34。
67.含有载体和SEQ.ID.NO.33所示cDNA的质粒。
68.含有权利要求67所述的质粒的宿主细胞。
69.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.35。
70.由SEQ.ID.NO.35所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.36。
71.含有载体和SEQ.ID.NO.35所示的cDNA的质粒。
72.含有权利要求71所述的质粒的宿主细胞。
73.编码人G蛋白偶联受体的cDNA，其包含SEQ.ID.NO.37。
74.由SEQ.ID.NO.37所示的cDNA编码的人G蛋白偶联受体，其包含SEQ.ID.NO.38。
75.含有载体和SEQ.ID.NO.37所示的cDNA的质粒。
76.含有权利要求75所述的质粒的宿主细胞。
全文摘要
本发明申请文件所公开的发明涉及跨膜受体;具体地讲,涉及与人内源G蛋白偶联的孤儿受体。
文档编号C07K14/72GK1344319SQ99812713
公开日2002年4月10日 申请日期1999年10月13日 优先权日1998年11月20日
发明者陈若平, 邓杭, 廖王蓁, 林伊玲 申请人:阿瑞那制药公司