一种莼菜多糖提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种莼菜多糖提取方法，将冻干莼菜粉碎，采用石油醚于50℃下抽提脱脂，室温下挥干溶剂后，置于烘箱中40℃烘干，得到烘干后的莼菜粉，加入NaOH溶液，于水浴振荡器上震荡提取，然后进行离心处理，得到含有莼菜多糖的上清液，提取出上清液，剩下莼菜粉沉淀物加入NaOH溶液继续提取，提取次数总共四次，将每次得到的上清液合并，得到最终含有多糖的上清液，测定多糖得率。本发明的有益效果是莼菜原材料利用率高，效果好，用本发明的方法提取莼菜多糖产量高。
【专利说明】一种莼菜多糖提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物提取多糖的方法【技术领域】，涉及一种莼菜多糖提取方法。
【背景技术】
[0002] 莼菜为我国传统珍稀水生蔬菜，具有丰富的营养价值和药用价值，据《本草纲目》 记载，莼菜具有消渴热痹、治热疸、厚肠胃、安下焦、逐水、解百毒等功效。重庆石柱莼菜生长 于重庆市东南部三峡库区腹地的土家族自治县，平均海拔1500米以上，水质良好，土壤肥 沃，莼菜年产量达1000吨，是我国乃至亚洲、全世界最大的莼菜基地。研究表明，莼菜多糖 具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、降血糖、消炎抑菌、改善便秘和增进食欲的作用，具有较高的 保健价值。国外莼菜多糖价格昂贵，国际市场售价已达到3000美元/千克。目前关于莼菜 多糖提取方面的研究极少，采用传统方法提取产量低，利用率低。极大制约了莼菜产业的发 展。研究发现，构成莼菜多糖的主要是碱溶性的酸性多糖和少量的中性多糖，故考虑采用碱 液浸提法进行提取。本实验以石柱莼菜为研究对象，研究了影响莼菜多糖提取的主要因素， 并采用正交试验进行优化，研究实验条件下最佳提取工艺。
[0003] 莼菜多糖是莼菜的主要特征成分之一，主要存在于莼菜表面的胶质中，研究发现 胶质中主要由酸性多糖和中性多糖组成。莼菜多糖提取研究较少，采用的方法也比较单一。 周毅峰等对莼菜胶质的分离条件作了研究。王婧以解冻莼菜芽为原料，选择了莼菜多糖的 提取溶剂，研究了莼菜多糖的提取工艺，但尚未进行工艺优化。溶剂提取法是多糖提取方法 中较为传统的方法，也是多糖提取使用较多的一种方法，较为经济，但是花费时间较长，同 时所需的温度也较高，并且提取多糖的同时，蛋白质、色素等也会随之渗出。酶辅助提取法 也是多糖提取较为常用的方法，利用的酶专一性的性质，如采用纤维素酶，破坏植物细胞 壁，使有效成分得以溶出的方法，酶法辅助提取具有提取率高、花费时间短、环境污染小的 特点，但是需要研究酶的种类且存在成本大幅升高的问题，不好实现产业化。总体上讲传 统提取方式实现成本低的同时多糖提取率较低。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在提供一种莼菜多糖提取方法，解决了现有的莼菜多糖传统提取方 法提取出来的多糖产量低，莼菜产出多糖率低的问题。
[0005] 本发明的技术方案为按照以下步骤进行：
[0006]步骤1，将冻干莼菜粉碎，过40目筛，采用石油醚于50°C下抽提脱脂，抽提脱脂的 时间为1. 9-2. 1小时，室温下挥干溶剂后，置于烘箱中40°C烘干，得到烘干后的莼菜粉进行 下一步骤；
[0007] 步骤2,在莼菜粉中加入NaOH溶液，于水浴振荡器上震荡提取，振荡频率 为175-185r/min;提取1-5小时，提取温度30°C_90°C，然后进行离心处理，离心转速 7300-7700r/min，离心时间4-6min;得到含有莼菜多糖的上清液，提取出上清液，剩下莼菜 粉沉淀物进行下一步；
[0008] 步骤3,将莼菜粉沉淀物加入NaOH溶液继续提取，选取莼菜粉沉淀物加入NaOH溶 液，重复上一步骤进行震荡提取和离心的过程，再次提取出得到的上清液；
[0009] 步骤4,重复步骤3共4次，将每次得到的上清液合并，得到最终含有多糖的上清 液，测定多糖得率。
[0010] 进一步，所述步骤1中，石油醚沸程为30?60°C。
[0011] 进一步，所述步骤2中，在莼菜粉中加入NaOH溶液，料液比为1:24-1:36 (g/mL); NaOH溶液浓度为 0· 09-0.llmol/L。
[0012] 进一步，所述步骤3中，莼菜粉沉淀物与NaOH溶液料液比为1:24-1:36 (g/mL)。
[0013] 本发明的有益效果是莼菜原材料利用率高，效果好，用本发明的方法提取莼菜多 糖产量高。
【专利附图】
【附图说明】
[0014] 图1是本发明吸光值与葡萄糖标准曲线图；
[0015] 图2是本发明氢氧化钠浓度对提取率的影响曲线图；
[0016] 图3是本发明料液比对提取率的影响曲线图；
[0017] 图4是本发明提取次数对提取率的影响曲线图；
[0018] 图5是本发明浸提温度对提取率的影响曲线图；
[0019] 图6是本发明提取时间对多糖提取率的影响曲线图；
[0020] 图7是本发明震荡频率对多塘提取率的影响曲线图。
【具体实施方式】
[0021] 下面结合附图和【具体实施方式】对本发明进行详细说明。
[0022] 本发明中莼菜多糖提取工艺流程为：
[0023] 步骤1，将冻干莼菜粉碎，过40目筛，采用石油醚沸程为30?60°C，于50°C下抽提 脱脂，抽提脱脂的时间为1. 9-2. 1小时，室温下挥干溶剂后，置于烘箱中40°C烘干，得到烘 干后的莼菜粉进行下一步骤；
[0024] 步骤2,在莼菜粉中加入NaOH溶液，料液比为1:24-1:36 (g/mL) ;NaOH溶液浓度为 0. 09-0.llmol/L，于水浴振荡器上震荡提取，振荡频率为175-185r/min;提取1-5小时，提 取温度30°C-90°C，然后进行离心处理，离心转速7300-7700r/min，离心时间4-6min;得到 含有莼菜多糖的上清液，提取出上清液，剩下莼菜粉沉淀物进行下一步；
[0025] 步骤3,将莼菜粉沉淀物加入NaOH溶液继续提取，选取莼菜粉沉淀物加入NaOH溶 液，莼菜粉沉淀物与NaOH溶液料液比为1:24-1:36 (g/mL)，重复上一步骤进行震荡提取和 离心的过程，再次提取出得到的上清液；
[0026] 步骤4,重复步骤3共4次，将每次得到的上清液合并，得到最终含有多糖的上清 液，测定多糖得率。
[0027] 对此种方法进行分析，主要试剂有葡糖糖、硫酸、苯酚、石油醚、氢氧化钠。以上试 剂均为分析用。仪器与设备的准备，JA300B电子天平、FA2004B电子天平上海精天仪器厂； 邛-260恒温水浴锅、1?3203-1旋转蒸发器上海亚荣生化仪器厂 ；3耶-111循环水式多用真 空泵郑州长城科工贸有限公司；5804R台式高速离心机德国Eppendorf公司；CJ-78-1磁 力加热搅拌上海将任实验设备有限公司；ALPAAI-4LSC真空冷冻干燥机德国Chist公司；UV-2450紫外分光光度计日本岛津公司；QL-901旋涡混合器海门市其林贝尔仪器制造有限 公司。下面是对发明方法的实验；
[0028] 多糖提取单因素试验：
[0029] 以总糖浸出率为指标评价莼菜多糖的提取效果。单因素试验基本条件设定为： NaOH溶液浓度0.lmol/L，提取温度60°C，料液比1:30 (g/mL)，提取时间2h，提取次数2次， 振荡频率为175r/min。在改变一个条件，固定其他条件的情况下，分析NaOH溶液浓度、提 取时间、提取次数、提取温度、振荡频率、料液比对提取率的影响。各因素梯度分别为=NaOH 溶液浓度：〇· 〇1、〇· 05、0· 1、0· 15、(X2mol/L;水提时间：l、2、3、4、5h;料液比：1:10、1:30、 1:50、1:70 ;提取次数：1、2、3、4 次；提取温度：30、50、70、90°C;振荡频率：60、100、140、180、 220r/min。每个单因素重复试验3次，结果取平均值。
[0030] 多糖提取的正交试验设计：
[0031] 根据单因素实验结果，选取四个主要影响因子：选取料液比、NaOH溶液浓度、提取 次数、振荡频率，采用正交表L9 (34)进行正交试验。实验因素及水平如下表1所示：
[0032]表1
[0033]
【权利要求】
1. 一种莼菜多糖提取方法，其特征在于：按照以下步骤进行： 步骤1，将冻干莼菜粉碎，过40目筛，采用石油醚于50°C下抽提脱脂，抽提脱脂的时间 为1. 9-2. 1小时，室温下挥干溶剂后，置于烘箱中40°C烘干，得到烘干后的莼菜粉进行下一 步骤； 步骤2,在莼菜粉中加入NaOH溶液，于水浴振荡器上震荡提取，振荡频率为175-185r/ min ;提取1-5小时，提取温度30°C -90°C，然后进行离心处理，离心转速7300-7700r/min， 离心时间4-6min ;得到含有莼菜多糖的上清液，提取出上清液，剩下莼菜粉沉淀物进行下 一步； 步骤3，将莼菜粉沉淀物加入NaOH溶液继续提取，选取莼菜粉沉淀物加入NaOH溶液，重 复上一步骤进行震荡提取和离心的过程，再次提取出得到的上清液； 步骤4,重复步骤3共4次，将每次得到的上清液合并，得到最终含有多糖的上清液，测 定多糖得率。
2. 按照权利要求1所述一种莼菜多糖提取方法，其特征在于：所述步骤1中，石油醚沸 程为30?60°C。
3. 按照权利要求1所述一种莼菜多糖提取方法，其特征在于：所述步骤2中，在莼菜粉 中加入NaOH溶液，料液比为1:24-1:36 (g/mL) ;NaOH溶液浓度为0.09-0. llmol/L。
4. 按照权利要求1所述一种莼菜多糖提取方法，其特征在于：所述步骤3中，莼菜粉沉 淀物与NaOH溶液料液比为1:24-1:36 (g/mL)。
【文档编号】C08B37/00GK104341533SQ201410603567
【公开日】2015年2月11日 申请日期:2014年10月31日 优先权日:2014年10月31日
【发明者】张宇昊, 马良, 刘馨 申请人:西南大学