一种肠膜蛋白多肽提取工艺的制作方法

文档序号:11278892阅读:169来源:国知局

本发明属于生物制药及饲料生产技术领域。



背景技术:

我国是世界上最重要的天然肠衣生产和出口大国,全世界60%以上的肠衣需要在我国加工和出口。而肠衣生产中产生的小肠粘膜,通过加工可得粗品肝素及肠膜蛋白饲料。目前的肝素钠原生产工艺流程如下:

1、猪小肠验收(确保猪小肠原材料的质量,主要为新鲜度)。

2、粘膜提取(通过刮制得小肠粘膜)。

3、酶解:加盐,加盐为粘膜液的3.5%~4%,调整ph至8.5~9后升温至55~58℃,盐解1小时;然后蛋白酶,按每根小肠加2~3克蛋白酶,并升温至85~90℃后保温2小时。

4、吸附:将过滤后的酶解液降温至55~60℃后加入树脂,酶解液吸附肝素钠,吸附8小时。

5、洗脱:

①将80目尼龙布过滤袋套在吸附罐的阀门口,边搅拌边放液,最后用清水将剩余的树脂冲出;

②将盛有树脂的尼龙布袋放入清水中清洗,直至无杂物为止;③将收集在尼龙布袋中的树脂放入含盐度为波美度5°的盐水中漂洗20~30分钟;④用盐水三次洗脱树脂,使树脂与附着的肝素钠分离。

6、沉淀:

①一次洗脱水单独沉淀或一次洗脱水合二次洗脱水合并沉淀;②按酒精与洗脱水的体积比为2~2.5:1加入酒精,然后用塑料棒搅匀直至出现颗粒为止,此时酒精度应为40~45度;③沉淀24小时。

以上工艺为目前大多数厂家所采用,最大的缺点是附产物肠膜蛋白全都变成废水排弃,不但浪费了宝贵的肠膜蛋白资源,又污染了环境。



技术实现要素:

本发明目的是提出一种充分利用资源的肠膜蛋白多肽提取工艺。

本发明技术方案是:将刮制取得的小肠粘膜液以盐解后,采用离心式过滤,分别取得滤出液和滤渣;将滤出液经吸附、洗脱和沉淀取得肝素钠;将滤渣以蛋白酶进行酶解处理后,经干燥取得肠膜蛋白。

本发明首先解决了大量的肠粘膜盐解液的分离问题,使盐解肝素液与肠膜蛋白有效分离,由于肝素水分离后较以前澄清,使树脂吸附更为便利,提高了肝素的收率;其次节约了人力,在原生产工艺中采用灌袋吊滤后再压滤,劳动强度大且过滤效果差速度慢,不能

适应大生产需要。本发明采用改用离心式过滤技术后,每小时可处理8至12吨的物料,每天可处理100至150吨物料,可生产1~2吨肠膜蛋白,肠膜蛋白的含固量可达35%左右,可大大增加生产经济效益,还有利于改善环境。

所述盐解是:先在小肠粘膜液中加入食盐,然后调整混合物的ph至8.5~10,升温至55~58℃,保温2小时,然后再升温至100℃,保温10分钟以上,取得盐解后混合物。所述盐解时,盐与粘膜液的投料质量比为3.5~4︰100。

本发明离心式过滤的条件是:在螺旋差速为15~25r/min、转速为2000~2150r/min、分离因素为2250的卧螺离心机。

本发明所述酶解处理的温度条件是52~57℃。其中,滤渣与蛋白酶的混合质量比为200:1。

将酶解处理后得到的酶解液置于75~80℃温度条件下干燥10~12小时。

具体实施方式

1、猪小肠验收,确保猪小肠原材料的质量,主要是新鲜度的把控。

2、粘膜提取:通过刮制,取得小肠粘膜液。

3、盐解:在小肠粘膜液中加入食盐,加盐量为粘膜液的3.5%~4%(质量百分比),以氢氧化钠调整混合物的ph至8.5~10,升温至55~58℃,保温2小时,然后再升温至100℃,保温10分钟以上,取得盐解后混合物。

4、离心过滤:将盐解后混合物置于lw450×2060ns卧螺离心机内,在螺旋差速为15~25r/min、转速为2000~2150r/min、分离因素为2250的条件下进行离心式过滤,分别取得滤出液和滤渣。

5、吸附:将步骤4取得的滤出液降温至55~57℃后加入树脂,盐解液吸附肝素钠,吸附8小时。

6、洗脱:

①将80目尼龙布过滤袋套在吸附罐的阀门口,边搅拌边放液,最后用清水将剩余的树脂冲出;

②将盛有树脂的尼龙布袋放入清水中清洗,直至无杂物为止;③将收集在尼龙布袋中的树脂放入含盐度为波美度5°的盐水中漂洗20~30分钟;④用盐水三次洗脱树脂,使树脂与附着的肝素钠分离。

7、沉淀:

①一次洗脱水单独沉淀或一次洗脱水合二次洗脱水合并沉淀;②按酒精与洗脱水的体积比为2~2.5:1加入酒精,然后用塑料棒搅匀直至出现颗粒为止,此时酒精度应为40~45度;③沉淀24小时后取上清即为肝素钠。

8、酶解:将步骤4取得的滤渣与蛋白酶混合,在52~57℃温度条件下进行酶解处理1小时。

其中,滤渣与酶的混合质量比为200︰1。

9、干燥:将步骤8得到的酶解液置于75~80℃温度条件下干燥10~12小时,取得固体,即为肠膜蛋白。



技术特征:

技术总结
一种肠膜蛋白多肽提取工艺,属于生物制药及饲料生产技术领域。将刮制取得的小肠粘膜液以盐解后,采用离心式过滤,分别取得滤出液和滤渣;将滤出液经吸附、洗脱和沉淀取得肝素钠;将滤渣以蛋白酶进行酶解处理后,经干燥取得肠膜蛋白。本发明使盐解肝素液与肠膜蛋白有效分离,由于肝素水分离后较以前澄清,使树脂吸附更为便利,提高了肝素的收率;其次节约了人力,能适应大生产需要。本发明采用改用离心式过滤技术后,肠膜蛋白的含固量可达35%左右,可大大增加生产经济效益,还有利于改善环境。

技术研发人员:冯爱军;刘春捷
受保护的技术使用者:南通仁寿食品有限公司
技术研发日:2016.03.14
技术公布日:2017.09.22
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