本专利涉及的领域有:体外受精技术、显微注射、基因编辑动物的制作培育。
背景技术:
显微注射应用的范围非常广泛,从辅助(体外)细胞受精技术至基因编辑动物模型的制作都需使用这一技术,比较典型的是将某些物质注射进细胞中以操作和/或监测某种特定的物质存活在细胞中的基本生物化学状态。这些可以注射进细胞的物质包括有:各种细胞器、激酶、组织化学标志物、蛋白质、代谢物质、微磁头、离子、抗体、基因、分子生物学的mrna和dna等等。转基因动物的制作,可以利用基因微注射、胚干细胞、精子载体、反转录病毒感染及体细胞核移置等方法,其中显微注射为目前应用最普遍之方法之一。
技术实现要素:
本发明提供了一种促进显微注射后小鼠胚胎体外发育的培养液配方。本发明将左归丸含药血清应用于小鼠胚胎的体外培养,可以促进显微注射后胚胎的修复,提高胚胎质量,促进胚胎发育,解决了显微注射后胚胎发育率低的问题。
具体实施方式
左归丸含药血清的制作:熟地黄、山药、鹿角胶、龟板胶(产地河南),枸杞子(产地宁夏),菟丝子(产地内蒙),川牛膝(产地四川),山茱萸(产地浙江),以上中药均购于同仁堂药店。按左归丸处方量称取熟地黄、山药、枸杞子、山茱萸、川牛膝、菟丝子,加8倍量水煎煮3次,每次1.5h,合并提取液,取龟板胶、鹿角胶加适量水加热溶解,待胶类全部溶解后置于煎煮好的药液中,加热浓缩。
以小鼠常规体外培养液ksom为基质,加入5%的左归丸含药血清,用作胚胎培养基。