本发明涉及生物医药领域,具体涉及一种利用吸附法提取hcg的工艺流程,主要涉及一种利用日本kyowaad700(pl)做吸附剂来提取hcg粗品的工艺流程。
背景技术:
人绒促性素(hcg)是从、人流物或胎盘中提取而得到的一种糖蛋白类激素。广泛用于治疗习惯性流产、不孕症、性功能障碍等症,是国际市场畅销的生化药品。目前,国内仍多用苯甲酸钠、高岭土等吸附法提取hcg,但其活性均低。
技术实现要素:
为了实现一步提取高活性hcg粗品,我们特引用日本新吸附剂,进行高活性hcg粗品的研制。
本发明通过调整工艺路线和引用新型的吸附剂,使得提取出的hcg粗品活性得到大大提高,而且其收率在52%~71%之间,也是其他普通工艺所不能比拟的。
具体实施方式
(1)吸附剂预备处理:将吸附剂用蒸馏水漂洗至上清液澄明,ph值呈中性为止。然后用6mol/l盐酸调ph3.5平衡吸附剂,备用。
(2)碱化、酸化:鲜过滤,用5mol/l氢氧化钠碱化至ph8.5,使其粘多糖、杂蛋白等杂质沉淀,过滤除去沉淀。用蒸馏水洗沉淀3次,合并于碱化过得尿液中,再用6mol/l盐酸酸化至ph4.5。
(3)吸附于洗脱:按1l尿液需加1.0g吸附剂的量,在酸化的尿液中加入预处理过得吸附剂,混合搅拌3h,静置过夜。虹吸上清液,将吸附剂抽滤至干,先用4℃冷蒸馏水将吸附剂洗涤至上清液无色,后用4℃76%乙醇洗涤吸附剂4次,再用4℃醋酸铵溶液按总量的3/6、2/6、1/6对吸附剂进行梯度洗脱。
(4)沉淀与干燥:将3次洗脱液合并一起,调节ph4.8,缓慢加入3倍量预冷丙酮,放置冰箱沉淀过夜。离心收集沉淀,脱水,再真空干燥,得到类白色hcg高活性粗品。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。