本发明一种玉米真菌病害病原菌增殖扩繁培养基的配制方法,属于农业植物保护研究技术领域。
背景技术:
玉米是我国重要的粮食作物与工业原料。但长期以来玉米病害种类繁多,难以消除。其中,真菌类别的病害是玉米最主要的病害,包括大斑病,小斑病,圆斑病,穗腐病,纹枯病,丝黑穗病,瘤黑粉病等等。目前防治玉米真菌病害最有效的途径是选育抗病品种,而玉米材料的抗性鉴定与筛选是抗病育种与农业生产选种的基础。
玉米病害抗性鉴定的实验须在自然条件下、在大面积的大田中实施,因此往往需要大量的病原菌来对玉米植株进行接种。而目前实验室培养真菌的方法要满足实验所用真菌的需求量,大都耗时耗材。
技术实现要素:
本发明克服了现有技术存在的不足,提供了一种操作简单、成本低廉的玉米真菌病害病原菌增殖扩繁培养基的配制方法,实现玉米真菌大规模增殖扩繁。
为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:一种玉米真菌病害病原菌增殖扩繁培养基的配制方法,培养基原料的重量份比为:玉米芯80~90份;麸皮8~18份;碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份;并按下述步骤进行:
第一步:将上述培养基原料兑水搅拌;
第二步:用过磷酸钙和氢氧化钙调节第一步中搅拌后的培养基的ph值,过酸时用氢氧化钙调节,过碱时用过磷酸钙调节,使得调节后的培养基渗出液ph值≥0.5;
第三步:将制备好的培养基装袋、封口、灭菌;其中,灭菌条件为121℃,持续40min。
所述第一步中兑水搅拌后的培养基,含水量为60~65%。
所述培养基原料的重量份比为:玉米芯份,麸皮18份,碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份。
本发明与现有技术相比具有的有益效果是:本发明通过制备培养基来实现,将玉米芯、麸皮作为培养基的碳源和氮源,碳酸钙和磷酸二氢钾补充培养基的钙、磷、钾等元素,同时调节水含量与ph,使其满足真菌生长繁殖的条件,ph高于0.5是为了抵消灭菌后ph降低的值。本发明实现了玉米真菌的大量繁殖,具有易操作,成本低的优点。
具体实施方式
本发明一种玉米真菌病害病原菌增殖扩繁培养基的配制方法,培养基原料的重量份比为:玉米芯80~90份;麸皮8~18份;碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份;并按下述步骤进行:
第一步:将上述培养基原料兑水搅拌;
第二步:用过磷酸钙和氢氧化钙调节第一步中搅拌后的培养基的ph值,过酸时用氢氧化钙调节,过碱时用过磷酸钙调节,使得调节后的培养基渗出液ph值≥0.5;
第三步:将制备好的培养基装袋、封口、灭菌;其中,灭菌条件为121℃,持续40min。
所述第一步中兑水搅拌后的培养基,含水量为60~65%。
所述培养基原料的重量份比为:玉米芯份,麸皮18份,碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份。
下面结合玉米穗腐病菌串珠镰刀菌的培养基配制方法为例进行具体说明。
玉米芯80%,麸皮18%,碳酸钙1.8%;磷酸二氢钾0.2%。
所有原料搅拌均匀后调节含水量达60~65%。
用过磷酸钙和氢氧化钙调节培养基渗出液的ph值为9.5。过酸时用氢氧化钙调节,过碱时用过磷酸钙调节。
将制备好的培养基装袋、封口、灭菌。
培养基灭菌条件为121℃,40min。
本发明中根据不通过的菌种,采用不同的培养基配料比,最常见的几种如下:
优选一,培养基的配料为:
玉米芯80份;麸皮8份;碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份。
优选二,培养基的配料为:
玉米芯90份;麸皮18份;碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份。
优选三,培养基的配料为:
玉米芯85份;麸皮13份;碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份。
优选四,培养基的配料为:
玉米芯83份;麸皮11份;碳酸钙1.8份;磷酸二氢钾0.2份。
上面结合实施例对本发明作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施例,在本领域普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。