一种制备环氧胡萝卜烯醛A和B的方法与流程

本发明属于化学领域，涉及一种制备环氧胡萝卜烯醛a和b的方法。

背景技术：

环氧胡萝卜烯醛a和b是分离自重瓣玫瑰花中分离得到两种化合物，结构式如下：

环氧胡萝卜烯醛a和b是一对同分异构体，区别仅在于环氧所连接的碳原子的构型不同。

研究表明，环氧胡萝卜烯醛a和b具有多种优异的药理活性，具有开发成多种药物的价值。但是，目前尚无高效分离纯化环氧胡萝卜烯醛a和b的方法。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种制备环氧胡萝卜烯醛a和b的方法。

本发明上述目的通过如下技术方案实现：

一种制备环氧胡萝卜烯醛a和b的方法，包括如下步骤：

步骤s1，提取：将阴干的重瓣玫瑰花粉碎，提取，过滤，滤液浓缩至无醇味；

步骤s2，大孔树脂富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于da-201型大孔吸附树脂柱，树脂径高比为1:10，拌样树脂占树脂总量的1/10，湿法装柱，拌树脂上样；先用8bv的30％乙醇以8bv/h的流速洗脱，再用14bv的75％乙醇以8bv/h的流速洗脱，收集13-14bv洗脱液，浓缩至无醇味、冷冻干燥得到富集物冻干粉；

步骤s3，hsccc分离纯化：

s3.1两相溶剂系统配制

两相溶剂系统选择体积比为9:7:9:7的正己烷/乙酸乙酯/95％乙醇/水，将各溶剂按照体积比例加入分液漏斗中，剧烈振摇使充分混合，后静置分层，上、下相分离，超声0.5h待用。

s3.2样品溶液配制

取富集物冻干粉用10ml上相和10ml下相混合溶剂超声溶解配制成浓度为10mg/ml的溶液，即为样品溶液。

s3.3hsccc分离

将配制好的溶剂系统上相泵入hsccc螺旋管中作为固定相，待上相完全充满整个柱子，打开高速逆流色谱仪，设置转速900r/min、体积流量1.3ml/min、检测波长228nm，将溶剂系统下相泵入螺旋管中，待流动相开始从检测器尾端持续流出时，表明螺旋管内两相溶剂达到流体动力学平衡；进样阀注入20ml样品溶液，开始记录色谱图并持续泵入流动相分离。

s3.4根据色谱图分别收集环氧胡萝卜烯醛a、b对应的洗脱流份，浓缩干燥即分别得到环氧胡萝卜烯醛a和环氧胡萝卜烯醛b。

优选地，步骤s1用95％乙醇热回流提取。

优选地，步骤s1提取的固液比为1:20。

优选地，步骤s1提取3次，每次1.5h。

有益效果：

本发明提供的方法可以高效分离纯化制备环氧胡萝卜烯醛a和b。

附图说明

图1为hsccc分离色谱图；

图2为环氧胡萝卜烯醛a纯度检测hplc色谱图；

图3为环氧胡萝卜烯醛b纯度检测hplc色谱图。

具体实施方式

下面结合实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

一、实验材料

重瓣玫瑰花为重瓣玫瑰的花，新鲜采摘后阴干，备用。

da-201大孔树脂购自天津浩聚树脂科技有限公司。

高速逆流色谱仪teb300b购于上海同田生物技术股份有限公司。

二、实验方法和结果

包括如下步骤：

步骤s1，提取：将阴干的重瓣玫瑰花粉碎，用体积分数95％的乙醇水溶液热回流提取，固液比为1:20，提取3次，每次1.5h，过滤，合并滤液浓缩至无醇味；

步骤s2，大孔树脂富集：将浓缩至无醇味的提取液上样于da-201型大孔吸附树脂柱，树脂径高比为1:10，拌样树脂占树脂总量的1/10，湿法装柱，拌树脂上样；先用8bv的30％乙醇以8bv/h的流速洗脱，再用14bv的75％乙醇以8bv/h的流速洗脱，收集13-14bv洗脱液，浓缩至无醇味、冷冻干燥得到富集物冻干粉；

步骤s3，hsccc分离纯化：

s3.1两相溶剂系统配制

两相溶剂系统选择体积比为9:7:9:7的正己烷/乙酸乙酯/95％乙醇/水，将各溶剂按照体积比例加入分液漏斗中，剧烈振摇使充分混合，后静置分层，上、下相分离，超声0.5h待用。

s3.2样品溶液配制

取富集物冻干粉用10ml上相和10ml下相混合溶剂超声溶解配制成浓度为10mg/ml的溶液，即为样品溶液。

s3.3hsccc分离

将配制好的溶剂系统上相泵入hsccc螺旋管中作为固定相，待上相完全充满整个柱子，打开高速逆流色谱仪，设置转速900r/min、体积流量1.3ml/min、检测波长228nm，将溶剂系统下相泵入螺旋管中，待流动相开始从检测器尾端持续流出时，表明螺旋管内两相溶剂达到流体动力学平衡；进样阀注入20ml样品溶液，开始记录色谱图并持续泵入流动相分离。

s3.4根据色谱图(图1)分别收集环氧胡萝卜烯醛a、b对应的洗脱流份，浓缩干燥即分别得到环氧胡萝卜烯醛a和环氧胡萝卜烯醛b，纯度分别为98.5％、98.9％。

hsccc分离制备得到的环氧胡萝卜烯醛a、b与标准品比对具有相同的hplc色谱保留行为，hplc色谱图如图2、3所示。

上述实施例仅用于介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种制备环氧胡萝卜烯醛A和B的方法，包括如下步骤：步骤S1，提取：将阴干的重瓣玫瑰花粉碎，提取，过滤，滤液浓缩至无醇味；步骤S2，大孔树脂富集得到富含环氧胡萝卜烯醛A和B的富集物冻干粉；步骤S3，以体积比为9:7:9:7的正己烷/乙酸乙酯/95％乙醇/水为溶剂体系，HSCCC分离纯化分别得到环氧胡萝卜烯醛A和B，纯度分别为98.5％、98.9％。本发明提供的方法可以高效分离纯化制备环氧胡萝卜烯醛A和B。

技术研发人员：郑嘉荣;吕学金;区伟平
受保护的技术使用者：淮安安莱生物科技有限公司
技术研发日：2018.10.07
技术公布日：2018.12.21