本发明涉及一种促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备技术,属于生物材料制造的技术领域。
背景技术：
细胞粘附是指在细胞识别的基础上，同类细胞发生聚集形成细胞团或组织的过程。细胞是通过蛋白吸附粘附到材料的表面，通过吸附的蛋白质层察觉生物材料的表面性质。细胞粘附性高的生物材料可以促使细胞生长，分化，并在抗凝血方面有较大的应用。生物材料主要从电荷，亲疏水性和负载功能分子等方面影响细胞粘附。
用于细胞培养的生物材料对抗菌和生物相容性方面有较高的要求，同时材料需要拥有较差的使用寿命及稳定性。自修复材料的自我修复功能使得材料在遭受外界破坏的时候，可以自我恢复材料的完整性，延长材料的使用期限及稳定性。
本发明利用双醛淀粉的醛基和壳聚糖的氨基之间形成的动态席夫碱键赋予了薄膜自修复功能，同时壳聚糖上的带正电的氨基和能促进细胞生长的绿藻生长因子可以促进细胞粘附，薄膜由生物相容性较好的双醛淀粉,壳聚糖和绿藻生长因子构建,薄膜的细胞毒性极低,因此通过层层自组装方法制备的薄膜具有自修复性能和促进细胞粘附作用。
技术实现要素：
技术问题：本发明的目的是提供一种促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备方法，该方法简单有效，操作简便，且所需时间较短，无需设备。制备出的促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜可以促进细胞粘附，拥有自修复功能。
技术方案：本发明公开了一种促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备方法，醛基和氨基之间形成的动态席夫碱键赋予了薄膜自修复功能，同时壳聚糖上的带正电的氨基和能促进细胞生长的绿藻生长因子可以促进细胞粘附，薄膜由生物相容性较好的双醛淀粉,壳聚糖和绿藻生长因子构建,薄膜的细胞毒性极低,因此通过层层自组装方法制备的薄膜具有自修复性能和促进细胞粘附作用。
本发明的促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备方法包括如下步骤：
步骤一.首先将双醛淀粉溶液滴入培养板中,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗多次,
步骤二.再将壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液滴入培养板中,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗多次,得到单层所述促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜；
步骤三.反复多次重复步骤一和步骤二组装双醛淀粉,壳聚糖和绿藻生长因子，利用层层自组装法逐层将双醛淀粉溶液、壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液沉积到培养板中，得到多层所述促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜。
其中将双醛淀粉溶液、壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液滴入培养板中的浸泡时间为2～5min。
所述双醛淀粉溶液的浓度为：3mg/ml-20mg/ml。
所述壳聚糖与绿藻生长因子的重量比为：10:1-2:1。
有益效果：本发明利用双醛淀粉溶液和壳聚糖，绿藻生长因子混合溶液通过层层自组装法制备的促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜，具有以下优点：
1.方法简单有效，操作简便，且所需时间较短，无需设备。
2.选用的材料都是生物相容性较好的材料，制备出的促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜具有较低的细胞毒性。
3.制备出的促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜可以促进细胞粘附，拥有自修复功能。
具体实施方式
下面对本发明做更进一步地解释。下列实施例仅用于说明本发明，但并不用来限定本发明的实施范围。
本发明的一种促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜的制备，包括如下步骤：
步骤一.首先将双醛淀粉溶液滴入培养板中,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗多次,
步骤二.再将壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液滴入培养板中,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗多次,得到单层所述促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜；
步骤三.反复多次重复步骤一和步骤二组装双醛淀粉,壳聚糖和绿藻生长因子，利用层层自组装法逐层将双醛淀粉溶液、壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液沉积到培养板中，得到多层所述促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜。
将双醛淀粉溶液、壳聚糖和绿藻生长因子混合溶液滴入培养板中的浸泡时间为2～5min。
实施例1：
将7.25mg/ml的双醛淀粉溶液滴入培养板中2分钟,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗3次,再将混合的10mg/ml的壳聚糖溶液和3mg/ml的绿藻生长因子溶液滴入培养板中2分钟,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗3次，重复上述过程2次得到促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜。
实施例2：
将14mg/ml的双醛淀粉溶液滴入培养板中3分钟,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗5次,再将混合的10mg/ml的壳聚糖溶液和5mg/ml的绿藻生长因子溶液滴入培养板中3分钟,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗5次，重复上述过程4次得到促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜。
实施例3：
将3.6mg/ml的双醛淀粉溶液滴入培养板中5分钟,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗2次,再将混合的9mg/ml的壳聚糖溶液和3mg/ml的绿藻生长因子溶液滴入培养板中5分钟,将溶液全部吸出,使用超纯水清洗2次，重复上述过程4次得到促进珊瑚细胞粘附的自修复薄膜。