一种用于鉴定三平正并殖吸虫囊蚴的试剂盒及使用方法与流程

文档序号:22615187发布日期:2020-10-23 19:14阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于鉴定三平正并殖吸虫囊蚴的试剂盒,其特征在于:

含有扩增三平正并殖吸虫囊蚴dna的上游引物,其基因序列如seqidno.1所示;

含有扩增三平正并殖吸虫囊蚴dna的下游引物,其基因序列如seqidno.2所示;

含有鉴定三平正并殖吸虫囊蚴dna的探针,其基因序列如seqidno.3所示,在所述的探针的5’端标记荧光基团cy、在3’端标记荧光淬灭基团bhq2。

2.根据权利要求1所述的一种用于鉴别三平正并殖吸虫囊蚴的试剂盒,其特征在于:还含有和三平正并殖吸虫的线粒体cox1基因对应一致的一个标准阳性对照质粒dna模板,以及进行实时定量pcr检测所需要的试剂,所述的三平正并殖吸虫的线粒体cox1基因的序列如seqidno.4所示。

3.权利要求1或2所述的一种用于鉴别三平正并殖吸虫囊蚴的试剂盒使用方法,其特征在于:以待测分离的囊蚴基因组dna为模板,将其与dna聚合酶、缓冲液、灭菌超纯水以及试剂盒中的检测引物和特异性探针按比例混合均匀后,进行实时定量pcr检测,根据反应曲线的ct值确定囊蚴的种类,从而判定溪蟹感染的是否为三平正并殖吸虫囊蚴。


技术总结
本发明提供了一种用于鉴定三平正并殖吸虫囊蚴的试剂盒,含有扩增三平正并殖吸虫囊蚴DNA的上游引物,其基因序列如SEQ ID NO.1所示,含有扩增三平正并殖吸虫囊蚴DNA的下游引物,其基因序列如SEQ ID NO.2所示,含有鉴定三平正并殖吸虫囊蚴DNA的探针,其基因序列如SEQ ID NO.3所示,在探针的5’端标记荧光基团CY、在3’端标记荧光淬灭基团BHQ2。本发明还提供了上述试剂盒的使用方法。本发明的方法具有很好的特异性;重复性实验表明,本发明提供的检测体系具有很好的稳定性,其检测结果变异较小,控制在统计学范围之内。

技术研发人员:郑彬;陈韶红;卢艳;蔡玉春;艾琳;宋鹏;陈家旭;周晓农
受保护的技术使用者:中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)
技术研发日:2020.08.06
技术公布日:2020.10.23
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