一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法
1.技术邻域
2.本发明涉及生物组织脱水技术领域，特别涉及一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法。
背景技术：
3.微藻的营养丰富，在人们的生活和生产实践中具有很广援的应用，在微藻的培养和应用中，保种技术十分重要，大规模微藻产业仅仅靠培养微藻是不够的，必须将藻种保存起来备用，才能满足需要，但微藻个体小，难分离，容易在保种过程中出现藻种单细胞纯种随环境变化发生变异，丧失自身的生理活性和遗传特性，所以藻种保存就显得尤为重要困，目前藻种保种方法常采用继代保种方法，操作重复且繁琐，不断传代过程藻种易污染，保种时间较短。
技术实现要素：
4.针对现有技术中的缺陷，本发明的目的在于克服上述现有技术中的不足之处，提供一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，制备方法简单，操作简单，不易污染，保种时间较长。
5.本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，所述制备方法包括以下步骤：
6.(a1)称量配液：定量称量甲醛、脱水剂、微藻液，将甲醛和脱水剂分别加入蒸馏水，配成凝胶耦合溶液；
7.(a2)包埋：将甲醛凝胶耦合溶液消毒，甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按一定比例充分混匀，用注射器以5ml/min的速率滴入3％的氯化钙溶液中，边滴边摇动，一定时间后形成固化的微藻胶珠，得到固定藻细胞；
8.(a3)脱水保存：取上述胶球称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按含水量减少1％/h的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存。
9.本发明挑选出甲醛，天平定量称取甲醛、脱水剂、微藻液，然后将甲醛和脱水剂分别加入蒸馏水，配成一定浓度的凝胶耦合溶液，将甲醛凝胶耦合溶液煮沸消毒备用，然后再甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按一定比例充分混匀，用注射器均匀的速率滴入氯化钙溶液中，边滴边摇动，使游离的微藻细胞包埋在多糖或多聚化合物制成的网状支持物中，一定时间后形成固化的微藻胶珠，形成的微藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤数次，得到固定藻细胞，取上述胶球称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按每小时含水量减少0.9％的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存；与现有技术相比，本发明的有益效果在于：该方法制备方法简单，操作简单，不易污染，保种时间较长。
10.作为本发明的进一步改进，所述甲醛包括醋酸铀、丙烯醛、丹宁酸、重铬酸钾、明胶、甲醛醋酸酒精液的一种。
11.作为本发明的进一步改进，所述甲醛浓度为2％～7％。
12.作为本发明的进一步改进，所述甲醛与微藻液混合比例为21:1.5～5:1.5。
具体实施方式
13.实施例1
14.一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，为制备微藻保种，其按如下步骤进行：
15.(a1)称量配液：挑选出甲醛褐藻酸钠，天平定量称取甲醛褐藻酸钠2.5g、脱水剂2g、量筒量取微藻液25ml，蒸馏水100ml，然后将褐藻酸钠和脱水剂分别加入到100ml蒸馏水中，玻璃棒搅拌配成浓度为2.5％(w/v)的凝胶耦合溶液；
16.(a2)固定：将褐藻酸钠凝胶耦合溶液煮沸消毒备用，然后再甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按4:1的比例进行接种，充分混匀后制成胶-藻混悬液，用9号针头的注射器以5ml/min的速率滴入3％的氯化钙溶液中，边滴边摇动，约30min后形成固化的褐藻酸钙胶珠，从而使藻细胞得以固定，得到固定藻细胞；
17.(a3)脱水保存：取上述胶球30个称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按每小时含水量减少0.9％的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存。
18.实施例2
19.一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，为制备微藻保种，其按如下步骤进行：
20.(a1)称量配液：挑选出甲醛丙烯醛，天平定量称取甲醛丙烯醛5g、脱水剂2g、量筒量取微藻液100ml，蒸馏水100ml，然后将丙烯醛和脱水剂分别加入到100ml蒸馏水中，玻璃棒搅拌配成浓度为5％(w/v)的凝胶耦合溶液；
21.(a2)固定：将丙烯醛凝胶耦合溶液煮沸消毒备用，然后再甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按4:1的比例进行接种，充分混匀后制成胶-藻混悬液，用9号针头的注射器以5ml/min的速率滴入3％的氯化钙溶液中，边滴边摇动，约30min后形成固化的丙烯醛胶珠，从而使藻细胞得以固定，得到固定藻细胞；
22.(a3)脱水保存：取上述胶球40个称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按每小时含水量减少0.9％的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存。
23.实施例3
24.一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，为制备微藻保种，其按如下步骤进行：
25.(a1)称量配液：挑选出甲醛丹宁酸，天平定量称取甲醛丹宁酸1g、脱水剂2g、量筒量取微藻液50ml，蒸馏水100ml，然后将丹宁酸和脱水剂分别加入到100ml蒸馏水中，玻璃棒搅拌配成浓度为5％(w/v)的凝胶耦合溶液；
26.(a2)固定：将丹宁酸凝胶耦合溶液煮沸消毒备用，然后再甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按4:1的比例进行接种，充分混匀后制成胶-藻混悬液，用9号针头的注射器以5ml/min的速率滴入3％的氯化钙溶液中，边滴边摇动，约30min后形成固化的丹宁酸胶珠，从而使藻细胞得以固定，得到固定藻细胞；
27.(a3)脱水保存：取上述胶球50个称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按每小时含水量减少0.9％的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存。
28.本发明并不局限于上述实施例，在本发明公开的技术方案的基础上，本邻域的技术人员根据所公开的技术内容，不需要创造性的劳动就可以对其中的一些技术特征作出一些替换和变形，这些替换和变形均在本发明保护范围内。
技术特征：
1.一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，其特征在于，制备方法包括以下步骤：(a1)称量配液：定量称量甲醛、脱水剂、微藻液，将甲醛和脱水剂分别加入蒸馏水，配成凝胶耦合溶液；(a2)包埋：将甲醛凝胶耦合溶液消毒，甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按一定比例充分混匀，用注射器以5ml/min的速率滴入3％的氯化钙溶液中，边滴边摇动，一定时间后形成固化的微藻胶珠，得到固定藻细胞；(a3)脱水保存：取上述胶球称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按含水量减少1％/h的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存。2.根据权利要求1所述的一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，其特征在于步骤(a1)中，甲醛包括醋酸铀、丙烯醛、丹宁酸、重铬酸钾、明胶、甲醛醋酸酒精液的一种。3.根据权利要求1所述的一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，其特征在于步骤(a2)中，甲醛浓度为2％～7％。4.根据权利要求1所述的一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，其特征在于步骤(a2)中，甲醛与微藻液混合比例为21:1.5～5:1.5。
技术总结
本发明提供了一种基于生物组织脱水机的微藻包埋保种方法，其先定量称取甲醛、脱水剂、微藻液，然后将甲醛和脱水剂分别加入蒸馏水，配成一定浓度的凝胶耦合溶液，将甲醛凝胶耦合溶液煮沸消毒，再将甲醛凝胶耦合溶液与微藻液按一定比例充分混匀，注射器均匀的速率滴入氯化钙溶液中，边滴边摇动，一定时间后形成固化的微藻胶珠，形成的微藻酸钙胶珠用消毒蒸馏水洗涤数次，得到固定藻细胞，最后取上述胶球称鲜重后，在22℃暗室内用生物组织脱水机按每小时含水量减少0.9％的平均脱水速率脱水至指定含水量，液氮保存；本发明的备方法简单，操作简单，不易污染，保种时间较长。保种时间较长。
技术研发人员：王洋
受保护的技术使用者：湖北欣立达科技有限公司
技术研发日：2020.11.24
技术公布日：2022/5/31