一种GLP-1类似物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及多肽，具体的说是涉及一种glp-1类似物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、2型糖尿病是体内胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗导致的慢性代谢性疾病，目前全球糖尿病病人预计为4亿。glp-1受体激动剂近年来越来越多的用于降低血糖，其进入血液与glp-1受体结合，通过促进胰岛的胰岛素合成及分泌、抑制胰高血糖素分泌，增强外周组织对葡萄糖的利用，减少肝糖输出从而降低血糖。

2、人胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide1,glp-1)是回肠及结肠的l细胞产生的肠促胰岛素，glp-1(1-37)的活性极低，去除n端6肽后形成具有生物活性的glp-1(7-37)，人glp-1(7-37)序列为：

3、

4、但是，人glp-1(7-37)被分泌到血液中由于极容易被ddp-ⅳ降解并被肾小球过滤清除，半衰期仅为3～5分钟。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种glp-1类似物及其制备方法，一种glp-1类似物，其为i)～iii)中至少一种：

2、i)、具有seq id no.1所示的氨基酸序列，且seq id no.1所示序列的第10位半胱氨酸和第27位半胱氨酸形成分子内二硫键的多肽；或

3、ii)、在i)所述的多肽中经取代、缺失或添加一个或多个氨基酸获得的功能与i)相同或相似的多肽；或

4、iii)、与i)所示的氨基酸序列至少有90％同源性且功能与i)相同或相似的多肽。

5、作为优选，所述glp-1类似物具有seq id no.1所示的氨基酸序列，且第10位半胱氨酸和第27位半胱氨酸形成分子内二硫键。

6、seq id no.1：

7、haegtftsdcssylegqxaakefiawclvaxxpkg。

8、其中，第18位x＝his或gln；第31位x＝leu或tyr；第32位x＝val或met。

9、一些具体实施例中，所述glp-1类似物的氨基酸序列为seq id no.2或seq idno.3任意一项所示氨基酸序列，且seq id no.2或seq id no.3任意一项所示序列的第10位半胱氨酸和第27位半胱氨酸形成分子内二硫键。

10、seq id no.2：

11、haegtftsdcssylegqhaakefiawclvalmpkg。

12、seq id no.3：

13、haegtftsdcssylegqqaakefiawclvayvpkg。

14、实验表明，本发明提供的glp-1类似物经过优化，相比现有的产品具有更优异的控制血糖能力，效果更持久。

15、同时，本发明还提供了所述glp-1类似物的制备方法，按照所述glp-1类似物的氨基酸序列采用液相合成、固相合成或固液联合合成工艺，合成线性多肽，然后氧化形成二硫键，获得所述glp-1类似物。

16、在本发明具体实施方式中，本发明以固相合成工艺合成所述glp-1类似物，纯化线性多肽的方法采用hplc法，所述氧化形成二硫键采用碳酸氢铵或dmso氧化形成二硫键。

17、降糖实验结果表明，本发明所述glp-1类似物对降糖持久有效；基于此优异的技术效果，本发明提出了所述glp-1类似物在制备治疗或预防糖尿病药物中的应用。

18、本发明还提供了一种预防或治疗糖尿病的药物，其以本发明所述glp-1类似物为活性成分，作为进一步地优选方案其还可以包括药学上可接受的辅料和/或用于治疗其他疾病且不影响所述glp-1类似物活性的药物成分。

19、本发明所述药物可以制备成临床上任何形式的剂型，主要包括口服剂型或注射剂型，其中注射剂型包括输液形式的药物剂型，这些剂型中包括但不限于片剂、颗粒剂、丸剂、口服液、冻干粉、注射液、胶囊剂、微囊剂。

20、由以上技术方案可知，本发明在人glp-1基础上进行氨基酸序列的优化，并形成分子内二硫键，从序列和空间构型两方面和人glp-1形成差异，制备出一种glp-1类似物，表现出高效持久的降糖作用，可广泛用于糖尿病药物的开发中。

技术特征：

1.一种glp-1类似物，其特征在于，其为i)～iii)中至少一种：

2.根据权利要求1所述glp-1类似物，其特征在于，其氨基酸序列为seq id no.2或seqid no.3任意一项所示氨基酸序列，且seq id no.2或seq id no.3任意一项所示序列的第10位半胱氨酸和第27位半胱氨酸形成分子内二硫键。

3.权利要求1或2所述glp-1类似物的制备方法，其特征在于，按照所述glp-1类似物的氨基酸序列采用液相合成、固相合成或固液联合合成工艺，合成线性多肽，然后氧化形成二硫键，获得所述glp-1类似物。

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于，所述氧化形成二硫键采用碳酸氢铵或dmso氧化形成二硫键。

5.glp-1类似物，其特征在于，采用权利要求3或4所述的制备方法制备得到。

6.权利要求1或2所述glp-1类似物在制备治疗或预防糖尿病药物中的应用。

7.一种预防或治疗糖尿病的药物，其特征在于，以权利要求1或2所述glp-1类似物为活性成分。

8.根据权利要求7所述药物，其特征在于，还包括药学上可接受的辅料和/或用于治疗其他疾病且不影响所述glp-1类似物活性的药物成分。

9.根据权利要求7或8所述药物，其特征在于，所述药物为口服剂型或注射剂型。

10.根据权利要求9所述药物，其特征在于，所述口服剂型包括片剂、颗粒剂、丸剂、口服液、冻干粉、胶囊剂和微囊剂。

技术总结
本发明涉及多肽技术领域，公开了一种GLP‑1类似物及其制备方法和应用。本发明所述GLP‑1类似物具有SEQ ID NO.1所示氨基酸序列，且SEQ ID NO.1所示序列的第10位半胱氨酸和第27位半胱氨酸形成分子内二硫键。实验表明，该GLP‑1类似物表现出高效持久的降糖作用，可广泛用于糖尿病药物的开发中。

技术研发人员：黄星,张祖盛,刘续征,梁晓晖
受保护的技术使用者：合肥天汇生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13