本发明涉及环境微生物,特别涉及一种海洋芽孢杆菌n2及其应用。
背景技术:
1、黄曲霉毒素(aft)是一组次级代谢产物,主要由寄生曲霉、黄曲霉、黑曲霉等真菌产生,在玉米和花生等粮食作物、奶制品、以及食用油中广泛存在。在aft众多结构中,黄曲霉毒素b1(afb1)的毒性最大,其毒性是砒霜的60多倍,被世界卫生组织(who)癌症研究机构划定为一类天然致癌物。因此,解决粮食及饲料中黄曲霉毒素的污染问题对提高食品安全和保障动物健康具有十分重要的意义。
2、目前,黄曲霉毒素的主要脱毒方法包括物理脱毒法、化学脱毒法、微生物降解法。其中,物理脱毒法包括吸附剂、γ射线、紫外光、高温、电离辐射等方式,化学脱毒法包括强碱、强酸、氧化法,但物理和化学的脱毒方法存在成本高、去毒效果不稳定、产品营养成分损失大及适口性降低等缺点,限制了其实际应用的价值。因此,如何经济、高效地去除粮食及饲料中的黄曲霉毒素b1已成为食品领域的研究热点。
技术实现思路
1、本发明的主要目的是提出一种海洋芽孢杆菌n2及其应用,旨在提供一种对黄曲霉毒素b1降解效果好的菌株。
2、为实现上述目的,本发明提出一种海洋芽孢杆菌(bacillus marinus)n2,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为cctcc no:m 20211130。
3、进一步地,本发明还提出一种如上所述的海洋芽孢杆菌n2的筛选方法,所述筛选方法包括以下步骤:
4、s10、将土壤和畜禽粪便样品与生理盐水混匀,在恒温摇床中培养60~75h,取出后用灭菌水稀释,得到菌液;
5、s20、取所述菌液均匀涂布至含有香豆素的初筛固体培养基上,待长出菌落后,将单菌落接种到所述含有香豆素的初筛固体培养基进行平板划线并培养,得到纯化菌株,将所述纯化菌株接种于lb液体培养基中培养20~28h,得到初筛菌株;
6、s30、将所述初筛菌株接种于所述lb液体培养基并培养,然后接种于发酵培养基中并培养,向培养得到的发酵液中加入黄曲霉毒素b1,继续培养40~50h,使用μplc-ms/ms检测所述发酵液中黄曲霉毒素b1的含量,筛选出含量最低的菌株n2,即为海洋芽孢杆菌n2。
7、本发明还提出一种微生物菌剂,所述微生物菌剂包含如上所述的海洋芽孢杆菌n2。
8、本发明还提出一种黄曲霉毒素b1脱毒工程菌,所述脱毒工程菌由如上所述的海洋芽孢杆菌n2构建得到的。
9、此外,本发明还提出一种降解黄曲霉毒素b1的方法,所述方法包括:使用如上所述的海洋芽孢杆菌n2处理黄曲霉毒素b1污染的农产品。
10、本发明提供的海洋芽孢杆菌n2,是用香豆素作为唯一碳源筛选得到的,实验过程无毒无污染,成本较低,筛选得到的所述海洋芽孢杆菌n2对黄曲霉毒素b1的降解效果好,同时环境适应力强,因此,该菌株是理想的农产品脱毒微生物,在饲料加工或食品加工领域中具有很好的应用前景。
1.一种海洋芽孢杆菌(bacillus marinus)n2,其特征在于,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为cctcc no:m 20211130。
2.一种微生物菌剂,其特征在于,包含如权利要求1所述的海洋芽孢杆菌n2。
3.一种黄曲霉毒素b1脱毒工程菌,其特征在于,由权利要求1所述的海洋芽孢杆菌n2构建得到的。
4.一种降解黄曲霉毒素b1的方法,其特征在于,使用如权利要求1所述的海洋芽孢杆菌n2处理黄曲霉毒素b1污染的农产品。