一种核酸释放试剂及核酸提取方法和提取试剂盒与流程

本发明属于核酸提取，具体涉及一种核酸释放试剂及核酸 提取方法和提取试剂盒。

背景技术：

1、核酸分子检测在病原微生物的检测方面发挥了重大优势，应用较广。而 核酸提取是核酸检测中必不可少的环节。目前常用的核酸提取方法主要有3 种：(1)高温煮沸法：通过高温使细胞裂解，释放出核酸；(2)离心柱法： 裂解液与样本混合，释放出核酸，通过柱层析法吸附核酸，再用洗脱液洗脱 得到纯化的核酸；(3)磁珠法：裂解液裂解细胞，磁珠吸附核酸，再通过洗 脱液洗脱得到纯化好的核酸。

2、高温煮沸法的缺点是高温处理在一定程度上会破坏核酸，且容易产生气 溶胶，造成环境污染。离心柱法的提取效果好，但操作繁琐，步骤较多，容 易造成核酸损失。磁珠法的提取步骤相对简单，提取的核酸纯度高，易发展 成自动化，但产品的价格相对昂贵。

技术实现思路

1、本发明的目的是，提供种一种核酸释放试剂及核酸提取方法和提取 试剂盒。主要解决现有技术中核酸提取方法存在的成本高、操作繁琐、破坏 核酸等缺点和不足。

2、本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案如下：

3、一种核酸释放试剂，包括：100～500mm的尿素，体积百分比为0.1～3％ 的tergitol，10～100mm的naoh，5～100mm的tris-hcl，体积百分比为 0.05～1％的消泡剂组成，溶剂为水。所述tergitol为壬基酚聚氧乙烯醚。

4、作为优选实施方案，所述释放试剂包括：200～300mm尿素，体积百分比 为1.5-2.5％的tergitol，30-50mmnaoh，10-30mm tris-hcl，体积百分比 为0.2-0.4％的消泡剂组成，溶剂为水

5、作为优选实施方案，所述释放试剂包括：250mm尿素，体积百分比为2％ 的tergitol，40mm naoh，20mm tris-hcl，体积百分比为0.3％的消泡剂 组成，溶剂为水。

6、本发明还提供所述的核酸释放试剂提取核酸的方法，该方法为：将待提 取样本与所述核酸释放试剂充分混合、放置，即得到目的核酸。

7、作为优选实施方案，所述样本为采样拭子。

8、作为优选实施方案，所述采样拭子为咽拭子或鼻咽拭子。

9、作为优选实施方案，所述核酸为rna。

10、本发明还提供一种核酸提取试剂盒，所述提取试剂盒包含所述的核酸释 放剂。

11、与现有技术相比，本发明的有益效果如下：

12、1，本发明对多种不同的核酸释放剂进行了平行试验对比，发现本发 明的释放剂对于pcr扩增效果具有明显的优势。

13、2，采用本发明提供的核酸释放试剂，只需将采样拭子放入装有核酸 释放试剂的采样管中即可释放出核酸，操作简便，无需单独提取样本的 核酸，在很大程度上简化了实验操作步骤，减少核酸损耗，从而提高检 测的灵敏度。

14、3，本发明提供的核酸释放试剂可以对咽拭子、鼻咽拭子等未知样本 中的核酸进行快速、准确的测定，且试剂用量少，成本低，使用安全。

技术特征：

1.一种核酸释放试剂，包括：100～500mm的尿素，体积百分比为0.1～3％的tergitol，10～100mm的naoh，5～100mm的tris-hcl，体积百分比为0.05～1％的消泡剂组成，溶剂为水。

2.如权利要求1所述的核酸释放试剂，其特征在于，所述释放试剂包括：200～300mm尿素，体积百分比为1.5-2.5％的tergitol，30-50mm naoh，10-30mm tris-hcl，体积百分比为0.2-0.4％的消泡剂组成，溶剂为水。

3.如权利要求1所述的核酸释放试剂，其特征在于，所述释放试剂包括：250mm尿素，体积百分比为2％的tergitol，40mm naoh，20mm tris-hcl，体积百分比为0.3％的消泡剂组成，溶剂为水。

4.权利要求1-3任一项所述的核酸释放试剂提取核酸的方法，该方法为：将待提取样本与所述核酸释放试剂充分混合、放置，即得到目的核酸。

5.如权利要求4所述的核酸释放试剂提取核酸的方法，其特征在于：所述样本为采样拭子。

6.如权利要求5所述的核酸释放试剂提取核酸的方法，其特征在于：所述采样拭子为咽拭子或鼻咽拭子。

7.如权利要求4所述的核酸释放试剂提取核酸的方法，其特征在于：所述核酸为rna。

8.一种核酸提取试剂盒，其特征在于：所述提取试剂盒包含权利要求1-3任一项所述的核酸释放剂。

技术总结
本发明公开了一种核酸释放试剂及核酸提取方法和提取试剂盒。所述核酸释放试剂包括：100～500mM的尿素，体积百分比为0.1～3％的TERGITOL，10～100mM的NaOH，5～100mM的Tris‑HCl，体积百分比为0.05～1％的消泡剂组成，溶剂为水。本发明对多种不同的核酸释放剂进行了平行试验对比，发现本发明的释放剂对于PCR扩增效果具有明显的优势。采用本发明提供的核酸释放试剂，只需将采样拭子放入装有核酸释放试剂的采样管中即可释放出核酸，操作简便，无需单独提取样本的核酸，在很大程度上简化了实验操作步骤，减少核酸损耗，从而提高检测的灵敏度。

技术研发人员：王丽娟,高鹏飞,巫益鸣
受保护的技术使用者：上海思路迪生物医学科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13