结合MAIT和肿瘤细胞两者的多特异性抗体的制作方法

背景技术：

技术实现思路

1、本发明提供了一种t细胞重定向方法，该方法靶向具有不变/半不变t细胞受体(tcr)的免疫细胞，例如粘膜相关不变t(mait)细胞，并重定向这些特异性t细胞以杀死肿瘤细胞。

2、更具体地，本发明提供能够同时结合mait细胞和肿瘤细胞的多特异性分子，该多特异性分子包含至少一个抗vα7.2域，即特异性结合vα7.2tcr的域，和至少一个抗肿瘤相关抗原域(taa)，即特异性结合taa的域。

3、根据本发明，t细胞受体依靠通过此类多特异性分子的交联活化mait细胞以杀死肿瘤细胞。参见图1。

4、此种方法具有以下优点：a)仅活化针对靶细胞的细胞毒性细胞，b)不活化cd4+t细胞，因此细胞因子风暴和自身反应性的风险较小，以及c)不将treg重定向到肿瘤部位。此外，由于mait细胞在人外周组织中，特别是在肝脏和粘膜组织(如肺和肠道)中是丰富的，因此有利于向实体瘤迁移。

5、分子优选是多特异性、优选双特异性的抗体或其抗原结合片段。

技术特征：

1.能够同时结合粘膜相关不变t(mait)细胞和肿瘤细胞的多特异性分子，所述多特异性分子包含至少一个特异性结合vα7.2t细胞受体(tcr)的域和至少一个特异性结合肿瘤相关抗原(taa)的域。

2.权利要求1的多特异性分子，其是多特异性的，优选双特异性的抗体或其抗原结合片段。

3.权利要求1或2的多特异性分子，其包含至少一个多特异性抗原结合片段，所述多特异性抗原结合片段包含至少两个具有不同ch1和cl域的fab片段，其中所述fab片段以任何顺序串联排列，第一fab片段的ch1域的c端末端通过多肽接头连接到后面的fab片段的vh域的n端末端，其中至少一个fab片段结合vα7.2，并且至少另一个fab片段结合taa。

4.权利要求3的多特异性分子，其由如权利要求3中所定义的多特异性抗原结合片段组成。

5.权利要求3的多特异性分子，其包含两个相同的抗原结合臂，每个臂由如权利要求3中所定义的多特异性抗原结合片段组成，优选地其中所述多特异性分子具有免疫球蛋白样结构，其包含：

6.权利要求1至5中任一项的多特异性分子，其中所述结合vα7.2tcr的域结合vα7.2-jα33、vα7.2-jα20或vα7.2-jα12。

7.权利要求6的多特异性分子，其能够与单克隆抗体3c10竞争或结合vα7.2-jα33多肽的相同或基本相同的表位。

8.权利要求6或7的多特异性分子，其中所述抗vα7.2域的重可变链包含以下cdr：gfnikdth(seq id no:4)；tdpasgdt(seq id no:5)和cahyyrddvnyamdy(seq id no:6)；

9.权利要求1至8中任一项的多特异性分子，其中所述taa是在血液恶性肿瘤或实体肿瘤细胞上表达的肿瘤细胞表面抗原。

10.权利要求9的多特异性分子，其中所述taa选自下组：cd19,cd20,cd38,egfr,her2,vegf,cd52,cd33,rank-l,gd2,cd33,cea家族(包括ceacam抗原，例如ceacam1,ceacam5；或psg抗原),muc1,psca,psma,gpa33,ca9,prame,cldn1,her3,磷脂酰肌醇聚糖-3,cd22,cd25,cd40,cd30,cd79b,cd138(粘结蛋白聚糖-1),bcma,slamf7(cs1,cd319),cd56,ccr4,epcam,pdgfr-α,apo2l/trail和pd-l1。

11.权利要求10的多特异性分子，其中所述taa是cd19。

12.权利要求10的多特异性分子，其中所述taa是egfr。

13.权利要求10的多特异性分子，其中所述taa是her2。

14.多肽，其包含如权利要求2至13中任一项所定义的抗原结合片段的重链或多特异性抗体的重链，优选地由如权利要求2至13中任一项所定义的抗原结合片段的重链或多特异性抗体的重链组成。

15.多核苷酸，其包含编码权利要求14的多肽的序列。

16.用包含权利要求15的多核苷酸的表达载体转染的宿主细胞，优选地其中所述宿主细胞进一步用编码以下两条不同轻链的至少两种多核苷酸转化：与所述重链的第一vh/ch1区特异性配对的第一轻链；与所述重链的第二vh/ch1区特异性配对的第二轻链。

17.用于产生如权利要求2至13中任一项定义的抗原结合片段或多特异性抗体的方法，所述方法包括以下步骤：a)在合适的培养基和培养条件中培养表达如权利要求2至13中任一项所定义的抗体重链和如权利要求2至13中任一项权利要求所定义的抗体轻链的宿主细胞；并且b)从所述培养基或从所述培养的细胞中回收所述产生的抗体。

18.如权利要求1至13中任一项所定义的多特异性分子，用于治疗患者中的肿瘤。

19.用于权利要求18的用途的多特异性分子，其中所述肿瘤是实体瘤。

技术总结
本发明提供了能够同时结合粘膜相关不变T(MAIT)细胞和肿瘤细胞的多特异性分子，该多特异性分子包含至少一个特异性结合Vα7.2T细胞受体(TCR)的域和至少一个特异性结合肿瘤相关抗原(TAA)的域。

技术研发人员：O.兰茨,S.阿米戈莱纳,M.塞塔基斯,M.圭洛特-德洛斯特,E.朱科夫斯基,P-E.杰拉德,M.法鲁迪
受保护的技术使用者：拜奥穆尼克斯制药
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13