活细胞分离系统的制作方法

本发明涉及用于从来自生物体的组织中分离活细胞的系统。

背景技术：

1、近年来，为了修复损伤的组织等，进行了移植各种细胞的尝试。例如，为了修复因心绞痛、心肌梗塞等缺血性心脏病而损伤的心肌组织，尝试了利用胎儿心肌细胞、骨骼肌成肌细胞、间充质干细胞、心脏干细胞、es细胞、ips细胞等(非专利文献1)。

2、作为这样的尝试的一环，开发了：利用支架而形成的细胞结构物；将细胞形成为片状而得的片状细胞培养物(非专利文献2)。

3、关于片状细胞培养物在治疗中的应用，进行了下述研究：培养表皮片在由烧伤等引起的皮肤损伤中的利用、角膜上皮片状细胞培养物在角膜损伤中的利用、口腔黏膜片状细胞培养物在食道癌的内镜下的切除中的利用等，其中一部分已进入临床应用的阶段。

4、这样的治疗中使用的骨骼肌成肌细胞通常从要移植的对象的骨骼肌组织中分离骨骼肌成肌细胞等cd56阳性细胞而得到，作为使得从骨骼肌组织分离的细胞中包含的cd56阳性细胞的比例提高的策略，例如，已知下述方法等：将骨骼肌组织在蛋白质降解酶溶液中浸渍规定的时间来进行酶处理，将得到的酶处理液废弃后，再次在蛋白质降解酶溶液中浸渍规定的时间来进行酶处理，将得到的酶处理液中包含的细胞回收(专利文献1)。

5、现有技术文献

6、专利文献

7、专利文献1：日本特开2007-89442号公报

8、非专利文献1：haraguchi等人,stemcells transl med.2012feb；1(2):136-41

9、非专利文献2：sawa等人,surg today.2012jan；42(2):181-4

技术实现思路

1、发明所要解决的课题

2、如此，为了从来自生物体的组织中分离活细胞，设计了各种分离方法、分离条件。然而，构成各种生物体组织的细胞多种多样，其中干细胞、前体细胞在生物体组织中所占的比例低，很多存在于特殊的生态位(niche)中。例如，骨骼肌组织由肌纤维构成，肌纤维实质上是被质膜包围的多核细胞，但作为其前体细胞的骨骼肌成肌细胞等cd56阳性细胞仅局部存在于肌纤维的基底膜与质膜之间，因此为了从作为对象的骨骼肌组织中分离这些cd56阳性细胞，需要使肌纤维的基底膜的结合松弛，同时以不破坏cd56阳性细胞的程度将骨骼肌组织破碎。

3、迄今为止，cd56阳性细胞从骨骼肌组织的分离主要通过手工操作进行细切处理和酶解处理。通过细切处理来破坏肌纤维的操作复杂且需要较长时间，另外，由于辨别也依赖于操作者的直觉，因此操作者之间的回收活细胞数存在偏差。如此，尚未发现从各种来自生物体的组织中简便且稳定地分离各种活细胞的方法。

4、用于解决课题的手段

5、本申请的发明人为了解决上述的问题而进行了深入研究，结果发现，通过在细切处理中，取得关于来自生物体的组织的信息，并适当算出杂质相对于来自生物体的组织而言的比例，从而能够从来自生物体的组织中稳定地分离活细胞。然后，基于这样的见解进一步反复进行研究，结果发现，能够机械地算出杂质相对于来自生物体的组织而言的比例，能够使全部操作或其一部分自动化，从而完成了本发明。

6、即，本发明涉及以下的内容。

7、[1]用于从来自生物体的组织中分离活细胞，其具备：

8、细切部，其基于参数对来自生物体的组织进行细切；

9、测定部，其取得与被细切的来自生物体的组织有关的信息；和

10、分析部，其根据由测定部取得的信息，算出杂质相对于被细切的来自生物体的组织而言的比例。

11、[2]如[1]所述的系统，其中，分析部还根据杂质的比例来判断分离状态。

12、[3]如[1]或[2]所述的系统，其还具备学习部，所述学习部基于来自分析部的信息来对参数的过与不足进行提取。

13、[4]如[1]～[3]中任一项所述的系统，其还具备更新部，所述更新部基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数。

14、[5]如[1]～[4]中任一项所述的系统，其还具备搅拌部，所述搅拌部对经细切的来自生物体的组织进行搅拌。

15、[6]如[1]～[5]中任一项所述的系统，其还具备除去部，所述除去部基于来自分析部的信息，从经细切的来自生物体的组织中除去杂质。

16、[7]如[1]～[6]中任一项所述的系统，其中，参数包含细切次数、细切角度、施加于细切的力、及细切位置中的至少一者。

17、[8]如[1]～[7]中任一项所述的系统，其中，与被细切的来自生物体的组织有关的信息包含杂质的颜色、杂质的大小、及施加于细切的力中的至少一者。

18、[9]如[1]～[8]中任一项所述的系统，其中，活细胞为成肌细胞。

19、发明的效果

20、根据本发明的系统，能够简便·可靠且自动地进行从来自生物体的组织分离活细胞的操作，不仅能够将操作者之间的回收活细胞数的偏差消除，而且能够大幅削减操作者的劳动力。

技术特征：

1.用于从来自生物体的组织中分离活细胞的系统，其具备：

2.如权利要求1所述的系统，其中，分析部还根据杂质的比例来判断分离状态。

3.如权利要求1或2所述的系统，其还具备学习部，所述学习部基于来自分析部的信息对参数的过与不足进行提取。

4.如权利要求1～3中任一项所述的系统，其还具备更新部，所述更新部基于由学习部提取到的参数的过与不足来更新参数。

5.如权利要求1～4中任一项所述的系统，其还具备搅拌部，所述搅拌部对经细切的来自生物体的组织进行搅拌。

6.如权利要求1～5中任一项所述的系统，其还具备除去部，所述除去部基于来自分析部的信息，从经细切的来自生物体的组织中除去杂质。

7.如权利要求1～6中任一项所述的系统，其中，参数包含细切次数、细切角度、施加于细切的力、及细切位置中的至少一者。

8.如权利要求1～7中任一项所述的系统，其中，与被细切的来自生物体的组织有关的信息包含杂质的颜色、杂质的大小、及施加于细切的力中的至少一者。

9.如权利要求1～8中任一项所述的系统，其中，活细胞为成肌细胞。

技术总结
本发明的目的在于提供从来自生物体的组织中简便且稳定地分离各种活细胞的系统。通过提供用于从来自生物体的组织中分离活细胞的系统，从而解决了上述课题，所述系统具备：细切部，其基于参数对来自生物体的组织进行细切；测定部，其取得与被细切的来自生物体的组织有关的信息；和分析部，其根据由测定部取得的信息，算出杂质相对于被细切的来自生物体的组织而言的比例。

技术研发人员：野口枝莉,松村匡记
受保护的技术使用者：泰尔茂株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12