耐热性蛋白质谷氨酰胺酶的制作方法

本发明涉及一种耐热性蛋白质谷氨酰胺酶。更具体而言，本发明涉及耐热性蛋白质谷氨酰胺酶、编码该耐热性蛋白质谷氨酰胺酶的dna、重组载体、转化体、酶制剂、该耐热性蛋白质谷氨酰胺酶的制造方法、以及该耐热性蛋白质谷氨酰胺酶的用途。

背景技术：

1、蛋白质谷氨酰胺酶是对蛋白质中的谷氨酰胺残基和天冬酰胺残基的γ-酰胺基和β-酰胺基进行脱酰胺的酶，具体而言，已知有来自粘金黄杆菌(chryseobacterium gleum)jcm2410株的蛋白质谷氨酰胺酶以及来自解朊金黄杆菌(chryseobacteriumproteolyticum)9670株的蛋白质谷氨酰胺酶(专利文献1)。

2、如果利用蛋白质谷氨酰胺酶处理蛋白质，则产生羧基，因此认为带来蛋白质的负电荷增加引起的蛋白质的可溶性和水分散性的增大、以及使蛋白质的高级结构变化引起的蛋白质的乳化能力和乳化稳定性等的提高。

3、因此，蛋白质谷氨酰胺酶被用于对各种蛋白质的功能特性进行改性的技术。例如，在专利文献2中，公开了使蛋白质谷氨酰胺酶和转谷氨酰胺酶作用于蛋白质而对蛋白质进行改性的方法，记载了在使用牛奶的酸奶的制造、使用小麦的豆腐的制造、使用小麦的面条的制造中，通过利用蛋白质谷氨酰胺酶和转谷氨酰胺酶进行处理，提高了制造的食品的光滑性的情况。另外，在专利文献3中，公开了使用精氨酸或其盐和蛋白质谷氨酰胺酶的畜肉加工食品的制造方法，记载了在香肠、火腿、汉堡、干炸食品、炸猪排、叉烧等的制造中，通过利用精氨酸或其盐和蛋白质谷氨酰胺酶处理原料畜肉，得到的加工食品的口感提高。

4、现有技术文献

5、专利文献

6、专利文献1：国际公开第2010/029685号

7、专利文献2：国际公开第2009/113628号

8、专利文献3：国际公开第2012/060409号

技术实现思路

1、发明所要解决的技术问题

2、蛋白质谷氨酰胺酶使蛋白质变性带来的效果被认为是在食品等的蛋白质原材料中产生各种优异的功能特性，认为蛋白质谷氨酰胺酶今后也能够广泛用于食品加工等。另一方面，迄今为止的蛋白质谷氨酰胺酶具有固有的热特性，因此蛋白质的处理中的温度条件根据蛋白质谷氨酰胺酶的热特性而必然受到限制。因此，为了将蛋白质谷氨酰胺酶扩大至更广泛的用途，期望进一步提高耐热性。

3、因此，本发明的目的在于提供一种耐热性提高的蛋白质谷氨酰胺酶。

4、用于解决技术问题的手段

5、本发明人通过从申请人拥有的非公知的菌株文库的筛选，发现具有提高了耐热性的蛋白质谷氨酰胺酶。本发明是基于该见解完成的。即，本发明提供以下揭示的方式的发明。

6、项1.一种蛋白质谷氨酰胺酶，其包含以下(1)～(3)中任一项所示的多肽：

7、(1)包含序列号1或2所示的氨基酸序列的多肽；

8、(2)在序列号1或2所示的氨基酸序列中，1个或多个氨基酸残基被替换、添加、插入或缺失而成、且显示与包含序列号1或2所示的氨基酸序列的多肽同等的耐热性的多肽；以及

9、(3)在序列号1或2所示的氨基酸序列中，相对于序列号1或2所示的氨基酸序列的序列一致性为76％以上、且显示与包含序列号1或2所示的氨基酸序列的多肽同等的耐热性的多肽。

10、项2.一种dna，其编码项1所述的蛋白质谷氨酰胺酶。

11、项3.一种表达盒或重组载体，其包含项2所述的dna。

12、项4.一种转化体，其通过项3所述的表达盒或重组载体转化宿主而得到。

13、项5.根据项1所述的蛋白质谷氨酰胺酶的制造方法，其包含培养项4所述的转化体的工序。

14、项6.一种酶制剂，其包含项1所述的蛋白质谷氨酰胺酶。

15、项7.一种蛋白质改性剂，其包含项1所述的蛋白质谷氨酰胺酶。

16、项8.一种改性的蛋白质材料的制造方法，其包含使项1所述的蛋白质谷氨酰胺酶作用于蛋白质材料的工序。

17、项9.根据项8所述的制造方法，其中，所述蛋白质材料为食用蛋白质材料。

18、发明效果

19、根据本发明，提供一种具有提高的耐热性的蛋白质谷氨酰胺酶。

技术特征：

1.一种蛋白质谷氨酰胺酶，其特征在于，包含以下(1)～(3)中任一项所示的多肽：

2.一种dna，其特征在于，编码权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶。

3.一种表达盒或重组载体，其特征在于，包含权利要求2所述的dna。

4.一种转化体，其特征在于，通过权利要求3所述的表达盒或重组载体转化宿主而得到。

5.根据权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶的制造方法，其包含培养权利要求4所述的转化体的工序。

6.一种酶制剂，其特征在于，包含权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶。

7.一种蛋白质改性剂，其特征在于，包含权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶。

8.一种改性的蛋白质材料的制造方法，其特征在于，包含使权利要求1所述的蛋白质谷氨酰胺酶作用于蛋白质材料的工序。

9.根据权利要求8所述的改性的蛋白质材料的制造方法，其中，所述蛋白质材料为食用蛋白质材料。

技术总结
本发明的目的在于提供一种耐热性提高的蛋白质谷氨酰胺酶。包含以下的(1)～(3)中任一项所示的多肽的蛋白质谷氨酰胺酶的耐热性提高：(1)包含序列号1或2所示的氨基酸序列的多肽；(2)在序列号1或2所示的氨基酸序列中，1个或多个氨基酸残基被替换、添加、插入或缺失而成，且显示与包含序列号1或2所示的氨基酸序列的多肽同等的耐热性的多肽；以及(3)在序列号1或2所示的氨基酸序列中，相对于序列号1或2所示的氨基酸序列的序列一致性为76％以上、且显示与包含序列号1或2所示的氨基酸序列的多肽同等的耐热性的多肽。

技术研发人员：松冈友洋,谷内宽之,千田大树,结城健介
受保护的技术使用者：天野酶制品株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15