具有氨基的聚轮烷的制作方法

本发明涉及具有氨基的聚轮烷。

背景技术：

1、细胞培养技术在医药品及化妆品领域、再生医疗研究中被广泛利用，是重要的技术。作为细胞培养的环境，需要适当的培养环境、培养液、培养基材。其中，培养基材具有作为供细胞粘附的支架的作用，要求下述特性：为适于细胞培养的表面或能够加工；没有细胞毒性；能够进行灭菌处理或能够维持灭菌状态；在培养条件下不变质；不妨碍显微镜下的观察；等等。

2、以往，作为培养基材，多使用玻璃制品，但现在广泛使用聚苯乙烯制品。但是，将聚苯乙烯树脂成型而得的培养基材的表面为疏水性，与细胞的亲和性也低，因此通常实施表面处理。作为表面处理，可举出等离子体处理、电晕放电处理、氧化剂处理、基于亲水性物质的涂覆。作为涂覆剂，大多为促进细胞粘附的物质，例如，已知有i型胶原蛋白、iv型胶原蛋白、明胶、纤连蛋白、玻连蛋白、层粘连蛋白、基质胶、羟基磷灰石等。另外，还已知若用水溶性弹性蛋白进行涂覆，则会促进血管平滑肌细胞或弹性蛋白反应性细胞的分化诱导。

3、间充质干细胞是具有自我复制能力和向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞、韧带细胞等间充质组织的多分化能力的来源于中胚层的体性干细胞。在成体组织中，存在于真皮、骨骼肌、脂肪组织等结缔组织中、或主要存在于骨髓间质中，在结缔组织的修复、恒常性的维持、造血干细胞的增殖、分化的控制中发挥功能。间充质干细胞的分化由生物学因子、物理学因子复杂地控制。例如，已知若在间充质干细胞的培养基中添加地塞米松、β-甘油磷酸、抗坏血酸，则能够向成骨细胞分化诱导，若在间充质干细胞的培养基中添加地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素、吲哚美辛，则能够向脂肪细胞分化诱导。

4、近年来，培养基材的特性(例如，硬度等主体特性(bulk properties)、涂层的表面特性)对培养细胞的功能产生影响正受到关注，报道了使具有所期望功能的细胞增殖的研究(非专利文献1～3)。

5、现有技术文献

6、非专利文献

7、非专利文献1：cell,2006,126,677-689.

8、非专利文献2：nature reviews materials,2020,5,686-705.

9、非专利文献3：adv.healthcare mater.2015,4,215-222.

技术实现思路

1、发明所要解决的课题

2、然而，为了得到具有所期望功能的细胞而对细胞培养基材的主体特性(硬度等)进行微调整仍然是困难的。为了使间充质干细胞分化成所期望的细胞系统，选择合适的物理学因子被认为是有用的。因此，本发明的目的在于提供能够促进间充质干细胞的分化诱导的涂覆剂及培养基材。

3、用于解决课题的手段

4、本发明提供以下的[1]～[15]。

5、[1]式(1)表示的聚轮烷。

6、[化学式1]

7、

8、[式中，r1为氢原子或甲基，m为1～2000，n为10～500，

9、[化学式2]

10、为至少一个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精，x为2价有机基团。]

11、[2]涂覆剂，其包含式(1)表示的聚轮烷。

12、[化学式3]

13、

14、[式中，r1为氢原子或甲基，m为1～2000，n为10～500，

15、[化学式4]

16、为至少一个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精，x为2价有机基团。]

17、[3]如[2]所述的涂覆剂，其中，前述聚轮烷含有1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

18、[4]如[2]或[3]所述的涂覆剂，其中，在前述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～220个。

19、[5]细胞培养方法，其用于促进间充质干细胞的脂肪分化，

20、所述方法包括在经含有式(1)表示的聚轮烷的组合物涂覆的基板的表面上培养间充质干细胞。

21、[化学式5]

22、

23、[式中，r1为氢原子或甲基，m为1～2000，n为10～500，

24、[化学式6]

25、为至少一个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精，x为2价有机基团。]

26、[6]如[5]所述的方法，其包括在基板的表面上涂覆含有式(1)表示的聚轮烷的组合物。

27、[7]如[5]或[6]所述的方法，其中，前述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

28、[8]如[5]～[7]中任一项所述的方法，其中，在前述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～220个。

29、[9]细胞培养方法，其用于抑制间充质干细胞的成骨分化，

30、所述方法包括在经含有式(1)表示的聚轮烷的组合物涂覆的基板的表面上培养间充质干细胞。

31、[化学式7]

32、

33、[式中，r1为氢原子或甲基，m为1～2000，n为10～500，

34、[化学式8]

35、为至少一个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精，x为2价有机基团。]

36、[10]如[9]所述的方法，其包括在基板的表面上涂覆包含式(1)表示的聚轮烷的组合物。

37、[11]如[9]或[10]所述的方法，其中，前述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

38、[12]如[9]～[11]中任一项所述的方法，其中，在前述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～220个。

39、[13]培养基材，其包含经含有式(1)表示的聚轮烷的组合物涂覆的基板。

40、[化学式9]

41、

42、[式中，r1为氢原子或甲基，m为1～2000，n为10～500，

43、[化学式10]

44、为至少一个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精，x为2价有机基团。]

45、[14]如[13]所述的培养基材，其中，前述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

46、[15]如[13]或[14]所述的培养基材，其中，在前述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～200个。

47、发明的效果

48、根据本发明，能够提供可抑制间充质干细胞的成骨分化、或促进脂肪分化的涂覆剂。另外，根据本发明，还能够提供经该涂覆剂涂覆的基板(培养基材)。

技术特征：

1.式(1)表示的聚轮烷，

2.涂覆剂，其含有式(1)表示的聚轮烷，

3.如权利要求2所述的涂覆剂，其中，所述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

4.如权利要求2或3所述的涂覆剂，其中，在所述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～220个。

5.细胞培养方法，其用于促进间充质干细胞的脂肪分化，

6.如权利要求5所述的方法，其包括在基板的表面上涂覆包含式(1)表示的聚轮烷的组合物。

7.如权利要求5或6所述的方法，其中，所述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

8.如权利要求5～7中任一项所述的方法，其中，在所述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～220个。

9.细胞培养方法，其用于抑制间充质干细胞的成骨分化，

10.如权利要求9所述的方法，其包括在基板的表面上涂覆包含式(1)表示的聚轮烷的组合物。

11.如权利要求9或10所述的方法，其中，所述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

12.如权利要求9～11中任一项所述的方法，其中，在所述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～220个。

13.培养基材，其包含经含有式(1)表示的聚轮烷的组合物涂覆的基板，

14.如权利要求13所述的培养基材，其中，所述聚轮烷包含1～18个羟基被由-x-nh2表示的基团修饰的环糊精。

15.如权利要求13或14所述的培养基材，其中，在所述聚轮烷中，环糊精的贯穿数为3～200个。

技术总结
本发明提供式(1)表示的聚轮烷。[式中，R1为氢原子或甲基，m为1～2000，n为10～500，式(2)为至少一个羟基被由‑X‑NH2表示的基团修饰的环糊精，X为2价有机基团。]

技术研发人员：青山关谷瑠璃子,有坂庆纪,由井伸彦,岩田隆纪,依田哲也,秤屋雅弘,益田洋辉
受保护的技术使用者：电化株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13