一种抗苯环己哌啶抗体、检测苯环己哌啶的试剂和试剂盒的制作方法

本发明涉及抗体，具体而言，涉及一种抗苯环己哌啶抗体、检测苯环己哌啶的试剂和试剂盒。

背景技术：

1、苯环己哌啶(phencyclindine，pcp)，俗称“天使粉”，商标名为semylan，化学名为[1-(1-苯基环基己基)六氢吡啶，分子式为c17h25n，分子量为243.2。pcp纯品为白色结晶粉末，无嗅味；通常以盐酸盐的形式存在，易溶于水、乙醇和氯仿，常制成粉剂，也有片剂、胶囊、针剂等形式。大多数pcp因掺有其他添加剂而呈黄色至褐色。pcp合成于20世纪50年代，最初作为麻醉剂使用。不久发现在麻醉过程中产生幻觉，pcp在毒品市场出现时有50多种名称，如：天使粉、水晶、超级玻璃、火箭燃料等，常被误认为大麻和lsd等。因其制造简单，价格便宜，贩毒者常将pcp掺入其它毒品，甚至冒充其它毒品贩卖。

2、pcp用药后，可经各种途径进入体内被吸收，分布于全身各部位，对中枢神经系统有兴奋、抑制、致幻和镇痛作用，在麻醉过程中产生幻觉，被称为致幻剂。其作用机理是阻断位于神经细胞上的氯离子和钠离子通道，这一通道由神经递质谷氨酸钠所激活，谷氨酸通过其特异性受体n-甲基d-天门冬氨酸(nmda)受体的激活开通离子通道，pcp可选择性地阻断nmda受体，同时还影响多巴胺递质系统的功能。

3、pcp治疗量与中毒量之间差距很小。人体用量口服为每次10mg、静脉注射为0.2mg/kg体重，中毒血浓度为0.007～0.024g/ml，死亡血浓度为l～5g/ml。使用pcp易产生耐受性，一次服用即可使人体验到欣快感，对外界刺激敏感性增强，情绪提高，典型的欣快感可持续4-5小时。因此使人对其产生强烈的渴求感。长期使用出现焦虑或严重抑郁等，停药后，体内残存的药物反复作用，仍会出现一些症状，表现为：呼吸抑制、幻觉、激动、紧张、运动失调、呕吐、惊厥、皮疹、眼球震颤、血压增高、唾液分泌增加、高热、大汗、动作重复等，严重者出现昏迷、抽搐，甚至死亡。因此，pcp被认为是目前最为有害的毒品之一。

4、在禁毒工作中，为了研究推断吸毒者的吸毒史，以及对高危群体、吸毒群体的监控，需对吸毒者毛发和尿样进行检测，尤其是毛发中毒品成分的检验，可推测出吸毒时间的长短。在实际工作中，体内毒品的检测，通常是对尿液和血液进行检验，很少对毛发进行检测。由于药物在一两天就会很快从尿液中代谢和排泄，所以尿液中的pcp的快速确认会给禁毒工作提高效率。而目前针对pcp的检测方法主要有色谱分析、酶联免疫法(elisa)、以及胶体金法等。

5、色谱法的测定由于耗时较长、价格昂贵，其在临床上的应用有待进一步的研究。免疫的测定方法，简单快速成为了研究的热点。因此，本领域对于有效且特异性结合pcp并对其进行检测的抗体存在着强列需求，本发明公开了一种能够特异性识别pcp的单克隆抗体，可用pcp的识别、检测等。

技术实现思路

1、本申请提供一种亲和力、活性改善的苯环己哌啶抗体，以改苯环己哌啶的检测，为苯环己哌啶的检测提供重要的原料来源。

2、为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如seq id no:1至seq id no:3所示的hcdr1、hcdr2、hcdr3，和氨基酸序列如seq id no:4至seq id no:6所示的lcdr1、lcdr2、lcdr3。

3、为了实现上述目的，根据本发明的第二个方面，提供了一种抗苯环己哌啶抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有hfr1-hcdr1-hfr2-hcdr2-hfr3-hcdr3-hfr4的序列结构，所述轻链可变区区含有lfr1-lcdr1-lfr2-lcdr2-lfr3-lcdr3-lfr4的序列结构，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr 1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列为上述的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列。

4、为了实现上述目的，根据本发明的第三个方面，提供了一种抗苯环己哌啶抗体，包括重链和/或轻链，所述重链包括上述的重链可变区，所述轻链包括上述的轻链可变区。

5、为了实现上述目的，根据本发明的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段。

6、为了实现上述目的，根据本发明的第五个方面，提供了一种检测苯环己哌啶的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物。

7、为了实现上述目的，本发明还提供了一种载体、一种细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法。

技术特征：

1.一种抗苯环己哌啶抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如seq id no:1至seq id no:3所示的hcdr1、hcdr2、hcdr3，和氨基酸序列如seq id no:4至seq id no:6所示的lcdr1、lcdr2、lcdr3。

2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包括氨基酸序列如seq id no:7至seq id no:10所示的hfr1、hfr2、hfr3、hfr4和氨基酸序列如seq id no:11至seq id no:14所示的lfr1、lfr2、lfr3和lfr4，或与所述各序列具有至少80％同源性的氨基酸序列；

3.一种抗苯环己哌啶抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有hfr1-hcdr1-hfr2-hcdr2-hfr3-hcdr3-hfr4的序列结构，所述轻链可变区区含有lfr1-lcdr1-lfr2-lcdr2-lfr3-lcdr3-lfr4的序列结构，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列为权利要求1所述的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列，所述hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3、lfr4的氨基酸序列为权利要求2所述的hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3、lfr4的氨基酸序列；

4.根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；

5.根据权利要求1至4任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述功能性片段选自所述抗体的f(ab’)2、fab’、fab、fv和scfv中的任意一种。

6.一种抗苯环己哌啶抗体，包括重链和/或轻链，其特征在于，所述重链包括权利要求3所述的重链可变区和权利要求4所述的重链恒定区；所述轻链包括权利要求3所述的轻链可变区和权利要求4所述的轻链恒定区；

7.一种抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物包括权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段；

8.一种检测苯环己哌啶的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段或权利要求7所述的抗体偶联物。

9.一种核酸，其特征在于，其编码权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段。

10.一种载体，其特征在于，其含有权利要求10所述的核酸。

11.一种细胞，其特征在于，其含有权利要求10所述的核酸或权利要求11所述的载体。

12.一种制备权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段的方法，其特征在于，其包括：培养权利要求12所述的细胞。

技术总结
本发明公开了一种抗苯环己哌啶抗体、检测苯环己哌啶的试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明公开的抗苯环己哌啶抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体为苯环己哌啶的检测提供了重要的原料来源，且具有改善的亲和力和活性。

技术研发人员：孟媛,钟冬梅,唐丽娜,周全兴
受保护的技术使用者：东莞市朋志生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15