一种抗糖化血红蛋白抗体、检测糖化血红蛋白的试剂和试剂盒的制作方法

本发明涉及抗体，具体而言，涉及一种抗糖化血红蛋白抗体、检测糖化血红蛋白的试剂和试剂盒。

背景技术：

1、全球糖尿病患病率很高，是严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题，其防治一直是医学研究的热点。传统的诊断和治疗检测采用空腹血糖、餐后血糖和口服葡萄糖耐量实验等，但是血糖参数仅代表抽血时的瞬间血糖水平，而糖化血红蛋白(glcatedhemoglobin，ghb)作为反映长期血糖水平的金标准，也是检测糖尿病治疗的重要指标。ghb由于所结合的成分不同，又分为hba1a(与磷酰葡萄糖结合)、hba1b(与果糖结合)、hba1c(与葡萄糖结合)。hba1c在糖尿病管理中是公认的血糖控制金标准，也是评价糖尿病治疗方案的有效指标。目前，世界卫生组织和许多国家的糖尿病学会已将hba1c作为独立的糖尿病诊断指标。

2、hba1c是人体血液中红细胞内的血红蛋白(hb)与葡萄糖缓慢、持续且不可逆地进行非酶促蛋白糖化反应的产物，并于血糖浓度成正比。由于人体内红细胞的生存周期一般为120天，在红细胞死亡前，血液中的hba1c的含量会保持相对不变，因此hba1c水平可以稳定可靠得反映检测前120天内的平均血糖水平，受抽血时间、是否空腹，是否使用胰岛素等因素干扰不大，被认为是糖尿病治疗监测的“金标准”。结合血红蛋白的特点我们可以看出糖化血红蛋白的检测对于糖尿病的筛查、监控、治疗具有重要意义。

3、目前，hba1c的检测方法主要有胶体金免疫层析法及荧光免疫层析法，其都是基于抗体和抗原的特异性反应，同时利用标记物质(如胶体金、荧光)对被检测信号进行放大和显示的一种免疫学检测方法。类似的免疫学检测方法还有生化免疫比浊法、放射免疫法、化学发光法等。上述免疫学检测方法都需要针对于hba1c的抗体。

4、因此，本领域对于有效且结合糖化血红蛋白并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。

5、鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本申请提供一种亲和力、活性改善的糖化血红蛋白抗体，以改善糖化血红蛋白的检测，为糖化血红蛋白的检测提供重要的原料来源。

2、为了实现上述目的，根据本发明的一个方面，提供了一种抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如seq id no:1或seq id no:15所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no:2所示的hcdr2、氨基酸序列如seq id no:3所示的hcdr3，和氨基酸序列如seq id no:4至6所示的lcdr1、lcdr2、lcdr3。

3、为了实现上述目的，根据本发明的第二个方面，提供了一种抗糖化血红蛋白抗体或其功能性片段，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有hfr1-hcdr1-hfr2-hcdr2-hfr3-hcdr3-hfr4的序列结构，所述轻链可变区区含有lfr1-lcdr1-lfr2-lcdr2-lfr3-lcdr3-lfr4的序列结构，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列为上述的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列。

4、为了实现上述目的，根据本发明的第三个方面，提供了一种抗糖化血红蛋白抗体，包括重链和/或轻链，所述重链包括上述的重链可变区，所述轻链包括上述的轻链可变区。

5、为了实现上述目的，根据本发明的第四个方面，提供了一种抗体偶联物，所述抗体偶联物包括上述的抗体或其功能性片段。

6、为了实现上述目的，根据本发明的第五个方面，提供了一种检测糖化血红蛋白的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒包括上述的抗体或其功能性片段或上述的抗体偶联物。

7、为了实现上述目的，根据本发明的第六个方面，本发明还提供了一种载体、一种细胞及一种制备上述抗体或其功能性片段的方法。

8、为了实现上述目的，根据本发明的第七个方面，提供了一种检测糖化血红蛋白的方法，所述方法包括将上述抗体或其功能性片段与待检测样品中糖化血红蛋白接触形成免疫复合物。

技术特征：

1.一种抗糖化血红蛋白抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包括氨基酸序列如seq id no:1或seq id no:15所示的hcdr1、氨基酸序列如seq id no:2所示的hcdr2、氨基酸序列如seq id no:3所示的hcdr3，和氨基酸序列如seq id no:4至6所示的lcdr1、lcdr2、lcdr3。

2.根据权利要求1所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包括氨基酸序列如seq id no:7至seq id no:10所示的hfr1、hfr2、hfr3、hfr4和氨基酸序列如seq id no:11至seq id no:14所示的lfr1、lfr2、lfr3和lfr4，或与所述各序列具有至少80％同一性的氨基酸序列；

3.一种抗糖化血红蛋白抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段包含重链可变区和/或轻链可变区，所述重链可变区含有hfr1-hcdr1-hfr2-hcdr2-hfr3-hcdr3-hfr4的序列结构，所述轻链可变区区含有lfr1-lcdr1-lfr2-lcdr2-lfr3-lcdr3-lfr4的序列结构，所述hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列为权利要求1所述的hcdr1、hcdr2、hcdr3、lcdr1、lcdr2、lcdr3的氨基酸序列，所述hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3、lfr4的氨基酸序列为权利要求2所述的hfr1、hfr2、hfr3、hfr4、lfr1、lfr2、lfr3、lfr4的氨基酸序列；

4.根据权利要求1至3任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述抗体或其功能性片段还包含恒定区；

5.根据权利要求1至4任一所述的抗体或其功能性片段，其特征在于，所述功能性片段选自所述抗体的f(ab’)2、fab’、fab、fv和scfv中的任意一种。

6.一种抗糖化血红蛋白抗体，包括重链和/或轻链，其特征在于，所述重链包括权利要求3所述的重链可变区和权利要求4所述的重链恒定区；所述轻链包括权利要求3所述的轻链可变区和权利要求4所述的轻链恒定区；

7.一种抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物包括权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段；

8.一种检测糖化血红蛋白的试剂或试剂盒，其特征在于，所述试剂或试剂盒包括权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段或权利要求7所述的抗体偶联物。

9.一种核酸，其特征在于，其编码权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段。

10.一种载体，其特征在于，其含有权利要求9所述的核酸。

11.一种细胞，其特征在于，其含有权利要求9所述的核酸或权利要求10所述的载体。

12.一种制备权利要求1至6任一项所述的抗体或其功能性片段的方法，其特征在于，其包括：培养权利要求11所述的细胞。

13.一种检测糖化血红蛋白的方法，其特征在于，包括：

技术总结
本发明公开了一种抗糖化血红蛋白抗体、检测糖化血红蛋白的试剂和试剂盒，涉及抗体技术领域。本发明公开的抗糖化血红蛋白抗体包括重链互补决定区和轻链互补决定区。该抗体为糖化血红蛋白的检测提供了重要的原料来源，且具有改善的亲和力和活性。

技术研发人员：孟媛,钟冬梅,唐丽娜,李艳
受保护的技术使用者：东莞市朋志生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/22