MDH2抑制剂在作为或制备用于降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂中的应用

本发明属于生物制剂，具体涉及一种mdh2抑制剂在作为或制备用于降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂中的应用。

背景技术：

1、呕吐毒素(deoxynivalenol，don)和镰刀菌酸(fusaric acid，fa)是农产品及饲料中污染率很高的两种霉菌毒素，严重危害畜禽机体健康和动物食品安全。呕吐毒素和镰刀菌酸主要由禾谷镰刀菌、串珠镰刀菌及雪腐镰刀菌等镰刀菌属真菌代谢产生，对谷物的污染程度居于镰刀菌毒素之首，广泛存在于小麦、大麦、玉米等农作物中，饲料以及原料中也有很高的检出率。在对我国饲料和饲料原料样品的检测表明，呕吐毒素的检出率和浓度较高，远远超过了国家标准规定的限量。此外，各种类型饲料均检出不同程度的镰刀菌酸污染，受污染的猪饲料和奶牛日粮及青贮饲料中普遍含有不同浓度的镰刀菌酸。

2、呕吐毒素属于剧毒或中等毒物的范畴，被欧盟分类标准定为三级致癌物，对人和动物可以产生广泛的毒性效应，能够引起任何动物中毒，症状表现为呕吐、消化道出血、炎症，甚至死亡。猪是对呕吐毒素最为敏感动物之一，呕吐毒素对猪卵巢颗粒细胞具有毒性作用从而影响其生殖系统。饲喂仔猪含呕吐毒素的日粮，其空肠和回肠出现损伤，肠道出现多灶性萎缩，影响正常肠道功能。镰刀菌酸具有中等毒性，影响畜禽采食和生长发育；不同剂量的呕吐毒素和镰刀菌酸均能引起猪的呕吐、拒食、生长缓慢等现象发生；当饲料中同时存在镰刀菌酸和呕吐毒素时，相互之间会产生协同和相加效应，混合物整体的毒性增强。

3、因此，一种可以降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂是有必要的。

技术实现思路

1、针对以上问题，本发明目的之一在于提供一种可以降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂，该制剂是基于对mdh2基因进行抑制的制剂，抑制了mdh2基因表达可以有效降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性。

2、为了达到上述目的，可以采用以下技术方案：

3、本发明一方面提供了一种mdh2抑制剂在作为或制备用于降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂中的应用。

4、本发明另一方面提供了一种mdh2抑制剂在作为或制备用于提高呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性耐受性的药物中的应用。

5、本发明另一方面提供了一种mdh2抑制剂在选育对呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒素具有耐受性的植株品种或动物品种中的应用。

6、本发明有益效果至少包括：

7、(1)本发明对抑制mdh2基因表达与野生型mdh2基因的细胞，mdh2基因表达的细胞较野生型mdh2基因表达细胞在不同呕吐毒素浓度的条件下细胞活力均极显著提高，可以提高至27.01％，即对呕吐毒素具有明显的耐受性；

8、(2)本发明对抑制mdh2基因表达与野生型mdh2基因的细胞，mdh2基因表达的细胞较野生型mdh2基因表达细胞在不同镰刀菌酸浓度的条件下细胞活力均极显著提高，可以提高至38.23％，对镰刀菌酸的耐受性明显提高。

技术特征：

1.mdh2抑制剂在作为或制备用于降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂中的应用。

2.mdh2抑制剂在作为或制备用于提高呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性耐受性的药物中的应用。

3.mdh2抑制剂在选育对呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒素具有耐受性的植株品种或动物品种中的应用。

4.根据权利要求1至3中任一所述的应用，其特征在于，mdh2抑制剂包括用于敲除或敲低mdh2基因的crispr/cas9系统。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，mdh2基因包括如seq id no.1所示序列。

6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，crispr/cas9系统包括grna，其包括如seqidno.2所示的序列。

7.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，crispr/cas9系统包括双链grna探针，其包括如seq id no.3所示序列和seq id no.4所示序列。

技术总结
本发明属于生物制剂技术领域，具体涉及一种MDH2抑制剂在作为或制备用于降低呕吐毒素和/或镰刀菌酸毒性的制剂中的应用。本发明公开了MDH2基因在提高细胞对呕吐毒素和镰刀菌酸抗性中的应用，通过CRISPR基因编辑获得了两种MDH2突变细胞系，它们与野生型MDH2基因表达细胞相比，对呕吐毒素和镰刀菌酸有更强的耐受性，表现为细胞活力极显著提高。

技术研发人员：张晓爱,施炜涛,张健玲,魏文康,房元杰,陈庄,刘文华,俞婷,王蕾
受保护的技术使用者：广东省农业科学院农业生物基因研究中心
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13