抑制ABCB6基因表达的siRNA及其应用的制作方法

本发明实施例涉及生物，具体涉及一种抑制abcb6基因表达的sirna及其应用。

背景技术：

1、多发性骨髓瘤(mm)是一种恶性浆细胞肿瘤，以患者骨髓中浆细胞异常克隆性增生为主要特征，大多数患者伴有单克隆免疫球蛋白(尤其是m蛋白)过度生成，但也有极少数患者不产生m蛋白。mm是继淋巴瘤后是第二个最常见的血液系统恶性肿瘤，从1844年第一个被记录的mm患者病例研究开始至今，mm的研究已经有接近180年历史。研究显示mm约占血液系统恶性肿瘤的12-15％，占全部恶性肿瘤的1.8％，占血液系统肿瘤死亡人数的15％-20％，占恶性肿瘤死亡人数的2.1％，平均存活時间为6年左右。每年的新增加的mm患者人数约为30330例，导致12650人死亡。诊断为多发性骨髓瘤的病人的中位年龄为66-70岁，大约有37％患者的年龄小于65岁。通常情况下mm很少见于30岁以下的人群(发病率为0.02％-0.3％)，发病率在性别上也有差异，男性发病率要稍高于女性。随着临床诊断、治疗方式和分子机制的不断深入和发展，虽然mm的诊断和治疗都得到了极大的提高，mm仍为不可治愈性恶性肿瘤。近10年来，随着我国逐步进入人口老龄化阶段，mm发病率呈逐年上升的趋势，须引起重视。

2、atp结合盒(atp-binding cassette，abc)转运蛋白是一大类跨膜蛋白超家族，具有特殊的氨基酸序列和atp结合域，可通过atp依赖途径促进多种生物化合物，如多肽、药物、类固醇、胆酸、磷脂和离子等的跨膜转运。abc蛋白对物质的转运通常是单向的。在细菌中，它们主要参与一些维持生命所必须的物质转运，如糖、维生素、金属离子等。而在真核细胞中，多数abc蛋白则参与物质从胞浆向胞外或细胞器(内质网、线粒体、过氧化物酶体等)的运输。abcb6是abcb亚家族(atp-binding cassette，subfamilyb)的一员。该亚家族含有4个完全转运蛋白和7个半转运蛋白。abcb6是一种半转运蛋白，通过形成同源二聚体获得功能abcb6起初被认为是一种线粒体外膜蛋白，参与卟啉的转运过程，在亚铁血红素的合成过程中发挥重要作用。随后研究发现，abcb6还可定位于细胞膜、内体、溶酶体膜、高尔基体和成熟网织红细胞分泌的外泌体，提示abcb6不仅在线粒体具有重要功能，还在其他细胞器中发挥一定的作用。有学者发现，过表达abcb6可促进肿瘤细胞耐药性的产生。我们研究发现abcb6在多发性骨髓瘤中显著高表达，且与其预后有关。因此，靶向抑制abcb6表达可能可以作为多发性骨髓瘤治疗的新思路。

3、rna干扰(rnai)技术是利用双链rna，高效、特异性降解细胞内同源信使rna，从而阻断特定基因表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。与反义寡聚核苷酸技术相比，rnai技术具有更高的特异性，是更有效的方法。目前，rnai技术是肿瘤基因治疗领域的一个热点技术，研究表明，sirna沉默肿瘤耐药相关基因的表达，可逆转肿瘤mdr(多药耐药性)，同时结合抗肿瘤药物，能有效的对多药耐药肿瘤进行治疗。因此，sirna是一种很有前途的癌症治疗策略。

技术实现思路

1、为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

2、根据本发明实施例的第一方面，提供了一种抑制abcb6基因表达的sirna，所述sirna为siabcb6-3#，其序列为：

3、正义链：5’-gcuaccugguguucaaugu-3’；

4、反义链：5’-acauugaacaccagguagc-3’。

5、进一步地，所述siabcb6-3#序列3’端悬挂由脱氧核苷组成的碱基tt。

6、根据本发明实施例的第二方面，提供了如上所述的抑制abcb6基因表达的sirna在制备预防或治疗抗多发性骨髓瘤药物中的应用。

7、进一步地，所述多发性骨髓瘤为硼替佐米敏感和耐药多发性骨髓瘤。

8、本发明实施例具有如下优点：

9、本发明的sirna能有效抑制abcb6基因的表达，并能够显著抑制多发性骨髓瘤细胞增殖和克隆形成能力，促进铁死亡，可应用于制备预防或治疗抗多发性骨髓瘤药物。

技术特征：

1.一种抑制abcb6基因表达的sirna，其特征在于，所述sirna为siabcb6-3#，其序列为：

2.根据权利要求1所述的抑制abcb6基因表达的sirna，其特征在于，所述siabcb6-3#序列3’端悬挂由脱氧核苷组成的碱基tt。

3.权利要求1所述的抑制abcb6基因表达的sirna在制备预防或治疗抗多发性骨髓瘤药物中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述多发性骨髓瘤为硼替佐米敏感和耐药多发性骨髓瘤。

技术总结
本发明实施例公开了一种抑制ABCB6基因表达的siRNA及其应用，属于生物技术领域。所述siRNA为siABCB6‑3#，其序列为：正义链：5’‑GCUACCUGGUGUUCAAUGU‑3’；反义链：5’‑ACAUUGAACACCAGGUAGC‑3’。本发明的siRNA能有效抑制ABCB6基因的表达，并能够显著抑制多发性骨髓瘤细胞增殖和克隆形成能力，促进铁死亡，可应用于制备预防或治疗抗多发性骨髓瘤药物。

技术研发人员：阴钊,陈莉智,雷斯,刘爽,张青,欧瑞明,吕宜雯
受保护的技术使用者：广东省第二人民医院（广东省卫生应急医院）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12