一株溶藻弧菌及其应用

本发明涉及微生物学，具体而言，涉及一株溶藻弧菌及其应用。

背景技术：

1、大型海藻是开发海洋多糖功能食品，寻找新型多糖药物先导化合物的宝贵资源，其蕴藏着多种结构各异的k-卡拉胶多糖。当下k-卡拉胶多糖资源供应缺口大，生产手段落后，而k-卡拉胶多糖存在分子量大、水溶性低、不易被吸收等问题，因此k-卡拉胶多糖仅仅作为原料销至国外或采用简单粗放加工提取k-卡拉胶作为食物或食品添加剂使用。

2、相比于k-卡拉胶多糖，k-卡拉胶寡糖不仅来源丰富、种类繁多、性质稳定、应用广泛、活性独特，还具有分子量小、易溶于水、无抗原性等显著优势，具有多种医药保健功效，如抗病毒、抗氧化、抗凝血、免疫调节等功能。

3、制备k-卡拉胶寡糖的常见方法主要有化学法和物理法，但是现有方法存在破坏多糖的结构以及产生有害副产物等缺点。

技术实现思路

1、本发明提供一株溶藻弧菌及其应用，用以克服现有技术中存在的至少一个技术问题。

2、有鉴于此，本发明提供了一株溶藻弧菌及其应用，该菌株能够将k-卡拉胶降解为k-卡拉胶寡糖，降解率大于80％，获得的k-卡拉胶寡糖具有显著的抗氧化作用。

3、本发明从大型海藻江蓠中分离获得菌株k-z8，该菌株为革兰氏阴性杆菌，菌落湿润、淡黄色、圆形，边缘整齐，好氧菌，可降解k-卡拉胶并在固体培养基上有水解圈，并随着时间的增加水解圈直径不断扩大。该菌株的16s rrna基因的核苷酸序列如seq id no：1所示。经形态学和16s rrna基因鉴定为溶藻弧菌(vibrio alginolyticus)，其保藏编号为cgmcc no.24569。

4、本发明还提供了所述溶藻弧菌在制备k-卡拉胶寡糖中的应用。

5、本发明还提供一种制备k-卡拉胶寡糖的方法，由本发明所述的溶藻弧菌k-z8降解k-卡拉胶制得。

6、一些实施方案中，本发明提供的制备k-卡拉胶寡糖的方法具体包括：

7、步骤(1)：将保藏编号为cgmcc no.24569的溶藻弧菌接种至种子培养基中，培养，获得种子液；

8、步骤(2)：将所述种子液接种于含k-卡拉胶的液体培养基中，培养，离心去除菌体，得到上清液；

9、步骤(3)：将所述上清液经分子截留、离心，收集分子量3～10kda的组分。

10、一些实施方案中，步骤(1)中所述溶藻弧菌k-z8的接种量为1～2％(v/v)；一些具体实施例中，所述接种量具体可为2％(v/v)。

11、一些实施方案中，所述培养的条件为：转速为160～180rpm，25～30℃下，培养12～15h；一些具体实施例中，所述培养的条件为：转速为180rpm，30℃下，培养15h。

12、一些具体实施例中，步骤(2)中，所述含k-卡拉胶的液体培养基包括如下质量体积百分数的组分：

13、0.15％k-卡拉胶、3％nacl、0.5％(nh4)2so4、0.26％k2hpo4·3h2o、0.1％mgso4·7h2o、0.01％feso4·7h2o，ph为7.5。

14、一些实施方案中，步骤(2)中所述种子液的接种量为1～2％(v/v)；一些具体实施例中，所述接种量具体可为2％(v/v)。

15、一些实施方案中，步骤(2)中所述培养的条件为：转速为160～180rpm，25～30℃下,培养45～60h；一些具体实施例中，所述培养的条件为：转速为180rpm，30℃下，培养45h。

16、本发明还提供了由本发明所述的方法制得的k-卡拉胶寡糖。

17、本发明研究了由本发明所述的方法制得的k-卡拉胶寡糖(即分子量3～10kda的粗k-卡拉胶寡糖)的抗氧化特性，发现其在ph 6.5～7.5的dpph清除率为＞75％，在温度30～35℃的dpph清除率为＞80％，具有显著的抗氧化作用。

18、基于以上效果，本发明还提供了所述的k-卡拉胶寡糖在制备抗氧化产品中的应用。

19、本发明从大型海藻江蓠中分离一株溶藻弧菌(vibrio alginolyticus)k-z8，于2022年3月23日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmccno.24569。该菌株能够将k-卡拉胶充分地降解为分子量3～10kda的k-卡拉胶寡糖，所获得的k-卡拉胶寡糖具有显著的抗氧化作用.

20、生物保藏说明

21、k-z8，分类命名：溶藻弧菌vibrio alginolyticus，于2022年3月23日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为cgmcc no.24569。

技术特征：

1.保藏编号为cgmcc no.24569的溶藻弧菌(vibrio alginolyticus)。

2.根据权利要求1所述的溶藻弧菌，其特征在于，其16s rrna基因的核苷酸序列如seqid no：1所示。

3.权利要求1或2所述的溶藻弧菌在制备k-卡拉胶寡糖中的应用。

4.一种制备k-卡拉胶寡糖的方法，其特征在于，由权利要求1或2所述的溶藻弧菌降解k-卡拉胶制得。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括：

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述溶藻弧菌k-z8的接种量为1～2％(v/v)；所述培养的条件为：转速为160～180rpm，25～30℃下，培养12～15h。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述含k-卡拉胶的液体培养基中各组分的质量体积百分含量为：

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述种子液的接种量为1～2％(v/v)；所述培养的条件为：转速为160～180rpm，25～30℃下，培养45～60h。

9.权利要求4～8任一项所述的方法制得的k-卡拉胶寡糖。

10.权利要求9所述的k-卡拉胶寡糖在制备抗氧化产品中的应用。

技术总结
本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一株溶藻弧菌及其应用。本发明从大型海藻江蓠中分离获得一株溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)K‑Z8，于2022年3月23日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24569。相比现有的溶藻弧菌，该菌株能够充分地将K‑卡拉胶降解为分子量3～10kDa的K‑卡拉胶寡糖，所获得的K‑卡拉胶寡糖具有显著的抗氧化作用。

技术研发人员：任伟,谢珍玉,冯子乔,魏雅丽,张智宇,龙昊,章翔,蔡晓霓,黄爱优
受保护的技术使用者：海南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13