本发明属于植物基因工程,具体涉及一个指示番茄丛枝菌根形成的报告基因 solyc06g070950及其应用。
背景技术:
1、研究表明,70%的陆生植物可以与土壤中的丛枝菌根真菌建立互利共生体,并利用其菌丝网络获取土壤中的养分。为了检测植物根系是否被丛枝菌根侵染成功,现有的技术主要是依靠苔酚蓝染料来判定根系是否形成丛枝菌根(schaffer et al., 1993)。
2、然而,现有方法依赖于高倍显微镜以及苔酚蓝染料本身具有很强的毒性,所以检测过程对自身人员和环境造成一定的损害。为此,本申请通过检测丛枝菌根侵染后,哪些基因发生显著变化来判定根系是否被丛枝菌根真菌侵染成功,从而避免有毒染料的使用。
技术实现思路
1、有鉴于此,本发明的目的在于提供一个指示番茄丛枝菌根形成的报告基因 solyc06g070950及其应用。
2、为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、本发明首先提供了一个指示番茄丛枝菌根形成的报告基因 solyc06g070950,所述报告基因 solyc06g070950的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、本发明还提供了上述的报告基因 solyc06g070950在检测丛枝菌根真菌侵染植物情况中的应用。
5、进一步的,上述植物为番茄。
6、进一步的,上述检测丛枝菌根真菌侵染植物情况为检测植物中 solyc06g070950基因表达情况。
7、本发明还提供了一种检测丛枝菌根真菌侵染植物情况的方法,所述方法以上述的报告基因 solyc06g070950设计特异性引物,采用实时荧光定量pcr进行检测。
8、进一步的,上述特异性引物序列如下:
9、正向引物:5’-gtgttcctaacggttagacaagc-3’,
10、反向引物:5’-caaccagatgaaacccagctact-3’。
11、与现有技术相比,本发明的显著优点在于:
12、本发明提供了一个指示番茄丛枝菌根形成的报告基因 solyc06g070950,报告基因 solyc06g070950在番茄根系受到丛枝菌根真菌侵染时,能够响应侵染信号并进行表达,用于检测丛枝菌根真菌对番茄根系的侵染情况,从而在转录水平上判定番茄根系是否成功被丛枝菌根真菌侵染。
1.一个指示番茄丛枝菌根形成的报告基因solyc06g070950,其特征在于:所述报告基因solyc06g070950的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.权利要求1所述的报告基因solyc06g070950在检测丛枝菌根真菌侵染植物情况中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述植物为番茄。
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述检测丛枝菌根真菌侵染植物情况为检测植物中solyc06g070950基因表达情况。
5.一种检测丛枝菌根真菌侵染植物情况的方法,其特征在于:所述方法以权利要求1所述的报告基因solyc06g070950设计特异性引物,采用实时荧光定量pcr进行检测。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:所述特异性引物序列如下: