一种干预治疗脑出血的多肽及其应用

本发明属于生物医药，具体涉及一种干预治疗脑出血的多肽及其应用。

背景技术：

1、脑出血患者死亡率很高，幸存者中有大部分遗留有神经功能障碍，并且还带来巨大的物质和人力成本，目前脑出血其关键机制仍不明确，除了支持治疗外，目前缺乏确切有效的治疗方法。因此，脑出血不仅是临床的一大有待攻克的难题，也是一个重大的公共健康问题。

2、脑出血后脑损伤是多种基因和信号通路参与的复杂病理生理过程，脑出血后基本病理变化包括原发性损伤和继发性损伤(feigin,v.l.,lawes,c.m.,bennett,d.a.andanderson,c.s.(2003).stroke epidemiology:a review of population-based studiesof incidence,prevalence,and case-fatality in the late 20th century.lancetneurol 2,43-53.)。

3、原发性损伤主要是出血时组织破坏以及血肿扩大、颅内压增高造成的机械损伤。继发性损伤机制包括炎症反应、细胞凋亡、坏死、红细胞裂解以及脑水肿形成等(xi,g.,keep,r.f.and hoff,j.t.(2006).mechanisms of brain injury after intracerebralhaemorrhage.lancet neurol 5,53-63.)。

4、研究发现，炎症在脑出血后继发性损伤中起重要作用，炎症机制主要涉及小胶质细胞的活化、炎性细胞的渗入及细胞因子和炎症趋化因子的释放，最终导致细胞死亡进而加重脑损伤。脑出血机制复杂多样，且相互关联现阶段还缺乏清楚的了解。目前有效控制和减轻脑出血后炎症继发性损伤是脑出血神经保护治疗的关键。因此，寻找脑出血炎症相关生物标记物及治疗靶点是脑出血相关研究中的重点，这不仅可为脑出血严重程度和预后的诊断提供更多的理论依据，也可为脑出血患者提供新的诊断和治疗方法。

5、脑出血后存在细胞凋亡和坏死。细胞凋亡或坏死后，释放大量细胞信号分子，其可促发炎症，被称为危险相关分子，包括高迁移率族蛋白(high mobility group box 1，hmgb1)、热激蛋白、冷休克蛋白等，而增多的hmgb1、cirp可刺激il-6r样受体诱导炎症应答。cirp(冷休克蛋白)是一种应激反应蛋白，可以被各种细胞应激源激活并且由细胞根据特定细胞环境，即其他应激反应分子的特异性存在而发挥作用，广泛参与体内各种生理和病理过程。cirp是一种新型的炎症介质，在出血性休克和败血症中可从心脏和肝脏分泌释放到循环系统中，通过介导il-6r受体形成复合物(cirp-il-6r)，激活下游jak-stat3信号通路上调tnf-α和hmgb1的表达，起到损伤相关分子蛋白(damage association molecularprotein，damp)的作用，触发炎症反应。目前cirp已经被鉴定为严重炎症或缺血时的重要介质，具有加重细胞损伤的有害功能。同时已有研究证明，il-6r已成为治疗炎症反应的十分有潜力的靶点之一，通过靶向抑制il-6r可有效抑制il-6r/jak/stat3信号通路诱发的炎症反应。但目前尚未有运用多肽类似物治疗脑出血炎症反应的研究报道。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提供一种干预治疗脑出血的多肽及其应用，为临床治疗脑出血提供策略。

2、本发明是通过以下技术方案实现的：

3、一种干预治疗脑出血的多肽，所述多肽为tat-cirp，其氨基酸序列如seq idno.3所示；其中，tat为11个氨基酸的穿膜结构序列，具体如seq id no.1所示；cirp为与il-6r亲和力最高的cirp蛋白序列上的15个氨基酸序列，具体如seq id no.2所示。

4、一种干预治疗脑出血的多肽在制备干预治疗脑出血的药物中的应用。

5、一种干预治疗脑出血的药物组合物，包括上述的多肽。

6、优选地，还包括药学上可接受的载体。

7、本发明的有益效果如下：

8、(1)本发明首次发现il-6r与cirp的其中一段有特异性结合，且之前文献报道的rhcirp和rhil-6r的平衡解离常数(kd)为9.81×10-8m，表明二者具有较强的结合亲和力。并证实cirp可以与il-6r结合促发炎症反应。由此，提示我们在炎症情况下可以通过抑制小胶质细胞中cirp与il-6r的结合抑制其介导的促炎反应。基于上述发现，本发明提供一种新的合成多肽tat-cirp作为干预治疗脑出血的药物，该多肽药物中转录反式激活蛋白tat中的氨基酸片段带动多肽穿透并进入细胞中，cirp部分序列的氨基酸片段能够识别出il-6r并与il-6r进行结合。此多肽不仅能通过特异性靶向il-6r，特异性结合il-6r，从而竞争性抑制cirp-il-6r复合物的形成，而且能进一步抑制jak/stat3介导的炎症反应，抑制m1型小胶质细胞的功能，从而改善脑出血后继发性炎症损伤。

9、(2)本发明的实验结果显示，采用该多肽药物进行治疗可以改善小鼠空间学习及记忆能力，缓解焦虑情绪，证实了多肽tat-cirp具有明确的脑出血的炎症抑制作用，为其临床应用提供了较完整的实验依据。

技术特征：

1.一种干预治疗脑出血的多肽，其特征在于，所述多肽为tat-cirp，其氨基酸序列如seq id no.3所示；其中，tat为11个氨基酸的穿膜结构序列，具体如seq id no.1所示；cirp为与il-6r亲和力最高的cirp蛋白序列上的15个氨基酸序列，具体如seq id no.2所示。

2.如权利要求1所述的一种干预治疗脑出血的多肽在制备干预治疗脑出血的药物中的应用。

3.一种干预治疗脑出血的药物组合物，其特征在于，包括权利要求1所述的多肽。

4.根据权利要求3所述的一种干预治疗脑出血的药物组合物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体。

技术总结
本发明公开了一种干预治疗脑出血的多肽及其应用，所述多肽为Tat‑CIRP，其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；其中，Tat为11个氨基酸的穿膜结构序列，具体如SEQ ID NO.1所示；CIRP为与IL‑6R亲和力最高的CIRP蛋白序列上的15个氨基酸序列，具体如SEQ ID NO.2所示。该多肽不仅能通过特异性靶向IL‑6R，特异性结合IL‑6R，从而竞争性抑制CIRP‑IL‑6R复合物的形成，而且能进一步抑制JAK/STAT3介导的炎症反应，抑制M1型小胶质细胞的功能，从而改善脑出血后继发性炎症损伤。本发明的多肽具有明确的脑出血的炎症抑制作用，为其临床应用提供了较完整的实验依据。

技术研发人员：王国华,唐晓燕,叶莉莎,张馨予,骆倩倩,杨欢
受保护的技术使用者：南通大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13