一种松墨天牛生防菌、菌剂及其制备方法和应用

本发明涉及生物防治，尤其是涉及一种松墨天牛生防菌、菌剂及其制备方法和应用。

背景技术：

1、松树是重要的木材资源，其是建筑木材的主要来源，全球一半的木材供应均来自于松树，具有极高的经济价值。松树病虫害防治工作是松树培育工作中的重要的一环，其中松材线虫病是全球松树的主要病害之一，其危害的松树种类多且范围广，松材线虫病起源于北美，1982年，在中国南京首次被报道，至今松材线虫病已经入侵我国17省1自治区1直辖市的731个县（区），造成的经济损失超千亿美元。因此，防治松材线虫病具有重要意义。

2、在我国，松材线虫病的主要媒介是松墨天牛，松墨天牛能够携带大量松材线虫进入松树体内导致松树发病死亡，因此控制松墨天牛的种群密度对于防治松材线虫病具有良好的效果。目前松墨天牛的防治方法包括生物防治、化学防治以及综合防治，其中是生物防治因其更加环保生态的特点成为最主要的防治手段，生物防治目前的主要工具包括微生物、天敌昆虫以及捕食性鸟类，其中微生物生物防治因其来源广、成本低、专一性、环保生态等特点被广泛开发用来替代化学杀菌剂。

3、目前松墨天牛的病原微生物主要包括白僵菌、绿僵菌、轮枝菌以及拟青霉菌等，其中主要的应用研究主要集中在白僵菌和绿僵菌上，而对其他松墨天牛生防菌剂资源的开发利用较少。

技术实现思路

1、本申请为了丰富松墨天牛生防菌剂资源库，提供了一种松墨天牛生防菌、菌剂以及制备方法和应用，该松墨天牛生防菌名称为 scopulariopsis alboflavescens huzu190，分类鉴定为 scopulariopsis alboflavescens，保藏号为cctcc m 20221603；该松墨天牛生防菌菌剂对松墨天牛具有较强的致死率且环保无毒性；该生防菌的制备方法简单且成本低。

2、本发明的具体技术方案为：

3、一种松墨天牛生防菌，所述松墨天牛生防菌命名为 scopulariopsis  alboflavescens huzu190，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2022年10月19日，保藏编号为cctcc m 20221603，微生物分类命名为 scopulariopsis alboflavescens。

4、本申请提供了一种松墨天牛生防菌剂，该生防菌命名为 scopulariopsis  alboflavescens huzu190，其采集自福建省厦门市松墨天牛发生区，目前已被保藏于湖北省武汉市武昌区武汉大学中国典型培养物保藏中心211室的中国典型培养物保藏中心；

5、一种松墨天牛生防菌剂，所述松墨天牛生防菌剂的活性成分选自 scopulariopsis  alboflavescens huzu190的发酵培养物、 scopulariopsis alboflavescens huzu190的细胞裂解物和 scopulariopsis alboflavescens huzu190的突变体中的一种或几种。

6、本申请还提供一种松墨天牛生防菌剂，该生防菌剂对松墨天牛的具有较高的致死率且环保无毒，能够显著抑制松墨天牛的生存活性，能够在15天内使松墨天牛的存活率降低至28％。

7、一种松墨天牛生防菌剂的制备方法，包括以下制备步骤：

8、（1）将 scopulariopsis alboflavescens huzu190接种于pda培养基上培养制成培养物；

9、（2）将步骤（1）制得的培养物置于tween-80溶液中，过滤出孢子，制成松墨天牛生防菌剂。

10、本申请还提供了一种松墨天牛生防菌剂的制备方法，该制备方法采用pda培养基对 scopulariopsis alboflavescens huzu190进行培养，并通过菌丝体破碎以及过滤除去菌丝体后获得培养物中的真菌孢子菌悬液，并将孢子菌悬液制成松墨天牛生防菌剂的制剂，该方法简单且培养要求低，同时真菌孢子的耐受性极高，不易失活，在适当的保存条件下具有较长的保质期，具有较好的应用前景。

11、作为优选，步骤（1）中所述的培养条件为：培养温度22~25℃，培养时间14~18天。

12、作为优选，步骤（2）中所述tween-80溶液的含量为0.01~2％，

13、作为优选，步骤（2）中所述tween-80溶液中还包括玻璃珠。

14、作为优选，步骤（2）中所述松墨天牛生防菌剂的孢子浓度为1×104~1×108个/ml。

15、一种松墨天牛生防菌在防治松墨天牛中的应用，包括以下制备步骤：将 scopulariopsis alboflavescens huzu190制成松墨天牛生防菌剂，再将松墨天牛生防菌剂喷洒在松墨天牛发生区。

16、作为优选，所述喷洒浓度为0.8~3kg/亩。

17、与现有技术相比，本申请具有以下技术效果：

18、（1）本申请提供的松墨天牛生防菌 scopulariopsis alboflavescens huzu190来源于被真菌菌丝覆盖的松墨天牛成虫虫体，该病原真菌能够侵染松墨天牛体壁并引起松墨天牛死亡，从而有效控制松墨天牛传播松材线虫病；

19、（2）本申请提供的松墨天牛生防菌菌剂对松墨天牛具有较强的致死活性且该生物制剂来源环保无毒性，对生态环境影响小；

20、（3）本申请提供的松墨天牛生防菌剂制备方法简单，培养要求低，具有较好的应用前景。

技术特征：

1.一种松墨天牛生防菌，其特征是，所述松墨天牛生防菌命名为scopulariopsis alboflavescens huzu190，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2022年10月19日，保藏编号为cctcc m 20221603，微生物分类命名为scopulariopsis alboflavescens。

2.一种松墨天牛生防菌剂，其特征是，所述松墨天牛生防菌剂的活性成分选自scopulariopsis alboflavescens huzu190的发酵培养物、scopulariopsis alboflavescens huzu190的细胞裂解物和scopulariopsis alboflavescens huzu190的突变体中的一种或几种。

3.一种如权利要求2所述的松墨天牛生防菌剂的制备方法，其特征是，包括以下制备步骤：

4.如权利要求3所述的松墨天牛生防菌剂的制备方法，其特征是，步骤（1）中所述的培养条件为：培养温度22~25℃，培养时间14~18天。

5.如权利要求3所述的松墨天牛生防菌剂的制备方法，其特征是，步骤（2）中所述tween-80溶液的含量为0.01％~2％。

6.如权利要求3所述的松墨天牛生防菌剂的制备方法，其特征是，步骤（2）中所述tween-80溶液中还包括玻璃珠。

7.如权利要求3所述的松墨天牛生防菌剂的制备方法，其特征是，步骤（2）中所述松墨天牛生防菌剂的孢子浓度为1×104~1×108个/ml。

8.一种如权利要求1~3任一所述的松墨天牛生防菌在防治松墨天牛中的应用，包括以下制备步骤：将scopulariopsis alboflavescens huzu190制成松墨天牛生防菌剂，再将松墨天牛生防菌剂喷洒在松墨天牛发生区。

9.如权利要求8所述的松墨天牛生防菌的应用，其特征是，所述喷洒浓度为0.8~3kg/亩。

技术总结
本发明涉及生物防治技术领域，公开了一种松墨天牛生防菌、菌剂及其制备方法和应用，该生防菌命名为Scopulariopsis alboflavescens HUZU190，来源于福建省厦门市松墨天牛发生区，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2022年10月19日，保藏编号为CCTCC M 20221603，微生物分类命名为Scopulariopsis alboflavescens；本申请提供的松墨天牛生防菌菌剂能够显著抑制松墨天牛的生存活性，处理15天即可使松墨天牛生存活性降低至28％，且该菌剂环保无毒无害；本申请提供的松墨天牛生防菌菌剂的制备方法简单，培养要求低，具有较好的应用前景。

技术研发人员：程驰航,樊建庭,张立钦,吴佳,吴圣鑫
受保护的技术使用者：湖州师范学院
技术研发日：
技术公布日：2024/6/13