1.本发明涉及天然产物化学技术领域，具体为一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法。
背景技术：
2.黄酮是黄芪中一类重要的化学成分，具有多种药理活性，主要包括抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌和抗血栓作用，在保健食品和制药行业具有广泛的应用前景。黄酮类化合物难溶于水，因此传统提取溶剂多为甲醇、乙醇等挥发性有机溶剂，对环境存在威胁。低共熔溶剂具有低挥发性、热稳定性、可设计性、低毒性、可生物降解和制备简单等突出特点。但是目前低共熔溶剂在中药研究中尚处于初始阶段，还存在许多问题和制约，其中主要包括低共熔溶剂的粘度较高的问题。因此，如何克服在提取过程中低共熔溶剂粘度较高等问题，是目前对低共熔溶剂研究的一个重要课题。所以基于以上情况，本发明利用循环脉冲超声处理以氯化胆碱为氢键受体的高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮。
3.公开号为cn101139378a的中国专利介绍了从黄芪中提取分离纯化高纯度毛蕊异黄酮葡萄糖苷的方法，主要包括用醇从黄芪中提取黄芪黄酮，然后经大孔树脂柱层析获得富含毛蕊异黄酮葡萄糖苷的流份，用甲醇重结晶法即可获得纯度达97％以上的毛蕊异黄酮葡萄糖苷。此法使用甲醇/乙醇提取，为挥发性有机溶剂，且溶剂消耗量大，耗时长，工艺繁琐。
4.公开号为cn115232176a的中国专利介绍了利用三元低共熔溶剂提取木质素的方法，主要包括将原料与三元低共熔溶剂混合反应，反应后在室温下冷却，冷却后加入乙醇搅拌，用乙醇清洗，过滤，旋转蒸发，加水，静置，得到不溶于水的木质素沉淀物，洗净，过滤，干燥后得到木质素。此法利用低共熔溶剂提取木质素耗时长，需反应4～8小时。
5.公开号为cn115154491a的中国专利介绍了利用低共熔溶剂提取香榧假种皮中黄酮类化合物的方法，主要包括将新鲜的香榧假种皮烘干，粉碎后获得干燥的香榧假种皮粉末，加入酶液，在25～35℃下酶解2～4h，得到酶解产物，进行微波处理，然后加入低共熔溶剂，超声辅助提取1～3h，之后离心，获得的上清液即为香榧假种皮黄酮提取液。此法溶剂消耗量大，耗时长，工艺繁琐，多个步骤反复提取可能会破坏黄酮结构。
6.目前，低共熔溶剂在天然产物提取、分离领域仍然有一些限制因素，黄芪资源的利用也需要进一步被探索，本发明的目的在于提供一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，结合大孔树脂色谱分离技术，以改善低共熔溶剂传质效率低、提取物后续分离难度大，并提高黄芪黄酮的提取率和纯度。
技术实现要素：
7.本发明的目的在于提供一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
8.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，包括如下步骤。
9.（1）将黄芪与含水低共熔溶剂按一定料液比置于循环脉冲超声机中，通过循环脉冲超声的空化作用破坏药材细胞的细胞壁，促进细胞内成分扩散至细胞外，得到提取物从而与溶剂通过氢键结合，达到对植物活性成分快速、强化提取的目的，利用超声波的机械产热作用降低低共熔溶剂的粘度，循环脉冲的样品处理方法可有效提高传质、加速溶剂渗透到植物细胞内。
10.（2）提取后的提取物经过固液分离得到提取液。
11.（3）提取液经过大孔树脂吸附、解吸和减压浓缩提取液液可得到黄芪黄酮的粗产品。
12.优选的，所述低共熔溶剂为氯化胆碱基低共熔溶剂。
13.优选的，所述低共熔溶剂的体积分数为20%-80%。
14.优选的，所述料液比为1：10-1：30g/ml。
15.优选的，所述循环脉冲超声机的超声功率为120-600w，超声时间为20-60min，超声温度为20-80℃，脉冲速度为10-20ml/min。
16.优选的，所述大孔树脂吸附洗脱过程中所用的洗脱剂依次为去离子水、乙醇溶液、去离子水的用量为3-4倍柱体积，乙醇溶液浓度为20-60%。
17.优选的，所述在经过大孔树脂吸附、解吸液解吸和减压浓缩液可得到黄芪黄酮的粗产品时可回收低共熔溶剂。
18.与现有技术相比，本发明的有益效果是：1.整个工艺流程简单，易操作，生产成本较低，能耗少。
19.2.循环脉冲超声辅助提取法不影响产物的化学结构和活性，黄酮得率高，适合小试生产。
20.3.提取溶剂为天然物质，价廉易得，且所有试剂可回收利用，不污染环境。
具体实施方式
21.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
22.实施例1：本发明提供一种技术方案：一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，包括如下步骤：（1）取干燥的黄芪粉末5 g置于循环脉冲超声机中，按料液比1:10 (g/ml)加入含水量50%的低共熔溶剂（氯化胆碱:苹果酸，1:1），循环脉冲超声提取30 min，循环脉冲超声机的超声功率为360 w，超声温度为60 ℃，循环速度为20 ml/min。
23.（2）提取液置于大孔树脂中静态吸附，使用去离子水洗脱得到部分低共熔溶剂，然后使用去40%乙醇洗脱，解吸液减压浓缩后得到黄芪黄酮0.45 g，纯度为4.98％。
24.实施例2：
本发明提供一种技术方案：一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，包括如下步骤：（1）取干燥的黄芪粉末100 g置于循环脉冲超声机中，按料液比1:25 (g/ml)加入含水量60%的低共熔溶剂(氯化胆碱:苹果酸，1:1），循环脉冲超声提取50 min，循环脉冲超声机的超声功率为480 w，超声温度为60 ℃，循环速度为15 ml/min。
25.（2）提取液置于大孔树脂中静态吸附，然后使用去离子水洗脱得到部分低共熔溶剂，再经45%的乙醇解吸，解吸液减压浓缩后得到黄芪黄酮5.9 g，纯度为3.61％。
26.利用超声波的机械产热作用降低低共熔溶剂的粘度，循环脉冲的样品处理方式可有效提高传质、加速溶剂渗透到植物细胞内。
27.循环脉冲超声辅助低共熔溶剂提取法提取速度快，能耗低，得率高。
28.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
技术特征：
1.一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将黄芪与含水低共熔溶剂按一定料液比置于循环脉冲超声机中，通过循环脉冲超声的空化作用破坏药材细胞的细胞壁，促进细胞内成分扩散至细胞外，溶剂通过氢键结合等作用力得到提取物，达到对植物活性成分快速、强化提取的目的，利用超声波的机械产热作用降低低共熔溶剂的粘度，循环脉冲的样品处理方法可有效提高传质、加速溶剂渗透到植物细胞内；（2）提取后的提取物经过固液分离得到提取液；（3）提取液经过大孔树脂吸附、解吸和减压浓缩液可得到黄芪黄酮的粗产品。2.根据权利要求1所述的一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于：所述低共熔溶剂为氯化胆碱基低共熔溶剂。3.根据权利要求1所述的一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于：所述低共熔溶剂的体积分数为20%-80%。4.根据权利要求1所述的一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于：所述料液比为1：10-1：30g/ml。5.根据权利要求1所述的一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于：所述循环脉冲超声机的超声功率为120-600w，超声时间为20-60min，超声温度为20-80℃，脉冲速度为10-20ml/min。6.根据权利要求1所述的一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于：所述大孔树脂吸附洗脱过程中所用的洗脱剂依次为去离子水、乙醇溶液，去离子水的用量为3-4倍柱体积，乙醇溶液浓度为20-60%。7.根据权利要求1所述的一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，其特征在于：所述在经过大孔树脂吸附、解吸和减压浓缩液可得到黄芪黄酮的粗产品并可同时回收低共熔溶剂。
技术总结
本发明公开了一种循环脉冲超声处理高粘度低共熔溶剂提取黄芪黄酮的方法，包括如下步骤，将黄芪与含水低共熔溶剂按一定料液比置于循环脉冲超声机中，通过循环脉冲超声的空化作用破坏药材细胞的细胞壁，促进细胞内成分扩散至细胞外，得到提取物，提取液经过大孔树脂吸附、解吸和减压浓缩液可得到黄芪黄酮的粗产品及部分低共熔溶剂。整个工艺流程简单，易操作，生产成本较低，能耗少，循环脉冲超声辅助提取法不影响产物的化学结构和活性，黄酮得率高，适合小试生产，提取溶剂为天然物质，价廉易得，且所有试剂可回收利用，不污染环境。不污染环境。
技术研发人员：刘婷婷 孟悦 潘旭 隋小宇 张宏莲
受保护的技术使用者：齐齐哈尔医学院
技术研发日：2022.12.14
技术公布日：2023/2/23