一种高纯度外泌体分离装置的制作方法

本技术涉及外泌体分离，属于生物物质分离纯化领域。

背景技术：

1、外泌体作为细胞之间重要的通讯介质今年来逐渐受到重视，其在基础研究，临床诊断以及治疗方面的应用前景正在被不断的挖掘，如何获得高纯度的外泌体是外泌体基础研究及临床应用所要面临的首要问题，目前常见外泌体提纯的方法包括：1.梯度离心法，此方法虽然简单，但前期工作和临繁杂，比较耗时,得到的外泌体含量较少，且纯度不高；2.免疫磁珠法，耗时短，无需超速离心，但对外泌体的生物活性有所影响，且分离纯化成本高；此外还有peg沉淀方法以及超速离心法等都面临纯度不高等问题。针对上述问题，在原有的外泌体分离纯化的基础上进行创新设计，我们开发一种高纯度外泌体分离装置。

技术实现思路

1、本实用新型的目的在于提供一种高纯度外泌体分离装置，以解决上述背景技术中提出的问题。

2、为实现上述目的，本实用新型提供如下技术方案：一种高纯度外泌体提取装置，包括装置i(1)以及装置ii(2)，所述装置i依靠孔径大小分选外泌体颗粒，所述装置ii为温敏型外泌体分离装置。

3、所述装置i含有u型管路，管路有进口(3)以及出口(4)，u型管路上开有小孔(7)，孔径大小为150nm。所述装置ii(2)温敏型外泌体分离管内设置有s型玻璃微管(5)。所述s型玻璃微管(5)的直径为100um，且s型玻璃微管(5)的管道总长度为1m。所述装置ii(2)温敏型外泌体分离管,其特征在于：形成温敏型特性包括如下步骤：

4、步骤一：

5、s型玻璃微管(5)内壁经硅烷偶联剂aptes改性后通过层层自组装(layer bylayer)技术使管道内部均匀涂抹上一层明胶；

6、步骤二：

7、然后使用生物素化抗体连接明胶表面的链霉亲和素用于分离外泌体；

8、步骤三：

9、经装置i初步筛选后的包含外泌体悬液流经装置ii s型玻璃微管(5)；

10、步骤四：

11、温敏型外泌体分离管主体(2)分离获得外泌体后将装置ii置于37°培养箱中；

12、步骤五：

13、用pbs液体冲洗管道，脱落的外泌体就会从右边出口(6)流出被收集用于下游应用分析。

14、与现有技术相比，本实用新型的有益效果是：该高纯度外泌体分离装置，

15、1、可以通过装置i对外泌体进行初步的筛选，获得直径小于150nm的颗粒；

16、2、s型玻璃微管内壁经硅烷偶联剂aptes改性后通过层层自组装技术使管道内部均匀涂抹上一层明胶，且明胶表面使用链霉亲和素改性，同时使用生物素化抗体连接明胶表面的链霉亲和素，有利于对细胞的分离工作；

17、3、明胶在37℃温度之下从固态变成液态，从而可使连接在明胶表面的外泌体完整解离，方便后续通过液体对管道进行冲洗的工作，便于脱落的目的外泌体就会从右边出口流出被收集到，这样的分离方法能够保持较高的外泌体活性和完整性。

技术特征：

1.一种高纯度外泌体分离装置，包括装置i(1)以及装置ii(2)，其特征在于：所述装置i(1)依靠孔径大小分选外泌体颗粒，所述装置ii(2)为温敏型外泌体分离装置，所述装置ii(2)内设置有s型玻璃微管(5)，s型玻璃微管(5)内壁经硅烷偶联剂aptes改性后通过层层自组装技术使管道内部均匀涂抹上一层明胶，且明胶表面使用链霉亲和素改性，生物素化抗体连接明胶表面的链霉亲和素。

2.根据权利要求1所述的一种高纯度外泌体分离装置，其特征在于：所述装置i(1)含有u型管路，u型管路有进口(3)以及出口(4)，u型管路上开有小孔(7)，小孔(7)的孔径大小为150nm。

3.根据权利要求1所述的一种高纯度外泌体分离装置，其特征在于：所述s型玻璃微管(5)的直径为100um，且s型玻璃微管(5)的管道总长度为1m。

技术总结
本技术公开了一种高纯度外泌体分离装置，包括装置I以及装置II，所述装置I依靠孔径大小分选颗粒，所述装置II为温敏型外泌体分离装置，所述装置I孔径大小为150nm，所述装置II温敏型细胞分离管主体的内壁设置有S型玻璃微管。管内壁经硅烷偶联剂APTES改性后通过层层自组装技术使管道内部均匀涂抹上一层明胶，且明胶表面使用链霉亲和素改性，同时使用生物素化抗体连接明胶表面的链霉亲和素，有利于对外泌体精确分选，明胶在37°C温度之下从固态变成液态，从而可使连接在明胶表面的外泌体完整解离，后续通过液体对管道进行冲洗，脱落的外泌体就会从右边出口流出被收集到，通过使用物理尺寸及外泌体表面标记物相结合的分离方法能够获得高纯度无损伤的完整外泌体。

技术研发人员：叶永清,黄能平,王力,左鹏举,仇宇光
受保护的技术使用者：北京三一造血技术有限公司
技术研发日：20221016
技术公布日：2024/1/12