适用于人脐带间充质干细胞原代分离培养的组织培养皿的制作方法

本技术涉及医用组织培养皿领域，尤其涉及一种适用于人脐带间充质干细胞原代分离培养的组织培养皿。

背景技术：

1、间充质干细胞(mesenchymal stem cells，mscs)是一类具有自我复制和多向分化(成脂、成骨、成软骨等)潜能的多能性干细胞，是组织工程和再生医学中重要来源的种子细胞；mscs来源多样，如骨髓、脂肪、脐带、胎盘、羊膜等；人脐带间充质干细胞(humanumbilical cord mesenchymal stem cells，ucmscs)来源于围产期脐带组织，因其低免疫原性、易分离获取、细胞产量高、少伦理争议、无创伤采集等优势，并且具有分化为终末细胞、免疫调节、旁分泌作用、抗炎作用、抗纤维化作用和调节非编码rna等功能，成为mscs中更受青睐的细胞；已广泛应用于退行性、呼吸系统、内分泌系统、免疫系统等多种疾病的临床研究。

2、人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells，ucmscs)原代分离培养中常用酶消化法和组织块培养法，组织块培养法因为操作简单，无异源物质引入，细胞损伤小，原代细胞纯度高等优势逐渐成为分离原代细胞的常用方法；组织块培养法是在无菌条件下，将脐带华通氏胶组织剥去静脉、动脉及表皮，并切成3mm大小的组织块，接种于培养器皿，加入人间充质干细胞完全培养基，置于二氧化碳培养箱内静置培养；在原代分离培养时，需要将组织块贴至培养器皿底部，不移动，无漂浮，才能保证原代细胞从组织块周围爬出，因此原代分离细胞的效率很大程度依赖于组织块贴壁效率。

3、组织培养过程中会涉及补液、换液、显微镜观察等常规细胞培养操作，频繁操作会导致组织块脱落，漂浮在培养液中，进而导致原代细胞分离效率低和组织浪费；目前常规使用的培养器皿及高吸附培养器皿可促进细胞贴壁，但对组织块贴壁没有好的效果。

技术实现思路

1、为了解决人脐带间充质干细胞原代分离培养中组织块脱落漂浮的问题，本实用新型提供一种新型的人脐带间充质干细胞原代分离培养的组织培养皿，便于加液、补液、换液、显微镜观察等操作，提高组织块贴壁效率，增加原代细胞产量，减少人为因素导致的组织浪费。

2、为实现上述技术目的，本实用新型采用的技术方案如下：

3、本实用新型提供一种适用于人脐带间充质干细胞原代分离培养的组织培养皿，包括培养皿盖、镂空设计的组织块压盖、培养皿体；

4、所述组织块压盖边缘对称设置第一卡扣、第二卡扣；

5、所述培养皿体环形壁底部对称设置第一卡槽和第二卡槽，第一卡槽和第二卡槽分别与组织块压盖边缘对称的第一卡扣、第二卡扣卡合；培养皿体底部平行设置多个圆弧凹槽。

6、在一些实施例中，组织块压盖采用镂空的“十”字设计，在固定组织块的同时可减少与组织块过多接触，不会影响培养基对组织块的浸润。

7、本实用新型的有益效果在于：

8、减少了组织块贴壁培养中因补液、换液、显微镜观察等频繁移动造成的组织块脱落漂浮，同时可完全将组织块浸润在培养基中，不会因为添加培养液过多造成组织块漂浮，可方便补液、换液等操作，培养皿体底部的圆弧凹槽设计增加了组织块与培养皿体底部接触面积，可增加原代分离效率，减少组织浪费，提高原代细胞产量。

技术特征：

1.一种适用于人脐带间充质干细胞原代分离培养的组织培养皿，其特征在于，包括培养皿盖、镂空设计的组织块压盖、培养皿体；

2.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述组织块压盖采用镂空的“十”字设计。

3.如权利要求2所述的组织培养皿，其特征在于，所述组织块压盖“十”字中心正对所述培养皿体底部圆弧凹槽的圆心。

4.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述培养皿体底部圆弧凹槽直径为3mm，圆弧凹槽间距为5mm。

5.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述第一卡扣、第二卡扣，通过微小角度旋转分别与所述的第一卡槽、第二卡槽卡合。

6.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述培养皿盖、培养皿体采用透明的有机玻璃定制而成。

7.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述组织块压盖采用透明的塑料材质定制而成。

8.如权利要求7所述的组织培养皿，其特征在于，所述塑料材质采用聚乙烯材料。

9.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述培养皿体的底面直径和环形壁面高度的比例范围为1:1至30:1。

10.如权利要求1所述的组织培养皿，其特征在于，所述培养皿体底部凹槽圆弧的深度为1mm。

技术总结
本技术公开了一种适用于人脐带间充质干细胞原代分离培养的组织培养皿，包括培养皿盖、镂空设计的组织块压盖、培养皿体；所述组织块压盖边缘对称设置第一卡扣、第二卡扣；所述培养皿体环形壁底部对称设置第一卡槽卡和第二卡槽，第一卡槽和第二卡槽分别与组织块压盖边缘对称的第一卡扣、第二卡扣卡合；所述培养皿体底部平行设置多个圆弧凹槽；本技术减少了组织块贴壁培养中因频繁移动造成的组织块脱落漂浮，培养皿体底部的圆弧凹槽设计增加了组织块与培养皿体底部接触面积，可增加原代分离效率，减少组织浪费，提高原代细胞产量。

技术研发人员：邢来田,于娜,冯军超,邵石丽,邹姣蕊,杨冬霞,王彩人,孟震晓,郜玉霞
受保护的技术使用者：山东新创生物科技有限公司
技术研发日：20221230
技术公布日：2024/1/13