用于破坏EAG2与KVß2相互作用的重组多肽和其在癌症治疗中的治疗应用的制作方法

本公开大体上涉及用于破坏蛋白质-蛋白质相互作用的多肽。更具体地，本公开涉及用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的重组多肽。

背景技术：

1、胶质母细胞瘤(gbm)是最常见的侵袭性原发性脑癌。标准护理包括手术、放射和使用dna烷基化剂替莫唑胺(temozolomide，tmz)的化疗，并且患者的中位存活期约为15个月。由于tmz诱导dna损伤以促进gbm细胞死亡，其在非肿瘤细胞中引起严重的副作用，导致神经、胃肠和血液学毒性。此外，tmz改变肿瘤细胞基因组，这促进治疗抗性克隆的出现和最终的治疗失败。自1999年美国食品和药物管理局(fda)批准tmz用于治疗难治性间变性星形细胞瘤和20051年批准用于治疗新诊断的gbm以来，其他分子目标的临床试验尚未作为批准药物进入临床。这些要点突出了鉴别gbm和相关癌症中的非常规分子目标的必要性。

2、因此，需要提供用于gbm和相关癌症的额外治疗目标和治疗剂。

技术实现思路

1、本公开的目的是消除或减轻先前的至少一个缺点。

2、在一个方面，提供一种重组多肽，其包含a)用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的多肽，其包含i)来自人类kvβ2的区域的至少5个连续氨基酸，所述区域选自由以下组成的组：其氨基酸1到67，其氨基酸90到114，和其氨基酸343到355，或ii)与i)至少70％一致的多肽；和b)细胞穿透肽。

3、在一个方面，提供一种重组多肽，其包含：a)用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的多肽，所述多肽包含：i)人类kvβ2的至少涵盖其氨基酸90到114的连续部分，或ii)与i)至少70％一致的多肽；和b)细胞穿透肽。

4、在一个方面，提供基于本文所述的重组多肽之一的逆转-反向多肽。

5、在一个方面，提供一种编码本文所述的重组多肽的核酸。

6、在一个方面，提供一种包含本文所述的核酸的载体。

7、在一个方面，提供一种包含本文所述的核酸或本文所述的载体的宿主细胞。

8、在一个方面，提供一种组合物，其包含本文所述的重组多肽、本文所述的核酸或本文所述的载体；以及赋形剂、稀释剂或载剂。

9、在一个方面，提供一种药物组合物，其包含本文所述的重组多肽、本文所述的核酸或本文所述的载体；以及药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂。

10、在一个方面，提供一种防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用的方法，其包含：使细胞与本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物接触。

11、在一个方面，提供一种本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物的用途，用于防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用。

12、在一个方面，提供一种本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物的用途，其用于制备用于防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用的药剂。

13、在一个方面，提供本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物，其用于防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用。

14、在一个方面，提供一种治疗个体的癌症的方法，其包含：向所述个体施用本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物。

15、在一个方面，提供一种本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物的用途，其用于治疗个体的癌症。

16、在一个方面，提供一种本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物的用途，其用于制备用于治疗个体的癌症的药剂。

17、在一个方面，提供本文所述的重组多肽、本文所述的核酸、本文所述的载体或本文所述的药物组合物，其用于治疗个体的癌症。

18、在一个方面，提供一种筛选癌症的候选治疗剂的方法，其包含：使人类细胞与测试化合物接触，其中所述人类细胞具有eag2与kvβ2之间的原始相互作用水平，在所述接触步骤之后测量eag2与kvβ2之间的相互作用水平，以及如果eag2与kvβ2之间的所测量的相互作用水平与原始水平相比降低，那么将所述测试化合物识别为癌症的候选治疗剂。

19、所属领域的技术人员在结合附图查阅了特定实施例的以下描述后，将容易理解本公开的其它方面和特征。

技术特征：

1.一种重组多肽，其包含：

2.一种重组多肽，其包含：

3.一种重组多肽，其包含：

4.根据权利要求2或3所述的重组多肽，其中a)用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽如a)ii)中所定义。

5.根据权利要求4所述的重组多肽，其中用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽与i)的所述多肽至少80％一致。

6.根据权利要求4所述的重组多肽，其中用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的多肽与i)的所述多肽至少90％一致。

7.根据权利要求2或3所述的重组多肽，其中a)用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽如a)i)中所定义。

8.根据权利要求2或3所述的重组多肽，其中用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽包含人类kvβ2(seq id no:1)的氨基酸90到114。

9.根据权利要求2或3所述的重组多肽，其中用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽由人类kvβ2(seq id no:1)的氨基酸90到114组成。

10.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的重组多肽，其中所述细胞穿透肽与用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽由氨基酸接头间隔开。

11.根据权利要求10所述的重组多肽，其中所述氨基酸接头包含氨基酸gsgsgs(seq idno:16)。

12.根据权利要求1到11中任一权利要求所述的重组多肽，其中所述细胞穿透肽选自由以下组成的群组：

13.根据权利要求1到12中任一权利要求所述的重组多肽，其中所述细胞穿透肽相对于用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽的n端定位。

14.根据权利要求1到11中任一权利要求所述的重组多肽，其中所述细胞穿透肽包含hiv tat(seq id no:5)，其相对于用于防止或减少eag2与kvβ2之间的相互作用的所述多肽的n端定位。

15.一种重组多肽，其包含具有seq id no:17的氨基酸。

16.一种重组多肽，其包含具有seq id no:18的氨基酸。

17.一种逆转-反向多肽，其包含与根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽的氨基酸呈反向顺序的d-氨基酸。

18.根据权利要求17所述的逆转-反向多肽，其中所述d-氨基酸包含seq id no:22的氨基酸位置1到25的序列。

19.根据权利要求17所述的逆转-反向多肽，其中所述d-氨基酸包含seq id no:22的序列。

20.一种核酸，其编码根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽。

21.一种载体，其包含根据权利要求20所定义的核酸。

22.一种宿主细胞，其包含根据权利要求20所定义的核酸或根据权利要求21所定义的载体。

23.一种药物组合物，其包含根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求1920所定义的核酸或根据权利要求21所定义的载体；以及药学上可接受的赋形剂、稀释剂或载剂。

24.一种防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用的方法，其包含：

25.一种根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求20所定义的核酸、根据权利要求21所定义的载体或根据权利要求23所定义的药物组合物的用途，其用于防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用。

26.一种根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求20所定义的核酸、根据权利要求21所定义的载体或根据权利要求23所定义的药物组合物的用途，其用以制备用于防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用的药剂。

27.根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求20所定义的核酸、根据权利要求21所定义的载体或根据权利要求23所定义的药物组合物，其用于防止或减少细胞中eag2与kvβ2的相互作用。

28.一种治疗个体的癌症的方法，其包含：

29.一种根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求20所定义的核酸、根据权利要求21所定义的载体或根据权利要求23所定义的药物组合物的用途，其用于治疗个体的癌症。

30.一种根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求20所定义的核酸、根据权利要求21所定义的载体或根据权利要求23所定义的药物组合物的用途，其用以制备用于治疗个体的癌症的药剂。

31.根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽、根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向多肽、根据权利要求20所定义的核酸、根据权利要求21所定义的载体或根据权利要求23所定义的药物组合物，其用于治疗个体的癌症。

32.根据权利要求28所述的方法或根据权利要求29到31中任一权利要求所述的用途，其中所述癌症为神经胶质瘤或髓母细胞瘤。

33.根据权利要求32所述的方法或用途，其中所述癌症为神经胶质瘤，优选地为胶质母细胞瘤(gbm)。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述gbm为idh野生型gbm。

35.根据权利要求33所述的方法，其中所述gbm为idh突变型gbm。

36.根据权利要求28到35中任一权利要求所述的方法或用途，其中所述癌症是放射抗性的、化疗抗性的、靶向疗法抗性的。

37.根据权利要求28到36中任一权利要求所述的方法或用途，其中所述癌症对替莫唑胺具有抗性。

38.根据权利要求28到37中任一权利要求所述的方法或用途，其中所述癌症为治疗后或复发性的。

39.一种筛选癌症的候选治疗剂的方法，其包含：

40.根据权利要求39所述的方法，其中所述癌症为神经胶质瘤或髓母细胞瘤。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述癌症为神经胶质瘤，优选地为胶质母细胞瘤(gbm)。

42.根据权利要求41所述的方法，其中所述gbm为idh野生型gbm。

43.根据权利要求41所述的方法，其中所述gbm为idh突变型gbm。

44.根据权利要求39所述的方法，其中所述人类细胞来自细胞系。

45.根据权利要求39到44中任一权利要求所述的方法，其中所述测试化合物包含多肽。

46.根据权利要求45所述的方法，其中所述多肽包含人类kvβ2(seq id no:26)或eag2(seq id no:24)的片段。

47.根据权利要求39到46中任一权利要求所述的方法，其中将所述候选治疗剂与包含根据权利要求1到16中任一权利要求所定义的重组多肽或根据权利要求17到19中任一权利要求所定义的逆转-反向重组多肽的对照物进行比较。

技术总结
本文提供一种重组多肽，其包含用于防止或减少人类蛋白EAG2与Kvβ2之间的相互作用的多肽和细胞穿透肽。所述多肽可包含来自或涵盖对于两种蛋白质之间的相互作用重要的区域的Kvβ2的一部分，例如人类Kvβ2(SEQ ID NO:26)的至少涵盖其氨基酸90到114的连续部分。还描述基于此类重组多肽的逆转‑反向多肽。EAG2‑Kvβ2复合物在本文中被识别为某些癌症的治疗目标。本文还公开重组多肽在治疗此类癌症中的治疗应用，所述癌症包括可能是复发性的和/或对常规治疗具有抗性的神经胶质瘤，例如低级神经胶质瘤或胶质母细胞瘤。

技术研发人员：黄熹,董唯范
受保护的技术使用者：病童医院
技术研发日：
技术公布日：2024/7/15