新型启动子的制作方法

本发明涉及新型启动子。

背景技术：

1、在利用微生物进行的物质的工业生产中，提高目标物质的生产率是重要的课题之一。目前，进行这用于提高利用微生物的物质生产率的生物工程的研究。其中之一是关于高活性启动子的研究。专利文献1中，作为在棒状杆菌属菌中发挥功能的高活性的启动子，公开了延伸因子tu的启动子。

2、专利文献2中，公开了对来自埃希氏属菌、棒状杆菌属菌的各种启动子序列进行了分析，由此合成在棒状杆菌属菌中作为高活性的启动子发挥功能的spl1、spl7、spl13的启动子。

3、(专利文献1)日本特开2008-212155号公报

4、(专利文献2)日本特表2019-528075号公报

技术实现思路

1、在一个方式中，本发明提供一种dna，其由选自下述(a)～(c)的核苷酸序列构成，并且具有启动子活性：

2、(a)编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列；

3、(b)与编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列具有至少90％的同一性的核苷酸序列；和

4、(c)对编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列缺失、取代、添加、或插入1个或数个核苷酸而成的核苷酸序列，

5、mx1x2x3fx1ix4qx5ifx1gx6x1x1lx7x1sx8x1x1gaqx9vfx10x1x11x1x1x12ss

6、(其中，x1为任意的氨基酸残基，x2为s或a，x3为v或i，x4为f或i，x5为s或a，x6为v或i，x7为v或i，x8为v或i，x9为g或n，x10为d或t，x11为i或v，x12为a或f)。

7、在另外的一个方式中，本发明提供一种启动子，其由选自下述(g)～(i)的dna构成：

8、(g)由编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列构成的dna；

9、(h)由与编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列具有至少90％的同一性的核苷酸序列构成并且具有启动子活性的dna；和

10、(i)由对编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列缺失、取代、添加、或插入1个或数个核苷酸而成的核苷酸序列构成并且具有启动子活性的dna，

11、mx1x2x3fx1ix4qx5ifx1gx6x1x1lx7x1sx8x1x1gaqx9vfx10x1x11x1x1x12ss

12、(其中，x1为任意的氨基酸残基，x2为s或a，x3为v或i，x4为f或i，x5为s或a，x6为v或i，x7为v或i，x8为v或i，x9为g或n，x10为d或t，x11为i或v，x12为a或f)。

13、在另外的一个方式中，本发明提供一种表达载体，其包含上述dna或启动子。

14、在另外的一个方式中，本发明提供一种dna表达盒，其包含上述dna或启动子。

15、在另外的一个方式中，本发明提供一种棒状杆菌，其包含上述表达载体或上述dna表达盒。

16、在另外的一个方式中，本发明提供一种目标物质的制造方法，其包括：培养上述棒状杆菌的步骤；和

17、从通过该培养得到的培养物回收目标物质的步骤。

技术特征：

1.一种dna，其中，

2.如权利要求1所述的dna，其中，

3.如权利要求1或2所述的dna，其中，

4.如权利要求3所述的dna，其中，

5.一种启动子，其中，

6.如权利要求5所述的启动子，其中，

7.如权利要求5或6所述的启动子，其中，

8.如权利要求7所述的启动子，其中，

9.一种表达载体，其中，

10.如权利要求9所述的表达载体，其中，

11.一种dna表达盒，其中，

12.如权利要求11所述的dna表达盒，其中，

13.一种棒状杆菌，其中，

14.如权利要求13所述的棒状杆菌，其中，

15.一种目标物质的制造方法，其中，

技术总结
本发明提供高活性的启动子。一种DNA，其中，由选自下述(a)～(c)的核苷酸序列构成，并且具有启动子活性：(a)编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列；(b)与编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列具有至少90％的同一性的核苷酸序列；和(c)对编码由下述氨基酸序列构成的多肽的基因的上游的核苷酸序列缺失、取代、添加、或插入1个或数个核苷酸而成的核苷酸序列，MX1X2X3FX1IX4QX5IFX1GX6X1X1LX7X1SX8X1X1GAQX9VFX10X1X11X1X1X12SS其中，X1为任意的氨基酸残基，X2为S或A，X3为V或I，X4为F或I，X5为S或A，X6为V或I，X7为V或I，X8为V或I，X9为G或N，X10为D或T，X11为I或V，X12为A或F。

技术研发人员：永井晖,长村达也,高桥史员
受保护的技术使用者：花王株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/7/25