一种贝莱斯芽孢杆菌B31及其应用

本发明属于生防微生物领域，具体涉及一种贝莱斯芽孢杆菌，还涉及利用该菌生产的微生物菌剂，以及它们的用途。

背景技术：

1、尖孢镰刀菌(fusarium oxysporum)是一种世界性分布的土传病原真菌，其寄主范围十分广泛，可引起瓜类、茄科、香蕉、棉、豆科及花卉等100多种植物枯萎病的发生，且多年连作还会导致逐年加重，给瓜类等经济作物生产造成巨大损失。

2、目前，生产上主要依赖土壤熏蒸、嫁接技术及化学药剂防治设施蔬菜的枯萎病。但是这些防治方法存在以下问题：(1)土壤熏蒸方法不仅破坏土壤微生物区系平衡，而且造成严重的土壤及生态环境污染。(2)利用嫁接技术来对西瓜及黄瓜枯萎病的防治虽有一定的效果，但直接影响果实的品质及口感，且该方法费时费力。(3)利用化学农药防治存在易产生抗药性和环境污染问题。而利用生防微生物对植物病害进行生物防治因具有防效高、药效持久期长、专化性强、不易产生抗药性和对环境友好等优点而受到越来越多的重视。

3、目前，用于防治尖孢镰刀菌引起的枯萎病的生防微生物主要有哈茨木霉等木霉类真菌(张河庆等.四川农业科技.2020(05):35-37)、以及多粘类芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌等芽孢杆菌类细菌，其对枯萎病的防效一般为60％-79％。由于在不同的生态环境和不同作物条件下，存在的尖孢镰刀菌的类型不同，因此，必须不断筛选能防治对应环境条件下的尖孢镰刀菌的菌株，才能有针对性地解决问题。芽孢杆菌是自然界环境中的优势菌种，由于能产生多种抑菌活性物质(李宝庆等.中国农业科学.2010,43(017)：3547-3554)，并且能形成耐逆、抗热的芽孢而利于产品的开发和货架期的延长，安全性评价良好，易于规模化生产，因此成为开发微生物杀菌剂的重要资源。

4、镰刀菌酸(5-丁基-2-吡啶甲酸)为尖孢镰刀菌分泌的非专化型毒素，可增加寄主植物细胞膜的通透性，降低寄主细胞内的线粒体活性氧含量，阻碍atp的合成，引起植物代谢紊乱，致使植物萎蔫死亡(张嘉城等.草业科学.2021,38(08):1513-1524)。同时镰刀菌酸能抑制多种微生物，包括有益微生物的生长和代谢(bacon c w等.journal of appliedmicrobiology.2006,100(1):185-194；raza w,et al.plant pathology.2015,64(5):1041-1052)。因此，植物根际大量存在的尖孢镰刀菌通过产生镰刀菌酸而抑制根际生防细菌(陈巧环等.中国实验方剂学杂志.2021,27(11):7)，尤其是芽孢杆菌的生长和定殖(郭庆港等.植物保护学报.2013,40(1):45-50)，从而降低生防菌的生防效果。因此，筛选既耐受镰刀菌酸，又对尖孢镰刀菌具有较强拮抗活性的芽孢杆菌，将有望成为防治作物枯萎病的生防细菌，进而用于防治尖孢镰刀菌引起的植物枯萎病的有效手段。

技术实现思路

1、为解决尖孢镰刀菌所引起的植物枯萎病问题，本发明目的在于提供一种贝莱斯芽孢杆菌b31。

2、本发明另一目的在于提供含有上述贝莱斯芽孢杆菌b31的微生物菌剂。

3、本发明第三目的在于提供上述贝莱斯芽孢杆菌b31及其菌剂的用途。

4、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案来实现。

5、本发明一种贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)菌株b31，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为cgmccno.24599。

6、本发明还提供了上述贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)菌株b31在防治番茄枯萎病、西瓜枯萎病或黄瓜枯萎病上的应用。

7、本发明还提供了一种微生物菌剂，所述微生物菌剂含有上述贝莱斯芽孢杆菌菌株b31。

8、本发明还提供了上述微生物菌剂在防治番茄枯萎病、西瓜枯萎病或黄瓜枯萎病上的应用。

9、所述番茄枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌番茄专化型(fusarium oxysporumf.sp.lycopersici snyder et hansen)。

10、所述西瓜枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌西瓜专化型(fusarium oxysporumf.sp.hiveum(e.f.smith)wollen)。

11、所述黄瓜枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌黄瓜专化型(fusarium oxysporum(schl.)f.sp cucumerinum owen)。

12、一种基因工程菌，所述基因工程菌的出发菌株为上述贝莱斯芽孢杆菌菌株b31，且所述的基因工程菌具有防治番茄枯萎病、西瓜枯萎病或黄瓜枯萎病的功能。

13、与现有技术相比，本发明所具有的有益技术效果：(1)防效高。对番茄枯萎病的防效为97.12％，对西瓜枯萎病的防效为92.09％，对黄瓜枯萎病的防效为87.53％。(2)防治谱广，对尖孢镰刀菌引起的番茄枯萎病、西瓜枯萎病、黄瓜等枯萎病都有较高的防效。(3)本发明菌株b31是经过80℃高温处理后筛选出来的菌株，其耐高温，能形成耐逆抗热的芽孢而利于产品的开发和货架期的延长。(4)本发明菌株专化性强，药效持久性好、不易产生抗药性且环境友好。

14、生物保藏：本发明贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)菌株b31是本发明人于2021年3月在河北邯郸肥乡县发病大棚的健康番茄植株及其土壤中采集的样品，并经过80℃水浴筛选获得的，已于2022年3月28日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；其保藏编号为cgmccno.24599。

技术特征：

1.一种贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)菌株b31，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为cgmcc no.24599。

2.权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌(bacillus velezensis)菌株b31在防治番茄枯萎病、西瓜枯萎病或黄瓜枯萎病上的应用。

3.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂含有权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株b31。

4.权利要求3所述的微生物菌剂在防治番茄枯萎病、西瓜枯萎病或黄瓜枯萎病上的应用。

5.根据权利要求2或4所述的应用，其特征在于，所述番茄枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌番茄专化型(fusarium oxysporum f.sp.lycopersici snyder et hansen)。

6.根据权利要求2或4所述的应用，其特征在于，所述西瓜枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌西瓜专化型(fusarium oxysporum f.sp.hiveum (e.f.smith)wollen)。

7.根据权利要求2或4所述的应用，其特征在于，所述黄瓜枯萎病的病原菌为尖孢镰刀菌黄瓜专化型(fusarium oxysporum(schl.)f.sp cucumerinum owen)。

8.一种基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌的出发菌株为权利要求1所述的贝莱斯芽孢杆菌菌株b31，且所述的基因工程菌具有防治番茄枯萎病、西瓜枯萎病或黄瓜枯萎病的功能。

技术总结
本发明公开了一种贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)菌株B31，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.24599。本发明还公开了含有B31的微生物菌剂，以及它们的用途。本发明菌株B31防效高。对番茄枯萎病等枯萎病的防效为87.53％‑97.12％；其次，防治谱广，对尖孢镰刀菌引起的番茄枯萎病、西瓜枯萎病、黄瓜等枯萎病都有较高的防效。此外，本发明菌株B31专化性强，药效持久性好、不易产生抗药性且环境友好。

技术研发人员：郭庆港,李世鑫,马平,董丽红,苏振贺,曲远航,李社增,鹿秀云,张晓云,赵卫松
受保护的技术使用者：河北省农林科学院植物保护研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12