一种基于亚铜配合物的抑制胰腺癌细胞材料

本发明通过简单的室温搅拌合成了一系列双齿膦配体和双齿氮配体的杂单核亚铜配合物，并在合成配合物的反应条件基础上，通过改变条件优化最佳产率，包括溶剂的种类和用量，反应温度、反应时间以及反应物的配比等。该亚铜配合物使用单晶衍射仪对其晶体结构进行了阐明，并对其药理性质进行了详细研究。该配合物作用于胰腺癌细胞时的抑制率测试表现出较好的细胞毒性。本发明的性质可用于癌症治疗等领域。

背景技术：

1、胰腺癌死亡率较高,胰腺癌目前仍然属于一种比较难治的恶性肿瘤、恶性程度较高。目前胰腺癌五年的总体生存率只有5％左右,也就是大多数胰腺癌患者会在五年之内死亡。不幸的是胰腺癌通常在晚期被诊断出来，手术切除可提高患者生存率，但只有15-20％的患者存在可手术切除的肿瘤，且术后长期生存率仍然较差。可悲的是，我们最好的化疗治疗只能平均改善8-16周的寿命。所以胰腺癌对抗转移一直是挑战。纳米颗粒(np)药物递送系统通过提高药物对肿瘤部位的靶向能力提高了化疗药物的疗效，同时还降低了局部和全身毒性的风险。这些努力可以促进早期诊断和常规筛查测试的发展，而我们的将亚铜配合物通过纳米颗粒进行递送将，这将可能大大提高胰腺癌患者的生存率和预后。

技术实现思路

1、本发明提供了一种新颖亚铜配合物的制备方法以及抑制胰腺癌细胞的应用。所述抑制胰腺癌细胞的应用，具体步骤如下：

2、使用标准mtt法测定体外细胞毒性。等待细胞长满，弃去细胞培养基上清液，用pbs洗几次，加入1ml胰酶消化，后加入2ml培养基终止消化，将miapaka细胞接种在96孔板中，使细胞浓度至每孔约8000个，加入100μl dmem+10％fbs培养基，放入含有5％co2、37℃恒温培养箱中培养24小时。待细胞约长至80％后，向每个孔中添加100μl浓度为400、200、100、50、5、0.5μmol/l的培养基，轻轻摇晃以致均匀，置于含有5％co2，37℃恒温培养箱中培养24小时。向每个孔中添加10μlmtt溶液(pbs缓冲液为5mg/ml)，在37℃下培养4-6小时。然每孔加入100μl sds溶液。酶标仪检测570-650nm处的吸光度，计算细胞生长的活力。以空白浓度为0的孔为对照，分别计算不同药物浓度作用于胰腺癌细胞时的细胞抑制率。配合物表现出较好的对胰腺癌细胞毒性，ic50值在0.6左右时加入0.6μmol的亚铜配合物胰腺癌细胞死亡率能达到50％。其中配合物1-4体外细胞毒性存在较小的差异。

3、本发明的有益效果：

4、(1)反应条件简单，不需要高温高压的反应条件，所用的原料价廉和易得，适合大规模的工业化应用。

5、(2)本发明通过简单的搅拌法，合成了一系列亚铜配合物，实现对胰腺癌细胞具有优良灭杀效果的应用。

技术特征：

1.一种具有抑制胰腺癌细胞的亚铜配合物，特征在于：所述亚铜配合物为四氟硼酸-[4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉]-[n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶]合铜(i)，结构式如complex 1所示；高氯酸-[4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉]-[n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶]合铜(i)，结构式如complex 2所示；三氟甲烷磺酸-[4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉]-[n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶]合铜(i)，结构式如complex 3所示；碘化[4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉]-[n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶]合铜(i)，结构式如complex 4所示。

2.如权利要求1所述的亚铜配合物complex 1的制备方法，将cu(bf4)2(1当量)、cu(1.5当量)溶于过量乙腈中并在室温下搅拌24小时，得到中间产物cu(ch3cn)4bf4。然后将cu(ch3cn)4bf4(1当量)、n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶(1当量)和4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉(1当量)的混合物溶解在体积比为1:1的ch2cl2和ch3oh中。在室温下继续搅拌6小时，得到澄清的溶液。几天后过滤收集后的清澈滤液开始形成黄色晶体。

3.如权利要求1所述的亚铜配合物complex 2的制备方法，将cu(clo4)2(1当量)、cu(1.5当量)溶于过量乙腈中并在室温下搅拌24小时，得到中间产物cu(ch3cn)4clo4。然后将cu(ch3cn)4clo4(1当量)、n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶(1当量)和4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉(1当量)的混合物溶解在体积比为1:1的ch2cl2和ch3oh中。在室温下继续搅拌6小时，得到澄清的溶液。几天后过滤收集后的清澈滤液开始形成黄色晶体。

4.如权利要求1所述的亚铜配合物complex 3的制备方法，将cu(cf3so3)2(1当量)、cu(1.5当量)溶于过量乙腈中并在室温下搅拌24小时，得到中间产物cu(ch3cn)4cf3so3。然后将cu(ch3cn)4cf3so3(1当量)、n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶(1当量)和4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉(1当量)的混合物溶解在体积比为1:1的ch2cl2和ch3oh中。在室温下继续搅拌6小时，得到澄清的溶液。几天后过滤收集后的清澈滤液开始形成黄色晶体。

5.如权利要求1所述的亚铜配合物complex 4的制备方法,将cui(1当量)、n,n-双(二苯基膦基甲基)-3-氨基吡啶(1当量)和4,7-二苯基-1,10-邻菲啰啉(1当量)的混合物溶解在体积比为1:1的ch2cl2和ch3oh中。在室温下继续搅拌6小时，得到澄清的溶液。几天后过滤收集后的清澈滤液开始形成黄色晶体。

6.权利要求1所述的亚铜配合物在抑制胰腺癌细胞时的应用。使用标准mtt法测定体外细胞毒性。等待细胞长满，弃去细胞培养基上清液，用pbs洗几次，加入1ml胰酶消化，后加入2ml培养基终止消化，将miapaka细胞接种在96孔板中，使细胞浓度至每孔约8000个，加入100μldmem+10％fbs培养基，放入含有5％co2、37℃恒温培养箱中培养24小时。待细胞约长至80％后，向每个孔中添加100μl浓度为400、200、100、50、5、0.5μmol/l的培养基，轻轻摇晃以致均匀，置于含有5％co2，37℃恒温培养箱中培养24小时。向每个孔中添加10μlmtt溶液(pbs缓冲液为5mg/ml)，在37℃下培养4-6小时。然每孔加入100μl sds溶液。

技术总结
本发明通过简单的室温搅拌合成了一系列双齿膦配体和双齿氮配体的杂单核亚铜配合物，并在合成配合物的反应条件基础上，通过改变条件优化最佳产率，包括溶剂的种类和用量，反应温度、反应时间以及反应物的配比等。该亚铜配合物使用单晶衍射仪对其晶体结构进行了阐明，并对其药理性质进行了详细研究。该配合物作用于胰腺癌细胞时的抑制率测试表现出较好的细胞毒性。本发明的性质可用于癌症治疗等领域。

技术研发人员：金琼花,高成杰,胡福振
受保护的技术使用者：首都师范大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11