一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基及其制备方法与流程

本发明属于乳酸菌发酵领域，具体涉及一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基及其制备方法。

背景技术：

1、魔芋飞粉是魔芋主要加工产品魔芋精粉的下脚料，占精粉质量的30％～40％。魔芋飞粉中碳水化合物含量约为50％，其中淀粉22.81％，水溶性糖8.95％，水溶性还原糖2.46％(水溶性糖分指葡萄糖和甘露糖)，纤维素1.67％，其淀粉含量与马铃薯(21.0％)和甘薯(26.4％)相当。魔芋飞粉中粗蛋白含量为15.21％，粗蛋白质含量高于玉米和水稻，与小麦和大麦相当，粗蛋白中至少有58.4％为蛋白质或氨基酸，氨基酸有16种，含有相当丰富的维生素、钙、镁、磷、锌、铁、锰等，还含有生物素等乳酸发酵所必须的营养因子，是一种宝贵的天然资源。

2、在实际乳酸发酵生产过程中，需通过添加氮源，碳源等物质来满足乳酸菌对各种生长因子的需求。玉米淀粉和酵母浸粉是常用的碳源及氮源，但由于用量大、价格高昂，以致于工业生产过程中成本过高。

3、目前关于乳酸菌培养基降低成本的研究中，大多以以廉价氮源或碳源进行混合复配的方式来降低成本，如专利一种乳酸菌培养基的制备方法(专利号cn107475158b)，采用复配马铃薯发酵液和玉米浆作为碳源；专利一种提高乳酸菌生物量及产酸量的方法(专利号cn105802881b)，采用复配蛋白胨和酵母膏作为氮源；专利乳酸菌培养基及其应用与乳酸菌的培养方法(专利号cn112175855b)，采用复配大米粉和糖蜜作为碳源。这些研究中培养基成分复杂，工业生产后期产物纯化困难，工业生产成本升高。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基及其制备方法，解决了现有技术中的技术问题。

2、本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

3、一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基，包括：魔芋飞粉蛋白液10-20g/l、魔芋飞粉糖解液200-250g/l、乙酸钠3g/l、吐温-80 1-2g/l、磷酸氢二钾1-2g/l以及蒸馏水。

4、进一步地，所述乳酸菌培养基的ph值为6.7。

5、一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基的制备方法，包括以下步骤；

6、s1，对魔芋飞粉进行酸洗一步法处理，去除魔芋飞粉中的抗营养因子，得到无抗营养因子的魔芋飞粉；

7、s2，通过酶解法提取魔芋飞粉淀粉；

8、s3，用α淀粉酶使魔芋飞粉淀粉糖化，得到魔芋飞粉糖解液；

9、s4，用碱溶酸沉法提取魔芋飞粉蛋白质；

10、s5，培养基按魔芋飞粉蛋白液10-20g/l、魔芋飞粉糖解液200-250g/l、乙酸钠3g/l、吐温-80 1-2g/l、磷酸氢二钾1-2g/l以及蒸馏水，并控制培养基ph为6.7，120℃条件下湿热灭菌20min。

11、进一步地，s1中，称取魔芋飞粉，加入ph为5的盐酸水溶液和5％的豆粕，100r/min搅拌10min，4000r/min离心30min，弃上清液后，重复1次，再用柠檬酸重复洗1次后，用清水洗1次，干燥后得到无抗营养因子的魔芋飞粉。

12、进一步地，s2中，称取魔芋飞粉，按1:45(g/ml)的料液比加水，50℃溶解1.5h，离心去上清后向沉淀中加水，调ph和温度至中性，加入5％中性蛋白酶，酶解后离心去上清，沉淀水洗2次，45℃烘箱中烘干即得魔芋淀粉。

13、进一步地，s3中，取魔芋淀粉溶于水中，置于沸水浴加热，使其糊化，冷却至60℃后调节ph3.5，加入cacl2，水浴保温10min，加入4％的α淀粉酶并搅拌，2h后将酶灭活，得到魔芋飞粉糖解液。

14、进一步地，s4中，魔芋飞粉中加蒸馏水搅拌均匀，并将ph调至8，在放入45℃的水浴锅中保温；之后离心收集上清液，用酸将上清液ph调至3.5，静置后离心，弃去上清液收集沉淀，对沉淀进行水洗，重复离心收集沉淀；最后将得到的蛋白质沉淀冷冻干燥，即得魔芋飞粉蛋白。

15、乳酸菌培养基在生产l-乳酸中的应用。

16、进一步地，所述乳酸均为鼠李糖乳杆菌或凝结芽孢杆菌。

17、本发明的有益效果：

18、1、配方简单，制作容易，原料价格低廉，不需要传统乳酸菌培养基中的牛肉浸膏、蛋白胨、酵母提取物，葡萄糖等价格高昂的原料，本发明培养基成本较传统培养基大幅降低。

19、2、本发明提供的培养基具有极佳的实用性，较传统乳酸菌培养基，菌液中菌体密度提高和产酸量显著提高，工业化生产成本显著降低。

20、3、本发明提供的培养基接近、达到甚至超过了传统培养基水平，可以很好的替代价格较高的传统培养基。

技术特征：

1.一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基，其特征在于，包括：魔芋飞粉蛋白液10-20g/l、魔芋飞粉糖解液200-250g/l、乙酸钠3g/l、吐温-80 1-2g/l、磷酸氢二钾1-2g/l以及蒸馏水。

2.根据权利要求1所述的一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基，其特征在于，所述乳酸菌培养基的ph值为6.7。

3.一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤；

4.根据权利要求31所述的一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基的制备方法，s1中，称取魔芋飞粉，加入ph为5的盐酸水溶液和5％的豆粕，100r/min搅拌10min，4000r/min离心30min，弃上清液后，重复1次，再用柠檬酸重复洗1次后，用清水洗1次，干燥后得到无抗营养因子的魔芋飞粉。

5.根据权利要求3所述的一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基的制备方法，s2中，称取魔芋飞粉，按1:45(g/ml)的料液比加水，50℃溶解1.5h，离心去上清后向沉淀中加水，调ph和温度至中性，加入5％中性蛋白酶，酶解后离心去上清，沉淀水洗2次，45℃烘箱中烘干即得魔芋淀粉。

6.根据权利要求3所述的一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基的制备方法，s3中，取魔芋淀粉溶于水中，置于沸水浴加热，使其糊化，冷却至60℃后调节ph3.5，加入cacl2，水浴保温10min，加入4％的α淀粉酶并搅拌，2h后将酶灭活，得到魔芋飞粉糖解液。

7.根据权利要求3所述的一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基的制备方法，s4中，魔芋飞粉中加蒸馏水搅拌均匀，并将ph调至8，在放入45℃的水浴锅中保温；之后离心收集上清液，用酸将上清液ph调至3.5，静置后离心，弃去上清液收集沉淀，对沉淀进行水洗，重复离心收集沉淀；最后将得到的蛋白质沉淀冷冻干燥，即得魔芋飞粉蛋白。

8.权利要求1-2任一项所述的乳酸菌培养基在生产l-乳酸中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述乳酸菌为鼠李糖乳杆菌或凝结芽孢杆菌。

技术总结
本发明公开一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基及其制备方法，属于乳酸菌发酵领域；一种以魔芋飞粉为原料的乳酸菌培养基包括：魔芋飞粉蛋白液10‑20g/L、魔芋飞粉糖解液200‑250g/L、乙酸钠3g/L、吐温‑801‑2g/L、磷酸氢二钾1‑2g/L以及蒸馏水；该乳酸菌培养基能够应用于制备L乳酸的制备，且相较于传统乳酸菌培养基，菌液中菌体密度提高和产酸量显著提高，工业化生产成本显著降低。

技术研发人员：颜静,李荣群,余莉花
受保护的技术使用者：普立思生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12