猴痘病毒A29小鼠单克隆包被抗体及检测抗体的制作方法

本发明涉及一种猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体及检测抗体，属于病毒检测。

背景技术：

1、猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体对，主要包括抗猴痘病毒a29蛋白小鼠单克隆包被抗体，猴痘病毒a29蛋白小鼠单克隆检测抗体以及重组表达的猴痘a29蛋白标准品(40891-v08e)。单克隆抗体采用重组猴痘a29蛋白免疫动物，利用beacon光导平台筛选，再通过蛋白a纯化和抗原亲和纯化技术制备获得。酶标抗体按照常规方法利用辣根过氧化物酶(hrp)标记。重组猴痘a29蛋白是经过hek293瞬转表达获得。

2、猴痘病毒(monkeypox virus，mpxv)是一种人畜共患的包膜双链dna病毒，属于痘病毒科的正痘病毒属。正痘病毒属还包括天花病毒、痘苗病毒和牛痘病毒。猴痘病毒有刚果盆地分支和西非分支两大分支。痘病毒存在两种形式：成熟病毒粒子(mv)，以及在mv外包裹一层胞膜的形态(ev)。mv包括一个含有双链dna的病毒核心组分、蛋白侧体以及外膜，外膜上含有20种病毒蛋白。mv非常稳定，被认为可以介导宿主之间的传播，而ev具有脆弱的外膜，介导同一宿主细胞间的传播。痘苗病毒(vacv)a27蛋白能与细胞表面上的硫酸乙酰肝素(heparan sulfate)作用，介导病毒跟细胞结合并催化细胞融合。a29蛋白与痘苗a27蛋白高度同源，是猴痘病毒细胞内成熟病毒(mv)表面包膜蛋白，用猴痘病毒制备的特异性单克隆抗体的抗原表位定位于a29蛋白上，因此a29蛋白是猴痘抗原及抗体检测的一个潜在靶点。

3、然而，由于目前社会对于猴痘病毒治病机制还在研究之中，以及基于猴痘病毒关键靶点抗原抗体的血清学和免疫学检测试剂的开发也十分稀缺，使得针对猴痘病毒的快速检测和及时发现猴痘感染病例面临严峻的挑战。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体和检测抗体，能够定性或定量检测样本中的猴痘病毒a29蛋白水平。

2、本发明采用的技术方案为：

3、一种猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体，其特征在于所述抗体包括：

4、重链，其包含由或基本上由seq id no：1所示的重链可变区cdr-h1，和由或基本上由seq id no：2所示的重链可变区cdr-h2，和由或基本上由seq id no：3所示的重链可变区cdr-h3，以及；

5、轻链，其包含由或基本上由seq id no：4所示的轻链可变区cdr-l1，和由或基本上由seq id no：5所示的轻链可变区cdr-l2，和由或基本上由seq id no：6所示的轻链可变区cdr-l3。

6、优选的，所述重链的氨基酸序列如seq id no：7所示，所述轻链的氨基酸序列如seq id no：8所示。

7、上述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体在制备检测猴痘的试剂中的应用。

8、本发明还公开了一种检测猴痘的试剂盒，包含上述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体。

9、本发明公开的猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体包括：

10、重链，其包含由或基本上由seq id no：9所示的重链可变区cdr-h1，和由或基本上由seq id no：10所示的重链可变区cdr-h2，和由或基本上由seq id no：11所示的重链可变区cdr-h3，以及；

11、轻链，其包含由或基本上由seq id no：12所示的轻链可变区cdr-l1，和由或基本上由seq id no：13所示的轻链可变区cdr-l2，和由或基本上由seq id no：14所示的轻链可变区cdr-l3。

12、优选的，所述重链的氨基酸序列如seq id no：15所示，所述轻链的氨基酸序列如seq id no：16所示。

13、上述的猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体在制备检测猴痘的试剂中的应用。

14、本发明还公开了一种检测猴痘的试剂盒，包含上述的猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体。

15、优选的，还包括上述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体。

16、本发明结合beacon光导平台，通过单b细胞筛选出猴痘a29免疫的小鼠单克隆抗体，开发出的包被抗体和检测抗体能够定性或定量检测样本中的猴痘病毒a29蛋白水平。该抗体对的开发可以有效缓解猴痘病毒免疫学检测试剂的短缺，具有广阔的市场应用前景和较大的经济和社会效益。

技术特征：

1.一种猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体，其特征在于所述抗体包括：

2.根据权利要求1所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体，其特征在于：

3.权利要求1或2所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体在制备检测猴痘的试剂中的应用。

4.一种检测猴痘的试剂盒，其特征在于包含权利要求1或2所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体。

5.一种猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体，其特征在于所述抗体包括：

6.根据权利要求5所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体，其特征在于：

7.权利要求5或6所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体在制备检测猴痘的试剂中的应用。

8.一种检测猴痘的试剂盒，其特征在于包含权利要求5或6所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆检测抗体。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于还包括权利要求1或2所述的猴痘病毒a29小鼠单克隆包被抗体。

技术总结
本发明公开了一种猴痘病毒A29小鼠单克隆包被抗体，包括：重链，其包含由或基本上由SEQ ID NO：1所示的重链可变区CDR‑H1，和由或基本上由SEQ ID NO：2所示的重链可变区CDR‑H2，和由或基本上由SEQ ID NO：3所示的重链可变区CDR‑H3，以及；轻链，其包含由或基本上由SEQ ID NO：4所示的轻链可变区CDR‑L1，和由或基本上由SEQ ID NO：5所示的轻链可变区CDR‑L2，和由或基本上由SEQ ID NO：6所示的轻链可变区CDR‑L3。还公开了猴痘病毒A29小鼠单克隆检测抗体及相应的试剂盒。本发明开发出的包被抗体和检测抗体能够定性或定量检测样本中的猴痘病毒A29蛋白水平。

技术研发人员：任为,李雁,孙月红,李春媛,王旭曼,王丽,张杰,张旭,樊慧,姜威,罗启倩
受保护的技术使用者：义翘神州（泰州）科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13