一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法与流程

本发明涉及植物中有效成分提取、纯化，具体涉及一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法。

背景技术：

1、沙棘(hippophae rhamnoides linn.)是一种药食两用的植物资源，其广泛种植于我国的西北地区。沙棘喜光，耐寒，耐酷热，耐风沙及干旱气候，对土壤适应性强，可在盐碱地环境中生存。沙棘叶通常近对生，类似纸质，其形状成狭披针形或矩圆状披针形，长度约33-85 mm，宽约4-13 mm。沙棘叶是沙棘重要的营养部位之一，研究沙棘叶中有效成分的提取、纯化工艺可提升沙棘的应用价值。

2、沙棘叶中存在多种生物活性物质，主要包括黄酮、多糖、维生素c及萜类成分等。药理研究表明沙棘叶具有抗氧化、抑菌、降糖、护肝等功效，沙棘叶提取物被广泛应用于畜禽饲料、医药和保健品等行业。

3、白坚木皮醇又叫白雀木醇，是沙棘叶中的有效活性成分。现代医学研究表明白坚木皮醇与沙棘叶提取物的降糖作用密切相关。目前，高纯度白坚木皮醇主要通过大孔树脂吸附纯化、膜分离、有机溶剂萃取、结晶、重结晶等方式获取，制备时间较长，生产效率较低，无法在短时间内获取较多的高纯度白坚木皮醇。

技术实现思路

1、本发明的目的就是针对目前行业内现有的制备白坚木皮醇的方法制备时间长，工艺繁琐，转移率低的问题，提供一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法。

2、本发明的一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，包括下述步骤：

3、（1）提取：将干燥后的沙棘叶粉碎并过筛，使用乙醇溶液溶解提取，收集提取液和滤渣，将提取液减压浓缩，得样品1；

4、（2）水沉：在样品1中加入纯净水，升温溶解，过滤，收集滤液；

5、（3）脱色：将滤液过ads-17型阴离子交换树脂柱，收集脱色后的上样流出液并进行减压干燥，得上样流出液干燥品，即为样品2；

6、（4）初步提纯：使用乙醇将样品2溶解于玻璃容器中，在低温下蒸发溶剂，收集玻璃容器内的干燥固体，得样品3；

7、（5）纯化：将样品3溶解过滤后倒入制备液相色谱仪中进行梯度洗脱，收集特定时间段流出的馏分并干燥，得白坚木皮醇晶体。

8、优选地，所述步骤（1）中，沙棘叶粉碎后过30-60目筛，乙醇溶液质量分数为60-95%，沙棘叶与乙醇溶液的质量体积比=1-2：6-15，提取次数为1-3次，每次提取时间为1-4h，提取温度为10-60℃。

9、优选地，所述步骤（1）中，提取液减压浓缩至原体积的1/5-1/4，即为样品1。

10、优选地，所述步骤（2）中，样品1与纯净水的体积比为1：2-5，溶解温度为30-90℃。

11、优选地，所述步骤（3）中，ads-17型阴离子交换树脂与滤液的质量体积比为1：2-6，减压干燥的压力为-0.08- -0.1mpa，温度为10-60℃。

12、优选地，所述步骤（4）中，乙醇溶液的质量分数为60-80%，样品2与乙醇溶液的质量体积比为1：1-5，溶剂蒸发温度为20-50℃。

13、优选地，所述步骤（5）中，溶解样品3所用的溶剂为纯水或乙腈，样品3与溶剂的质量体积比为1：2-4。

14、优选地，所述步骤（5）中，制备液相色谱仪所用流动相为乙腈-水，洗脱流速为10-30ml/min，检测波长为245nm。

15、进一步地，所述步骤（5）中，流动相洗脱梯度如下：

16、

17、收集馏分的特定时间段为1.5-4.0min。

18、优选地，所述步骤（5）中，收集到的馏分经干燥后为高纯度白坚木皮醇晶体，其纯度≥99.5%。

19、本发明产生的有益效果是：

20、1.工艺操作简单易行，生产周期短：高纯度白坚木皮醇常规提取、纯化工艺，提取后除杂、脱蛋白、有机溶剂萃取除黄酮、过膜初步纯化、结晶、重结晶，尤其是结晶和重结晶占用大量时间，严重拖慢生产进度，本发明直接进行简单的水沉、树脂脱色、低温蒸发溶剂提纯后上制备液相进行分离纯化就能得到高纯度白坚木皮醇，大大缩短了制备周期。同时制备液相流动相仅使用单一有机溶剂乙腈，具有节约成本、干燥效率高等优势。

21、2.转移率高：常规制备高纯度白坚木皮醇的工艺，需要使用脱蛋白、有机溶剂萃取、大孔树脂纯化、膜纯化、结晶和重结晶等操作，大孔树脂纯化在使用有机溶剂洗脱时树脂会吸附白坚木皮醇，导致转移率偏低；膜纯化会由于顶洗不完全造成转移率严重下降；结晶和重结晶的母液中残留大量白坚木皮醇无法再次利用，导致转移率较低；本发明水沉、树脂脱色和低温蒸发溶剂初步提纯几乎不会降低白坚木皮醇转移率，同时制备液相纯化过程转移率较高。因此，本发明白坚木皮醇转移率远远高于常规方法。

22、3.产品纯度高：本发明方法制备获得的高纯度白坚木皮醇，纯度均高于99.5%。

技术特征：

1.一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于包括下述步骤：

2.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，沙棘叶粉碎后过30-60目筛，乙醇溶液质量分数为60-95%，沙棘叶与乙醇溶液的质量体积比=1-2：6-15，提取次数为1-3次，每次提取时间为1-4 h，提取温度为10-60℃。

3.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（1）中，提取液减压浓缩至原体积的1/5-1/4，即为样品1。

4.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（2）中，样品1与纯净水的体积比为1：2-5，溶解温度为30-90℃。

5.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，ads-17型阴离子交换树脂与滤液的质量体积比为1：2-6，减压干燥的压力为-0.08- -0.1mpa，温度为10-60℃。

6.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（4）中，乙醇溶液的质量分数为60-80%，样品2与乙醇溶液的质量体积比为1：1-5，溶剂蒸发温度为20-50℃。

7.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（5）中，溶解样品3所用的溶剂为纯水或乙腈，样品3与溶剂的质量体积比为1：2-4。

8.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（5）中，制备液相色谱仪所用流动相为乙腈-水，洗脱流速为10-30ml/min，检测波长为245nm。

9.根据权利要求1所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（5）中，流动相洗脱梯度如下：

10.根据权利要求1或9所述一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，其特征在于：所述步骤（5）中，收集到的馏分经干燥后为高纯度白坚木皮醇晶体，其纯度≥99.5%。

技术总结
本发明公开了一种从沙棘叶中提取高纯度白坚木皮醇的方法，包括下述步骤：（1）提取：将干燥后的沙棘叶粉碎并过筛，乙醇提取，收集提取液和滤渣，提取液减压浓缩，得样品1；（2）水沉：在样品1中加入纯净水，升温溶解，过滤，收集滤液；（3）脱色：将滤液过ADS‑17型阴离子交换树脂柱，收集脱色后的上样流出液并进行减压干燥，得样品2；（4）初步提纯：使用乙醇将样品2溶解，在低温下蒸发溶剂，收集干燥固体，得样品3；（5）纯化：将样品3溶解过滤后倒入制备液相色谱仪中进行梯度洗脱，收集特定时间段流出的馏分并干燥，得白坚木皮醇晶体；本发明方法简单易行，利用制备液相色谱仪收集特定时间段馏分，即可获得纯度≥99.5%的白坚木皮醇。

技术研发人员：陈阳,徐剑,周俊强,王喆,潘凯进,廖子蔚,李韦琴,石万银,向诗银,巫岳,唐万
受保护的技术使用者：劲牌有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13