一种红枣蛋白的酶切产物及其制备方法和应用

本发明涉及食品医药，具体涉及同时一种红枣蛋白的酶切产物及其制备方法和应用。

背景技术：

1、由于现在社会人们的生活频率较快，生活不规律，加之运动较少，从而容易引起人体血脂和血糖的升高，导致高血压和糖尿病的发病率增高，这两种病已成为当今社会常见的两种疾病，而且国外有关资料显示，糖尿病病人中高血压患病率为40％～80％；我国的报道低于国外，为25％～48.1％。在发病期间，患者需要经常服用一些辅助降压和降血糖药物，目前常用的是西药，但这些药物往往会产生不同程度的毒副作用，尤其对肾功能影响很大，且疗效短。所以，从食品中提取天然且安全的降压和降糖药物具有重要的意义，而能够同时具有降压和降糖两种功能的食品原料将拥有更广阔的应用市场。

2、生物活性肽是具有多种人体代谢和生理调节功能的肽类总称，易消化吸收，食用安全性极高，已成为当前食品医药的热门的研究课题。食源性生物活性肽的种类较多，包括血管紧张素转化酶(angiotension converting enzyme，ace)抑制肽、二肽基肽酶iv(dipeptidylpeptidase 4，dppiv)抑制肽、免疫调节肽、抗氧化肽、抗菌肽、抗血栓肽、促钙吸收肽等，其中ace抑制肽与高血压疾病，dppiv抑制肽与高血糖疾病的预防和治疗关系紧密。

3、红枣是东方传统名药，富含蛋白质(干重3～7％)、碳水化合物(包括干重2-9％的纤维多糖)、维生素(尤其是维生素b和c)和重要矿物质(如锰、铁、磷、钾、镁、钙、锌等)等营养成分。据报道，红枣多糖具有多种的活性，如免疫调节、抗氧化剂、抗炎。红枣提取物具有抗过敏活性，抑制食源性致病菌，调节纤溶酶活性，抗氧化活性，抗菌活性。然而，关于红枣蛋白及其水解物的利用报道较少，且对红枣蛋白其他功能的研究较为缺乏。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是提供一种同时具有ace和dppiv抑制作用的红枣蛋白的酶切产物及其制备方法和应用，本发明的红枣蛋白的酶切产物同时具有辅助降血压和降血糖作用，可用于制备辅助降血压和降血糖功能的功能性食品或保健食品，特别适合于糖尿病伴随高血压患者，具有较好的市场应用前景。

2、本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

3、一种红枣蛋白的酶切产物，该酶切产物含有ace抑制肽和dppiv抑制肽。

4、一种红枣蛋白的酶切产物，所述的ace抑制肽的氨基酸序列为arg-leu-pro-his-val或thr-val-lys-pro-gly-leu或lys-ala-leu-val-ala-pro。

5、一种红枣蛋白的酶切产物，所述的dppiv抑制肽的氨基酸序列为tyr-leu-his-leu或ile-pro-ile-tyr或lys-ala-leu-val-ala-pro。

6、一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法，在红枣蛋白中按质量百分比为0.3-2％(w/w)的加入蛋白酶，在37℃条件下酶解2-3h，冻干，得到红枣蛋白的酶切产物，其中，所述的蛋白酶的种类可选择质量比为1:1的胰蛋白酶:胃蛋白酶；或质量比为1:1的木瓜蛋白酶:菠萝蛋白酶；或木瓜蛋白酶；或菠萝蛋白酶。

7、一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法，将红枣蛋白经过胃肠道进行酶切后得到红枣蛋白的酶切产物。

8、一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法，所述的红枣蛋白是通过以下方法制备的：

9、(1)称取红枣，按照料液比为1：5-10倍加入蒸馏水，110℃-121℃、设定压力值为20-100kpa的高压条件下，煮制10-15分钟，去皮，去核，匀浆，得到高压红枣汁；

10、(2)取步骤(1)制备得到的高压红枣汁，在温度55℃-65℃、ph4.5～5.5条件下，加入纤维素酶和半纤维素酶进行混合酶解，其中纤维素酶和半纤维素酶的量都为红枣质量百分比0.1％，酶解的时间为3-6h，灭酶，冷却后在温度50℃-60℃、ph3.0～4.0条件下，加入红枣质量百分比0.1％的果胶酶进行酶解，酶解的时间为3-6h，灭酶，冷却，得到红枣蛋白酶解液；

11、(3)取步骤(2)制备得到的红枣蛋白酶解液，离心、沉淀，取沉淀物于500da的透析袋中透析，冷冻干燥，得到所述的红枣蛋白。

12、一种红枣蛋白的酶切产物在制备辅助降血压保健品和辅助降血压药物中的应用。

13、一种红枣蛋白的酶切产物在制备辅助降血糖保健品和辅助降血糖药物中的应用。。

14、与现有技术相比，本发明的优点在于：

15、本发明对红枣蛋白组分的提取工艺进行了优化，对含量较高的红枣蛋白进行了模拟酶切，发现得到的红枣蛋白酶切产物同时具有ace和dppiv抑制作用，同时通过体内外实验分别验证了红枣蛋白酶切产物同时具有ace和dppiv双靶点抑制作用，红枣蛋白酶切产物的ace ic50为0.34-0.58mg/ml,dppvic50为1.83-3.22mg/ml，活性高，相比于目前大部分的只有一种ace抑制功能或者dppiv抑制功能的酶切产物，本发明的酶切产物可以同时发挥辅助降血压和降血糖作用，在用于制备辅助降血压和降血糖功能的功能性食品或保健食品上具有较大的优势，特别适合于糖尿病伴随高血压患者，具有较好的市场应用前景。

16、本发明通过搜集目前已经报道的ace肽段和dppiv组成数据集和训练集，创建3d-qsar模型，并用3d-qsar模型预测得到具有ace和dppiv抑制活性的肽段，合成ace和dppiv抑制肽段并进行验证，获得具有ace活性抑制肽段序列为arg-leu-pro-his-val、thr-val-lys-pro-gly-leu、lys-ala-leu-val-ala-pro，ic50值分别为6.01um、3.81um、17.06um；dppiv活性抑制肽段序列为tyr-leu-his-leu、ile-pro-ile-tyr、lys-ala-leu-val-ala-pro，ic50值分别为381um、43.5um、360um；得到的ace抑制肽段和dppiv肽结构新颖，活性较强，且安全性高。

技术特征：

1.一种红枣蛋白的酶切产物，其特征在于，该酶切产物含有ace抑制肽和dppiv抑制肽。

2.根据权利要求1所述的一种红枣蛋白的酶切产物，其特征在于，所述的ace抑制肽的氨基酸序列为arg-leu-pro-his-val或thr-val-lys-pro-gly-leu或lys-ala-leu-val-ala-pro。

3.根据权利要求1所述的一种红枣蛋白的酶切产物，其特征在于，所述的dppiv抑制肽的氨基酸序列为tyr-leu-his-leu或ile-pro-ile-tyr或lys-ala-leu-val-ala-pro。

4.权利要求1或2或3所述的一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法，其特征在于，在红枣蛋白中按质量百分比为0.3-2％(w/w)的加入蛋白酶，在37℃条件下酶解2-3h，冻干，得到红枣蛋白的酶切产物，其中，所述的蛋白酶的种类可选择质量比为1:1的胰蛋白酶:胃蛋白酶；或质量比为1:1的木瓜蛋白酶:菠萝蛋白酶；或木瓜蛋白酶；或菠萝蛋白酶。

5.权利要求1或2或3所述的一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法，其特征在于，将红枣蛋白经过胃肠道进行酶切后得到红枣蛋白的酶切产物。

6.如权利要求4或5所述的一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法，其特征在于，所述的红枣蛋白是通过以下方法制备的：

7.权利要求1或2或3所述的红枣蛋白的酶切产物在制备辅助降血压保健品和辅助降血压药物中的应用。

8.权利要求1或2或3所述的红枣蛋白的酶切产物在制备辅助降血糖保健品和辅助降血糖药物中的应用。

技术总结
本发明公开了一种红枣蛋白的酶切产物，该酶切产物含有ACE抑制肽和DPPIV抑制肽；其中ACE抑制肽的氨基酸序列为Arg‑Leu‑Pro‑His‑Val或Thr‑Val‑Lys‑Pro‑Gly‑Leu或Lys‑Ala‑Leu‑Val‑Ala‑Pro；DPPIV抑制肽的氨基酸序列为Tyr‑Leu‑His‑Leu或Ile‑Pro‑Ile‑Tyr或Lys‑Ala‑Leu‑Val‑Ala‑Pro。本发明还公开了一种红枣蛋白的酶切产物的制备方法及其应用，在红枣蛋白中按质量百分比为0.3‑2％(w/w)的加入蛋白酶，在37℃条件下酶解2‑3h，冻干，得到红枣蛋白的酶切产物；或将红枣蛋白经过胃肠道进行酶切后得到红枣蛋白的酶切产物。本发明的红枣蛋白的酶切产物同时具有辅助降血压和降血糖作用，可用于制备辅助降血压和降血糖功能的功能性食品或保健食品，特别适合于糖尿病伴随高血压患者，具有较好的市场应用前景。

技术研发人员：赵玉芬,高新昌,王宁,李龙
受保护的技术使用者：宁波大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12