一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽及其制备方法与流程

本发明涉及保健品，尤其涉及一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽及其制备方法。

背景技术：

1、豌豆属于豆科，是一年生攀援草本，高0.5-2米。原产于数千年前的亚洲西部、地中海地区，是世界重要的栽培作物之一。种子及嫩荚、嫩苗均可食用；种子含淀粉、油脂，可作药用，有强壮、利尿、止泻之效；

2、肽是一类涉及生物体内多种细胞功能的生物活性物质，参与调控人体各种复杂的生理过程。肽具有活性高、亲和性强、安全性高等特点，且肽分子又是纳米级别的，很容易被人体的肠道吸收，或通过皮肤表层直接进入深层皮肤，快速被人体吸收发挥作用；

3、豌豆中这些功效成分多以水煎提取或打粉直接口服，前者的利用率低，后者的服用剂量大，且进入人体后带来的活性不高。有人从豌豆中提取单一的蛋白制成制剂，但制成的口服制剂经过胃肠道，容易被胃酶、胰酶酶解掉，活性大大降低；而制成注射液，大分子蛋白类又容易引起免疫原性，存在安全隐患。这两种方法得到的功效物质非常复杂，分子量多在12000至80000范围，在一定程度上影响了其临床应用和药效研究跟踪。并且现有的研究发现当豌豆蛋白通过嗜热菌蛋白酶水解，将豌豆蛋白从膜内过滤水解之后的肽，它有一种降低血压的功效，所以从豌豆蛋白中制备降压肽，可以充分利用资源、变废为宝、减少浪费。

4、因此，有必要提供一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽及其制备方法解决上述技术问题。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明提供一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽及其制备方法。

2、本发明所制备的食源性小分子低聚肽为可从豌豆蛋白中通过嗜热菌蛋白酶水解得到，分子量在6000道尔顿以下的具有降压功能的豌豆肽。

3、具体方法为：

4、1、原料处理：将通过豌豆进行制取得到的豌豆蛋白溶液与纯水以1:10-20的质量比混合，通过搅拌装置搅拌均匀后，将温度控制在在42-50℃，并将其浸泡2-4个小时；

5、2、高温杀菌：将混合料液置于高压蒸汽灭菌锅中，进行恒温处理，将蛋白质中细菌进行灭活，并将豌豆蛋白的结构展开，便于后续作业；

6、3、混合液酶解：将混合液放置冷却到室温，并通过向其内部加入嗜热菌蛋白酶对混合液进行水解，水解过程中对混合液进行加热，控制温度在60-65℃，并通过磁力进行持续搅拌；

7、4、酶解液分离：酶解完成后，将通过处理后的酶解液升温至90～100℃，灭酶处理10～20min，对酶解液中的嗜热菌蛋白酶进行灭酶处理；

8、5、酶解液离心：将灭酶处理后的酶解液在转速为8000～10000r/min下离心处理10～30min，取得上清液；

9、6、上清液分离：使用拦截6000-10000分子量超滤纤维膜过滤，得到含有大分子量物质的过滤液a与小分子量物质的过滤液b；

10、7、真空干燥：将过滤液b放入到真空干燥机中进行真空干燥，即可得到相应的豌豆多肽产品。

11、其中噬热菌蛋白酶来自promega公司，加入量为900～3000u/g蛋白，作用温度为60-65℃。

12、优选的，步骤1中从豌豆中制取豌豆蛋白的方法为将除去杂质的豌豆在水中浸泡12～24h，然后用清水漂洗干净，再用砂轮磨磨浆，豆渣反复打磨多遍。将其浆液使用转速1500r/min离心机进行离心3min以除去残渣，上清液进行酸调使蛋白质沉淀，离心除去上清液，将酸沉后的蛋白质进行碱调到ph至7.0使蛋白质溶解得豌豆蛋白溶液；

13、优选的，所述步骤1中豌豆蛋白溶液与水混合后，对其加入稀碱液对其碱调ph值至9.0，微波提取15min，温度控制在55-60℃，之后保温50-60min，得到改性豌豆蛋白溶液，之后通过改性豌豆蛋白溶液进行后续流程。

14、优选的，步骤1中所述的稀碱液为以naoh溶液将料液ph值调至8.5-9.0弱碱性溶液。

15、优选的，所述步骤2中恒温处理温度为100-130℃，处理时间为10-20min。

16、优选的，步骤5之后通过向上清液中加入改性活性炭使用磁力搅拌2h，通过加入改性活性炭，可用于去除豌豆肽的苦味。

17、优选的，所述过滤液a通过向其内部再次加入嗜热菌蛋白酶对过滤液a进行二次水解，二次水解完成后，将完成后二次酶解液升温至90～100℃，灭酶处理10～20min，对二次酶解液中的嗜热菌蛋白酶进行灭酶处理，接着通过离心机进行处理，取得二次上清液；并通过6000-10000分子量超滤纤维膜过滤，将二次上清液中的豌豆肽分离出来，得到过滤液c。

18、优选的，所述过滤液b与过滤液c可以通过不同分子量的的纳滤膜进行二次过滤，得到相应大小区间的豌豆肽。

19、与相关技术相比较，本发明提供的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法具有如下有益效果：

20、1、本发明通过对原料处理，将蛋白质溶液与水进行混合，并通过碱调使蛋白质溶解，并通过高压蒸汽灭菌锅进行高温处理，一方面可对蛋白质中的细菌进行灭活，另一方面可将豌豆蛋白的结构展开，便于后续的水解作业，并通过嗜热菌蛋白酶对豌豆蛋白进行水解，可得到具有降压功能的豌豆肽，并通过高温进行灭酶处理，并使用拦截6000-10000分子量超滤纤维膜过滤，将其从灭活酶解液中进行分离，并通过真空干燥机对其进行干燥处理，防止干燥过程中氧化，影响产品的效果，通过将豌豆蛋白水解制得豌豆蛋白肽；容易被人体的肠道吸收，或通过皮肤表层直接进入深层皮肤，快速被人体吸收发挥作用，并且通过从豌豆蛋白中制备降压肽，可以充分利用资源、变废为宝、减少原料的浪费。

21、2、本发明使用从豌豆中制取豌豆蛋白溶液当作初始原料，可以防止使用豌豆蛋白粉进行制取，蛋白粉中加入有其他物质，影响产品的品质，并且在制取蛋白溶液的过程中通过豆渣反复打磨多遍，并将其浆液使用转速1500r/min离心机进行离心3min以除去残渣，提高豌豆蛋白的成品率，充分利用资源、减少原料的浪费。

22、3、本发明通过在得到过滤b以及过滤液c，通过不同分子量的的纳滤膜进行二次过滤，得到相应大小区间的豌豆肽，可供后续的产品的制备。

技术特征：

1.一种食源性小分子低聚肽，其特征在于，可从豌豆蛋白中通过嗜热菌蛋白酶水解得到，分子量在6000道尔顿以下的具有降压功能的豌豆肽。

2.一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于，

3.根据权利要求2所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中从豌豆中制取豌豆蛋白的方法为将除去杂质的豌豆在水中浸泡12～24h，然后用清水漂洗干净，再用砂轮磨磨浆，豆渣反复打磨多遍。将其浆液使用转速1500r/min离心机进行离心3min以除去残渣，上清液进行酸调使蛋白质沉淀，离心除去上清液，将酸沉后的蛋白质进行碱调到ph至7.0使蛋白质溶解得豌豆蛋白溶液。

4.根据权利要求3所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中豌豆蛋白溶液与水混合后，对其加入稀碱液对其碱调ph值至9.0，微波提取15min，温度控制在55-60℃，之后保温50-60min，得到改性豌豆蛋白溶液，之后通过改性豌豆蛋白溶液进行后续流程。

5.根据权利要求4所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：所述的稀碱液为以naoh溶液将料液ph值调至8.5-9.0弱碱性溶液。

6.根据权利要求2所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中恒温处理温度为100-130℃，处理时间为10-20min。

7.根据权利要求2所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：步骤(5)之后通过向上清液中加入改性活性炭使用磁力搅拌2h，搅拌结束后进行后续的操作。

8.根据权利要求2所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：所述过滤液a通过向其内部再次加入嗜热菌蛋白酶对过滤液a进行二次水解，二次水解完成后，将完成后二次酶解液升温至90～100℃，灭酶处理10～20min，对二次酶解液中的嗜热菌蛋白酶进行灭酶处理，接着通过离心机进行处理，取得二次上清液；并通过6000-10000分子量超滤纤维膜过滤，将二次上清液中的豌豆肽分离出来，得到过滤液c。

9.根据权利要求2所述的一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽的制备方法，其特征在于：所述过滤液b与过滤液c可以通过不同分子量的的纳滤膜进行二次过滤，得到相应大小区间的豌豆肽。

技术总结
本发明提供的涉及保健品技术领域，尤其涉及一种以豌豆蛋白为原料生产的食源性小分子低聚肽及其制备方法，通过原料处理→高温杀菌→混合液酶解→酶解液分离→上清液分离→真空干燥得到分子量在6000道尔顿以下的具有降压功能的豌豆肽，通过嗜热菌蛋白酶对豌豆蛋白进行水解，可得到具有降压功能的豌豆肽，并通过高温进行灭酶处理，并使用超滤纤维膜过滤，将其从灭活酶解液中进行分离，并通过真空干燥机对其进行干燥处理，防止干燥过程中氧化，通过将豌豆蛋白水解制得豌豆蛋白肽；容易被人体的肠道吸收，或通过皮肤表层直接进入深层皮肤，快速被人体吸收发挥作用，并且通过从豌豆蛋白中制备降压肽，可以充分利用资源、变废为宝、减少原料的浪费。

技术研发人员：赵子方,郭红星,李立,周尽学
受保护的技术使用者：海南华研胶原科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12