抗CRISPR-Cas蛋白AcrIIIA1IME1367及其应用的制作方法

文档序号:34987919发布日期:2023-08-03 19:56阅读:70来源:国知局
抗CRISPR-Cas蛋白AcrIIIA1的制作方法

本发明属于rna编辑,具体为一种iii-a型crispr-cas系统抑制剂acriiia1ime1367及其应用。


背景技术:

1、在过去的十年中微生物学最激动人心的发现之一是,类似于真核生物,细菌同样具有获得性免疫系统,打破了长久以来“获得性免疫是真核生物所特有的”定论。在外来入侵过程中,细菌已进化出一种新的特有的免疫防御系统,即crispr-cas系统(成簇规律间隔短回文重复序列及相关cas蛋白)。crispr-cas系统通过捕获整合外源核酸片段,并在cas蛋白和crispr rnas(crrna)的共同作用下保护细菌和古生菌免遭外来噬菌体、病毒和质粒的的入侵。crispr-cas系统已被开发用于基因编辑,应用于生物科学、医学诊断和作物育种等领域。但是由于cas蛋白在完成对目标基因的编辑后持续激活,可导致在整个基因水平进行非特异性切割,从而造成未知后果。因此,合理控制crispr-cas的编辑活性,降低脱靶效应,是crispr-cas系统应用于基因编辑、生物治疗等迫切需要解决的科学问题。


技术实现思路

1、有鉴于此,本发明的目的之一在于提供一种iii-a型crispr-cas系统抑制剂acriiia1的同源性蛋白acriiia1ime1367,本发明的目的之二在于提供一种含有acriiia1的同源性蛋白acriiia1ime1367的试剂或组合物,本发明的目的之三在于提供所述试剂或组合物在制备抑制iii-a型crispr-cas系统rna编辑活性的药物中的应用。为达到上述目的,本发明提供如下技术方案:

2、1、iii-a型crispr-cas系统抑制剂acriiia1,所述acriiia1的氨基酸序列为seqid no:4。

3、作为优选的技术方案之一,所述acriiia1的基因序列为s.argenteus3688stdy6125118细菌中被iii-a型crispr-cas系统靶向识别的序列位点。

4、作为优选的技术方案之一,所述acriiia1与acriiia1的同源性蛋白的序列相比具有至少70%的序列同一性,并且具有与acriiia1相同的生物学功能。

5、作为优选的技术方案之一,所述同源性蛋白的氨基酸序列为seq id no:7,该同源蛋白为acriiia1ime1367。

6、作为优选的技术方案之一,所述acriiia1或所述acriiia1的同源性蛋白抑制iii-a型crispr-cas系统切割rna的活性。

7、2、含有acriiia1和/或acriiia1的同源性蛋白的试剂或组合物。

8、3、所述试剂或组合物在制备抑制iii-a型crispr-cas系统rna编辑活性的药物中的应用。

9、本发明的有益效果在于:

10、本发明从staphylococcus argenteus 3688stdy6125118细菌基因序列中筛选出抑制iii-a型crispr-cas基因编辑活性的iii型抗crispr(acr)抑制剂acriiia1,在细菌和哺乳细胞中acriiia1控制iii-a型crispr-cas基因编辑能力的“关闭”。此外,本发明还筛选出acriiia1的同源性蛋白,并具有相同抑制效果,丰富了iii-a型crispr-cas系统抑制剂的种类。acriiia1抑制剂及其同源蛋白可以在时间或空间上控制iii-a型crispr-cas系统rna编辑效率,提高iii-a型crispr-cas编辑技术在生物治疗、生物技术和农业等领域的安全性和实用性。



技术特征:

1.crispr-cas系统抑制剂acriiia1的同源蛋白,其特征在于,所述acriiia1与acriiia1的同源性蛋白的序列相比具有至少70%的序列同一性,并且具有与acriiia1相同的生物学功能,所述同源性蛋白的氨基酸序列为seq id no:7。

2.如权利要求1所述iii-a型crispr-cas系统抑制剂acriiia1的同源蛋白,其特征在于,所述acriiia1的同源性蛋白抑制iii-a型crispr-cas系统切割rna的活性。

3.含有权利要求1-2任一项所述的acriiia1的同源性蛋白的试剂或组合物。

4.含有权利要求1-2任一项所述的acriiia1的同源性蛋白、权利要求3所述试剂或组合物在制备抑制iii-a型crispr-cas系统rna编辑活性的药物中的应用。


技术总结
本发明属于RNA编辑技术领域,具体为一种来自于StaphylococcusphageIME1367的CRISPR‑Cas系统抑制剂AcrIIIA1<subgt;IME1367</subgt;及其应用,本发明筛选得到了AcrIIIA1的同源性蛋白AcrIIIA1<subgt;IME1367</subgt;,并鉴定了AcrIIIA1<subgt;IME1367</subgt;抑制III‑A型CRISPR‑Cas基因编辑活性,在细菌中AcrIIIA1<subgt;IME1367</subgt;控制III‑A型CRISPR‑Cas基因编辑能力的“关闭”,丰富了III‑A型CRISPR‑Cas系统抑制剂的种类。AcrIIIA1<subgt;IME1367</subgt;抑制剂可以在时间或空间上控制III‑A型CRISPR‑CasRNA编辑效率,提高III‑A型CRISPR‑Cas编辑技术在生物治疗、生物技术和农业等领域的安全性和实用性。

技术研发人员:林平,蒋建新,吴敏
受保护的技术使用者:西部(重庆)科学城种质创制大科学中心
技术研发日:
技术公布日:2024/1/14
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