一种Fmoc-L-Orn(Boc)-Gly-OH及其制备方法和应用与流程

本发明涉及多肽合成，尤其涉及一种n-芴甲氧羰基-n'-叔丁氧羰基-l-鸟氨酰甘氨酸(fmoc-l-orn(boc)-gly-oh)及其制备方法和应用。

背景技术：

1、阿托西班(atosiban)是一种宫缩抑制剂，具有抑制宫缩效果好、副作用小、长疗程应用等优势。阿托西班可以与子宫平滑肌细胞膜上的缩宫素受体进行竞争，从而抑制由缩宫素所引发的子宫收缩，并使环状肽催产素介导的前列腺素分泌减少，达到保胎的目的，可用于18岁以上、孕龄24-33周、胎儿心率正常的孕妇。

2、目前阿托西班的制备方法为：通过多肽合成法将氨基酸逐个偶联来制备阿托西班短肽片段，然后将阿托西班短肽片段偶联制备得到部分保护或全保护的阿托西班多肽，最后脱除保护基得到阿托西班多肽。然而，目前合成阿托西班短肽片段的方法采用的是固相合成法，即：先在树脂上连接fmoc-gly-oh得到其氨基酸树脂，然后脱除氨基酸树脂的fmoc保护基，再接fmoc-orn(boc)-oh制得fmoc-orn(boc)-gly肽树脂，最后脱除树脂才能得到fmoc-orn(boc)-gly-oh片段。虽然采用该固相合成法制备相应的阿托西班短肽片段有合成速度相对较快、后处理相对简单的优势，但是固相合成法需要昂贵的树脂、大大过量的氨基酸以及大量的溶剂，从而导致制备阿托西班短肽片段的成本很高。

技术实现思路

1、本发明的目的在于解决上述现有技术存在的缺陷，提供一种fmoc-l-orn(boc)-gly-oh及其制备方法和应用。

2、一种fmoc-l-orn(boc)-gly-oh，其分子结构式如下：

3、

4、一种fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，包括以下步骤：

5、步骤(1)：利用缩合剂活化n-芴甲氧羰基-n'-叔丁氧羰基-l-鸟氨酸fmoc-l-orn(boc)-oh的羧基，随后与活化剂发生缩合反应生成中间体；

6、步骤(2)：利用甘氨酸h-gly-oh与所述中间体发生缩合反应，形成肽键，生成目标产物fmoc-l-orn(boc)-gly-oh。

7、进一步地，如上所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，所述步骤(1)具体包括以下步骤：

8、将所述fmoc-l-orn(boc)-oh与所述活化剂在二氯甲烷中搅拌溶清，得到混合液i；

9、在0℃以下给所述混合液i中逐次滴加所述缩合剂，滴加完成后，在室温下搅拌反应，得到所述中间体。

10、进一步地，如上所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，所述步骤(2)具体包括以下步骤：

11、在碱性水溶液中，加入所述甘氨酸h-gly-oh，搅拌溶清，得到混合溶液ii；

12、在所述混合溶液ii中加入两种有机溶剂并搅拌溶清，得到混合溶液iii；

13、在所述混合溶液iii中滴加所述中间体进行反应，反应温度为20～25℃，将反应产物经过萃取、干燥、过滤，浓缩，得到所述目标产物fmoc-l-orn(boc)-gly-oh。

14、进一步地，如上所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，所述缩合剂包括：n,n’-二异丙基碳二亚胺dic、n,n’-二环己基碳二亚胺dcc、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐edc.hcl、o-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲四氟硼酸酯tbtu、苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯hbtu、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯hatu、1h-苯并三氮唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐pybop、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐bop中的一种。

15、进一步地，如上所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，所述活化剂为n-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺honb、n-羟基琥珀酰亚胺hosu、1-羟基苯并三氮唑hobt、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑hoat中的一种。

16、进一步地，如上所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，所述两种有机溶剂包括：有机溶剂i与有机溶剂ii；

17、所述有机溶剂i为四氢呋喃thf、乙腈acn、二氧六环、甲基叔丁基醚mtbe、n,n-二甲基甲酰胺dmf、二甲基亚砜dmso中的一种；

18、所述机溶剂ii为乙醇c2h5oh、甲醇ch3oh、异丙醇ipa、丙酮、dmf、dmso中的一种。

19、进一步地，如上所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，所述碱性水溶液的ph为8～9。

20、一种fmoc-l-orn(boc)-gly-oh在制备阿托西班多肽中的应用。

21、本发明提供的方法，是通过液相多肽合成法制备fmoc-orn(boc)-gly-oh，具有成本低、二肽片段纯度高的优点。制备得到的fmoc-orn(boc)-gly-oh二肽片段可以直接联结在树脂上，一次就能接上两个氨基酸，简化了制备阿托西班多肽的步骤，减少了原料消耗，进一步降低了制备阿托西班多肽的成本。

技术特征：

1.一种fmoc-l-orn(boc)-gly-oh，其特征在于，其分子结构式如下：

2.一种如权利要求1所述fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)具体包括以下步骤：

4.根据权利要求2或3所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)具体包括以下步骤：

5.根据权利要求2所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，所述缩合剂为n,n’-二异丙基碳二亚胺dic、n,n’-二环己基碳二亚胺dcc、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐edc.hcl、o-苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲四氟硼酸酯tbtu、苯并三氮唑-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯hbtu、2-(7-氮杂苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯hatu、1h-苯并三氮唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐pybop、苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐bop中的一种。

6.根据权利要求2所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，所述活化剂为n-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺honb、n-羟基琥珀酰亚胺hosu、1-羟基苯并三氮唑hobt、1-羟基-7-氮杂苯并三氮唑hoat中的一种。

7.根据权利要求4所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，所述两种有机溶剂包括：有机溶剂i与有机溶剂ii；

8.根据权利要求4所述的fmoc-l-orn(boc)-gly-oh的制备方法，其特征在于，所述碱性水溶液的ph为8～9。

9.一种如权利要求1所述fmoc-l-orn(boc)-gly-oh在制备阿托西班多肽中的应用。

技术总结
本发明提供一种Fmoc‑L‑Orn(Boc)‑Gly‑OH及其制备方法和应用。该方法包括：利用缩合剂活化N‑芴甲氧羰基‑N'‑叔丁氧羰基‑L‑鸟氨酸Fmoc‑L‑Orn(Boc)‑OH的羧基，随后与活化剂发生缩合反应生成中间体；利用甘氨酸H‑Gly‑OH与所述中间体发生缩合反应，形成肽键，生成目标产物Fmoc‑L‑Orn(Boc)‑Gly‑OH。本发明提供的方法能够有效制备短肽片段，不需要柱层析，可以大规模合成，具有成本低且纯度高的优势。

技术研发人员：郑征,张东海,杨婷,杨再宽,曹力智,吴惠峰,孙梦春,周星宇,白彩红,王震
受保护的技术使用者：成都郑源生化科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13