本发明涉及dna保存,更具体的说是涉及一种血液中dna和端粒的常温保存液及使用方法和应用。
背景技术:
1、随着基因组学研究的发展,dna分析逐渐成为疾病诊断、遗传分析和个体识别等领域的基本手段。端粒是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段dna-蛋白质复合体,端粒短重复序列与端粒结合蛋白一起构成了特殊的"帽子"结构,作用是保持染色体的完整性和控制细胞分裂周期。现阶段端粒的长度反映细胞复制史及复制潜能,是评价人体老化速度的重要和准确的指标,它会随着人们年龄的增长而缩短。对于dna和端粒最主要的来源是血液,对血液或血液中dna和端粒样本的采集、运输和保存具有重要的实际意义。
2、但是在实验室外采集,常因环境限制和采集样本数量巨大,无法在采样后立即进行基因组dna以及端粒的提取,需要将血液样本运输至实验室进行提取。在此过程中,为防止血液dna和端粒发生降解,常规会通过冷冻的方法进行储存,但此方法成本高,且不易操作,可能存在解冻的风险。
3、因此,如何提供一种常温条件下有效保存血液中dna和端粒降低保存成本和风险的保存液是本领域技术人员亟需解决的问题。
技术实现思路
1、有鉴于此,本发明提供了一种血液中dna和端粒的常温保存液及使用方法和应用。
2、为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、一种血液中dna和端粒的常温保存液,包括如下组分,proclin300、edta、原钒酸钠、重氮烷基脲和甘氨酸。
4、优选地,各组分添加量分别为:proclin300加入量为保存液总体积的1%、0.5mmedta、100-1000mg/ml原钒酸钠、100-500mg/ml重氮烷基脲和10-50mg/ml甘氨酸。
5、优选地,各组分添加量分别为:proclin300加入量为保存液总体积的1%、0.5mmedta、100mg/ml原钒酸钠、500mg/ml重氮烷基脲和10mg/ml甘氨酸。
6、优选地,所述血液为指尖血。
7、本发明的另一目的是提供一种上述血液中dna和端粒的常温保存液的使用方法,包括如下步骤:
8、(1)取保存液置于血液保存管中,于4℃长期保存;
9、(2)使用时将采集得到的经edta抗凝处理的血液放入血液保存管中;
10、(3)于200rpm下涡旋震荡让血液充分与保存液混合,然后于500×g下离心2分钟;
11、(4)封管常温运输。。
12、优选地,使用时dna和端粒的常温保存液与血液的体积比为1.5-2:2。
13、本发明的再一目的是提供上述血液中dna和端粒的常温保存液在保存血液dna中的应用。
14、本发明的再一目的是提供上述血液中dna和端粒的常温保存液在保存血液端粒中的应用。
15、经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
16、(1)本发明保存液可稳定保存血液中dna和端粒。
17、(2)本发明保存液在常温条件下可完整保存血液中的dna和端粒至少7天。
1.一种血液中dna和端粒的常温保存液,其特征在于,包括如下组分,proclin300、edta、原钒酸钠、重氮烷基脲和甘氨酸。
2.根据权利要求1所述一种血液中dna和端粒的常温保存液,其特征在于,各组分添加量分别为:proclin300加入量为保存液总体积的1%、0.5mmedta、100-1000mg/ml原钒酸钠、100-500mg/ml重氮烷基脲和10-50mg/ml甘氨酸。
3.根据权利要求2所述的一种血液中dna和端粒的常温保存液,其特征在于,各组分添加量分别为:proclin300加入量为保存液总体积的1%、0.5mmedta、100mg/ml原钒酸钠、500mg/ml重氮烷基脲和10mg/ml甘氨酸。
4.一种如权利要求1-3任一所述血液中dna和端粒的常温保存液的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:
5.根据权利要求4所述血液中dna和端粒的常温保存液的使用方法,其特征在于,使用时dna和端粒的常温保存液与血液的体积比为1.5-2:2。
6.如权利要求1-3任一所述血液中dna和端粒的常温保存液在保存血液dna中的应用。
7.如权利要求1-3任一所述血液中dna和端粒的常温保存液在保存血液端粒中的应用。