一种沙门氏菌噬菌体裂解酶LysST-3及其应用

本发明涉及生物工程，更具体的说是涉及一种沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3及其应用。

背景技术：

1、沙门氏菌是一种常见的人兽共患病原菌，主要通过蛋、肉等禽类产品感染人类。人感染沙门氏菌后多出现剧烈头痛、发热、急性胃肠炎、呕吐等症状。在世界各国各类细菌性食物中毒中，沙门氏菌食物中毒占比较高。抗生素在沙门氏菌的预防和治疗中发挥着重要作用，近年来，由于抗生素的滥用，细菌耐药性不断增强，沙门氏菌多重耐药菌株也不断出现。沙门氏菌感染的控制面临极大挑战，亟待找到一种新型杀菌剂代替抗生素。

2、噬菌体在自然界中分布广泛，1958年jacob等发现噬菌体编码的一类蛋白质具有裂解细菌的作用，将其纯化后命名为裂解酶。噬菌体裂解酶作为杀菌剂具有高效、特异性较强的优点，并且作为一种蛋白质，其理化性质易于研究，便于对其进行改造优化和工业化生产。与抗生素相比，细菌更难对裂解酶产生抗性，这可能是由于裂解酶的作用位点高度保守，变异几率小。

3、噬菌体裂解酶能降解细菌细胞壁的肽聚糖。但沙门氏菌作为革兰氏阴性菌，它的肽聚糖层较薄，但其肽聚糖层外有较厚的外膜保护，裂解酶难以直接自外裂解细菌，所以目前关于沙门氏菌噬菌体裂解酶的研究较少。

4、综上，提供一种沙门氏菌噬菌体裂解酶是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3及其应用。本发明根据沙门氏菌噬菌体st-3的基因组公开序列，利用生物信息学软件分析该噬菌体裂解酶，并分析沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3对沙门氏菌的溶菌效果，为其在食品、农产品安全中的应用提供参考。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、一种沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3，其氨基酸序列如seq id no.1所示。

4、mevsqkgqqalevmegfsakayldvagvptigfgdtsvrarkvkmgdtttleaakaelaldlhdfksgvekylakaakgttqnqfdalvifaynvgltnfasssvlrnhlagdfeaaaksfalwnkitvkgkkvvskglvnrrakeieiylhsnygv，seq id no.1。

5、一种编码上述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3的基因，其核苷酸序列如seq idno.2所示。

6、atggaagtttctcaaaaaggtcagcaagcccttgaggtaatggaagggttcagtgcaaaagcatatcttgacgttgcaggtgtaccgactattggattcggtgataccagtgttcgtgcaagaaaggttaagatgggtgatacaaccactctcgaagccgctaaagctgaactcgctctggacttgcacgacttcaaatcaggtgttgaaaaataccttgctaaggccgcaaaaggcacaacgcagaatcagtttgacgctcttgtaatcttcgcgtataacgtgggattgactaactttgcttcttcaagtgttctgagaaatcacttggcaggtgactttgaagctgctgcaaaatcatttgcactgtggaataaaatcactgtcaagggtaagaaggttgtcagcaaaggtctggtaaacagacgtgcaaaagagattgaaatctacttgcacagcaattatggcgtttga，seq id no.2。

7、进一步的，扩增所述基因的引物如下：

8、lysst3-f:5’-tttggatccatggaagtttctcaaaaagg-3’，seq id no.3；

9、lysst3-r:5’-tttaagctttcaaacgccataattgctgt-3’，seq id no.4。

10、一种重组表达载体，所述重组表达载体为含有上述基因的表达载体，所述表达载体为原核细胞表达载体pet-28a(+)。

11、含有上述重组表达载体的宿主细胞，所述宿主细胞为大肠埃希氏菌bl21(de3)。

12、含有上述基因的细胞系。

13、上述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3在下述方面中的应用，

14、1)所述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3在特异性裂解沙门氏菌中的应用；

15、2)所述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3在制备裂解沙门氏菌的生物制剂中的应用；

16、3)所述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3在制备防止沙门氏菌对食品污染的食品添加剂中的应用。

17、经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：不易诱导细菌产生耐药性，安全高效，环境友好、副作用小，作用迅速，较噬菌体具有宽裂解谱。

技术特征：

1.一种沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3，其特征在于，其氨基酸序列如seqid no.1所示。

2.一种编码权利要求1所述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3的基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.如权利要求2所述的基因，其特征在于，扩增所述基因的引物如下：

4.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体为含有权利要求2所述基因的表达载体，所述表达载体为原核细胞表达载体pet-28a(+)。

5.含有权利要求4所述重组表达载体的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为大肠埃希氏菌bl21(de3)。

6.含有权利要求2所述基因的细胞系。

7.权利要求1所述沙门氏菌噬菌体裂解酶lysst-3在下述方面中的应用，

技术总结
本发明公开了一种沙门氏菌噬菌体裂解酶LysST‑3及其应用。属于生物工程技术领域。本发明根据沙门氏菌噬菌体ST‑3的基因组公开序列，利用生物信息学软件分析该噬菌体的裂解酶，并分析沙门氏菌噬菌体裂解酶LysST‑3对沙门氏菌的溶菌效果，为其在食品、农产品安全中的应用提供参考。

技术研发人员：刘新春,刘冰鑫,郭秋翠,闫沛涵
受保护的技术使用者：中国科学院大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13