金花茶中卟啉化合物及其制备方法

本发明属于天然药物化学，具体涉及一种金花茶中卟啉化合物及其制备方法。

背景技术：

1、金花茶药用价值丰富，研究表明其花中富具有较强的降血糖、血脂、血压的作用，调节机体免疫力；其叶具有抗炎、保肝利胆、抗肿瘤等功效，金花茶的深入研究具有广阔的市场前景和开发价值。

2、金花茶药理作用明显，但因其成分较为复杂，目前报道有萜类、黄酮类、生物碱类、蒽醌类等化合物；绿叶植物中负责光合作用的叶绿素类化合物，具有较高的研究价值，然而目前对金花茶中卟啉(叶绿素)类研究尚处于空白，为进一步了解金花茶中叶绿素类成分，对其中新的叶绿素(叶绿酸酯)成分富集分离纯化显得尤为必要。

技术实现思路

1、本发明旨在解决上述技术问题，提供一种金花茶中卟啉化合物及其制备方法。

2、本发明的技术方案为：

3、一种金花茶中卟啉化合物，结构如式i、式ⅱ、式ⅲ和/或式ⅳ所示：

4、

5、

6、分别命名为：camellia chlorophyllideⅰ(式i)、camellia chlorophyllideⅱ(式ⅱ)、camellia chlorophyllideⅲ(式ⅲ)、camellia chlorophyllideⅳ(式ⅳ)。

7、进一步地，包括以下步骤：

8、1)取金花茶叶片，用体积分数为95～100％乙醇提取，得到提取液，提取液减压浓缩除去乙醇得到金花茶浸膏；

9、2)将步骤1)的金花茶浸膏加水搅拌，至形成悬浊液；

10、3)将步骤2)中混悬液依次使用石油醚、石油醚-三氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯萃取，，取乙酸乙酯部分减压浓缩得到乙酸乙酯萃取物；

11、4)将步骤3)的乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，以石油醚-三氯甲烷-乙酸乙酯作为洗脱液进行梯度洗脱，得到含有卟啉化合物的馏分；

12、5)将步骤4)得到的含有卟啉化合物的馏分进行氧化铝层析柱，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱液进行梯度洗脱，得到含有卟啉化合物的细分馏分；

13、6)将步骤5)得到的含有卟啉化合物的细分馏分进行sephadex lh-20柱层析，用三氯甲烷-甲醇等度洗脱，得到含有卟啉化合物的细分亚馏分；

14、7)将步骤6)中含卟啉的细分亚馏分采用半制备高效液相色谱纯化，可得所述卟啉化合物。

15、进一步地，步骤4)中，所述梯度洗脱中，石油醚、三氯甲烷和乙酸乙酯的体积比分别为1：0：0、20：1：0、10：1：0、5：1：0、1：1：0、0：1：0、0：20：1、0：10：1、0：8：1、0：5：1、0：0：1。

16、进一步地，步骤5)中，所述梯度洗脱中，石油醚和乙酸乙酯的体积比为100：1～1：1。

17、优选地，所述梯度洗脱中，石油醚和乙酸乙酯的体积比为100：1、50：1、20：1、10：1、8：1、5：1、1：1。

18、进一步地，步骤6)中，所述等度洗脱中，三氯甲烷和甲醇的体积比为3：1～1：1。

19、进一步地，步骤7)中，所述半制备高效液相色谱包括正相半制备高效液相色谱或反相半制备高效液相色谱。

20、进一步地，所述正相半制备高效液相色谱的条件为：色谱柱选择agilent zorbaxrx-sil半制备柱，流动相选择体积比为98：2的正己烷-异丙醇。

21、进一步地，所述反相半制备高效液相色谱条件为：色谱柱选择welch ultimatexb-c18半制柱，流动相选择体积比为90:9:1的乙腈-甲醇-水或体积比为95：5的乙腈-甲醇。

22、本发明的有益效果为：

23、1、本发明中以金花茶叶片为原材料，通过提取、萃取、分离纯化等步骤首次从金花茶叶片中获得4种新卟啉类化合物，有利于对金花茶药材及其制剂的开发和质量控制，并为金花茶药材综合开发及天然植物药理活性研究提供了化学依据和物质参考。

24、2、本发明中从金花茶叶片中获得了4种新卟啉类化合物，由于极性差异较小而难以分离，本发明摸索出了较为实用的分离条件，操作简单、成本低廉，适用于工业化生产。

技术特征：

1.一种金花茶中卟啉化合物，其特征在于，结构如式i、式ⅱ、式ⅲ和/或式ⅳ所示：

2.一种权利要求1所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，步骤4)中，所述梯度洗脱中，石油醚、三氯甲烷和乙酸乙酯的体积比分别为1：0：0、20：1：0、10：1：0、5：1：0、1：1：0、0：1：0、0：20：1、0：10：1、0：8：1、0：5：1、0：0：1。

4.根据权利要求2所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法法，其特征在于，步骤5)中，所述梯度洗脱中，石油醚和乙酸乙酯的体积比为100：1～1：1。

5.根据权利要求4所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，所述梯度洗脱中，石油醚和乙酸乙酯的体积比为100：1、50：1、20：1、10：1、8：1、5：1、1：1。

6.根据权利要求2所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，步骤6)中，所述等度洗脱中，三氯甲烷和甲醇的体积比为3：1～1：1。

7.根据权利要求2所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，步骤7)中，所述半制备高效液相色谱包括正相半制备高效液相色谱或反相半制备高效液相色谱。

8.根据权利要求7所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，所述正相半制备高效液相色谱的条件为：色谱柱选择agilent zorbax rx-sil半制备柱，流动相选择体积比为98：2的正己烷-异丙醇。

9.根据权利要求7所述的金花茶中卟啉化合物的制备方法，其特征在于，所述反相半制备高效液相色谱条件为：色谱柱选择welch ultimate xb-c18半制柱，流动相选择体积比为90:9:1的乙腈-甲醇-水或体积比为95：5的乙腈-甲醇。

技术总结
本发明属于天然药物化学技术领域，具体为一种金花茶中卟啉化合物及其制备方法，本发明中以金花茶叶片为原材料，通过提取、萃取、分离纯化等步骤首次从金花茶叶片中获得4种卟啉化合物，有利于对金花茶药材及其制剂的开发和质量控制，并为金花茶药材综合开发及天然植物药理活性研究提供了化学依据和物质参考。

技术研发人员：葛利,孙舒妍,马思远,侯芳芳,杨克迪,莫建光
受保护的技术使用者：广西大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14