一种HPV相关蛋白单克隆抗体及其应用的制作方法

本发明属于生物，具体涉及一种hpv相关蛋白单克隆抗体及其应用。

背景技术：

1、人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,hpv)属于乳头瘤病毒科，是一种小分子的、无被膜包被的环状双链dna病毒，基因组长约8000bp(介于6800～8000bp)，现有200多个亚型，约40种型别可引起女性生殖道感染，其中，hpv16和18型是世界范围内宫颈癌感染的主要型别，感染率分别约为50％和20％。

2、hpv基因组分为3个功能区，即早期转录区(e区)、晚期转录区(l区)和上游调控区(urr区)。其中早期区域(e区)编码病毒周期所必需的基因，并在细胞转化中起重要作用(e1、e2、e4、e5、e6和e7)；晚期区域(l区)：编码病毒颗粒的主要外壳蛋白l1和次要外壳蛋白l2；上游调控区(urr区)，也称为长控制区(lcr)，是含有复制起点和转录因子结合位点的非编码区，通过控制病毒基因转录调节dna复制。

3、目前，针对hpv的防控主要还是以疫苗免疫为主，已经上市的hpv疫苗包含二价、四价、九价。所有的疫苗都是以hpvl1蛋白和/或l2蛋白组装的vlp为免疫原，其中“价”对应的是hpv的不同型，如二价即为hpv16和18型疫苗。

4、市面上已经有较多的针对hpvl1蛋白的检测试剂盒，但是针对免疫原之一的hpvl2的检测较少。因此，急需开发一种能检测hpvl2的单克隆抗体或检测试剂盒。

技术实现思路

1、为了弥补现有技术的不足，本发明的目在于提供一种特异性结合hpvl2蛋白的单克隆抗体及其以此为基础建立的hpvl2蛋白抗体的检测试剂盒。

2、因此，本发明一方面提供了一种特异性结合hpv 16型l2蛋白的单克隆抗体，所述的单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的序列如seq id no.1和seq id no.2所示。

3、优选地，本发明所述的单克隆抗体特异性结合的hpv 16型l2蛋白的氨基酸序列为gidvdntlyfssndnsinia。

4、再一方面，本发明还提供了一种检测hpv 16型l2蛋白抗体的试剂盒，所述试剂盒包括有效量的所述的单克隆抗体和有效量的hpv 16型l2蛋白；以及用于hpv 16型l2蛋白检测的配套试剂。

5、优选地，本发明所述的试剂盒为阻断elisa试剂盒，所述的试剂盒包括抗原包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、25×浓缩洗涤液、酶标抗体、底物溶液和终止液。

6、优选地，本发明所述的抗原包被板包被有hpv 16型l2蛋白，其包被浓度为1μg/ml。

7、优选地，本发明所述的阳性对照为本发明制备的单克隆抗体，其使用浓度为1:5000倍稀释。

8、优选地，本发明所述的酶标抗体为hrp标记的本发明制备的单克隆抗体，其使用浓度为1:20000倍稀释。

9、再一方面，本发明还提供了一种所述的单克隆抗体在制备hpv 16型l2蛋白检测试剂中的应用。

10、再一方面，本发明还提供了一种所述的试剂盒在hpv 16型l2蛋白抗体检测中的应用。

11、本发明筛选的单克隆抗体针对hpv 16型l2蛋白具有良好的敏感性和特异性；且在此基础上制备的hpv 16型l2蛋白抗体检测试剂盒，也具有良好的敏感性、特异性和稳定性，适合hpv 16型l2蛋白抗体的大范围检测。

12、另外，本发明筛选的针对hpv 16型l2蛋白的单克隆抗体，不仅能制备hpv 16型l2蛋白抗体检测试剂盒，同时也适用于hpv 16型l2蛋白的检测(如western blot检测、免疫组化检测等等)。

技术特征：

1.一种特异性结合hpv16型l2蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的序列如seq id no.1和seq id no.2所示。

2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述的单克隆抗体特异性结合的hpv16型l2蛋白的氨基酸序列为gidvdntlyfssndnsinia。

3.一种检测hpv16型l2蛋白抗体的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括有效量的权利要求1所述的单克隆抗体和有效量的hpv16型l2蛋白；以及用于hpv16型l2蛋白检测的配套试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒为阻断elisa试剂盒，所述的试剂盒包括抗原包被板、阳性对照、阴性对照、样品稀释液、25×浓缩洗涤液、酶标抗体、底物溶液和终止液。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的抗原包被板包被有hpv16型l2蛋白，其包被浓度为1μg/ml。

6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的阳性对照为权利要求1的单克隆抗体，其使用浓度为1:5000倍稀释。

7.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的酶标抗体为hrp标记的权利要求1的单克隆抗体，其使用浓度为1:20000倍稀释。

8.一种如权利要求1所述的单克隆抗体在制备hpv16型l2蛋白检测试剂中的应用。

9.一种如权利要求3所述的试剂盒在hpv16型l2蛋白抗体检测中的应用。

技术总结
本发明公开了一种特异性结合HPV16型L2蛋白单克隆抗体，所述的单克隆抗体的重链可变区和轻链可变区的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，所述的单克隆抗体特异性结合的HPV16型L2蛋白的氨基酸序列为GIDVDNTLYFSSNDNSINIA。本发明还公开了一种检测HPV16型L2蛋白抗体的试剂盒，所述试剂盒包括有效量的所述的单克隆抗体和有效量的HPV16型L2蛋白；以及用于HPV16型L2蛋白检测的配套试剂。本发明筛选的单克隆抗体针对HPV16型L2蛋白具有良好的敏感性和特异性，且在此基础上制备的HPV 16型L2蛋白抗体检测试剂盒，也具有良好的敏感性、特异性和稳定性，适合HPV16型L2蛋白抗体的大范围检测。

技术研发人员：吴笛
受保护的技术使用者：广州乐康生物医药科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13