一种解淀粉芽孢杆菌及其培养方法和应用与流程

本发明涉及生物工程，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007及其培养方法和应用。

背景技术：

1、草莓感染草莓红中柱根腐病后，茎蔓变为茶褐色；草莓下部功能叶变成红色或者黄色，植株呈现早衰现象，新生叶片有的具蓝绿色金属光泽；草莓匍匐茎减少，草莓病株迅速枯萎死亡。草莓红中柱根腐病发病初期，草莓的不定根中间部位表皮坏死，形成黑褐色或红褐色梭形病斑，随着病情加重木质部出现坏死；后期老根呈“老鼠尾巴”状——后粗前细，切开病根或剥下根外表皮可看到中柱维管束呈褐红色或者暗红色或者褐红色。病菌以卵孢子在土壤中和病株残余组织内越冬，也能以菌丝体附着在种子上越冬，成为翌年初侵染源。在环境条件适宜时，病菌主要借雨水、灌溉水传播，从寄主根部伤口侵入，引起初次侵染。植株发病后，在病部产生新生代分生孢子，借雨水、灌溉水和农具传播，进行多次重复侵染。

2、草莓红心(中柱)根腐病为急性枯萎型，多发生在3月中旬至5月中旬，草莓染病后地下部发病迅速，特别是雨后初晴高温可引起叶尖突然枯萎，直至全株青叶枯死亡。慢性萎缩型多发生在9月下旬到11月上旬，草莓感病后植株矮化萎缩，下部功能叶片叶缘呈紫褐色或者紫红色，最后全株萎蔫死亡。

3、目前，对于草莓红中柱病害防治来说，大多数使用的是化学防治，化学防治虽然能在一定条件下达到相当高具有经较稳定的防治效果，且见效快，在短时间内能把大面积的病虫害控制下去，但是长时间使用化学药剂，易引起病虫草的抗药性和农药中毒，而且污染农作物及其环境。所以适当的采用微生物防治，既有对人畜等防治目标以外生物(非目标生物.)安全无害的特点，且对环境无污染，能减少毒物残留量。

技术实现思路

1、本发明提供的一种解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)007及其培养方法和应用，旨在解决上述背景技术中存在的问题。

2、为了实现上述技术目的，本发明主要采用如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供了一种解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)，所述解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)007保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏地址是中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2022年12月23日；保藏编号：cctccno:m20222025，

4、第二方面，本发明提供了一种如第一方面所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007在防治植物病虫害中的应用。

5、第三方面，本发明提供了一种含有第一方面所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007的菌剂。

6、第四方面，本发明提供了一种如第三方面所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007菌剂的培养方法，包括如下步骤：

7、(1)将解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)007菌株活化后，用接种针接种至种子液中，放入摇床上进行振荡培养后取出，得到种子菌液；所述种子液含有液体pda100ml、氯化钠0.5g、k2hpo40.1g和caco30.02g；

8、(2)将种子菌液用移液枪吸取2ml加到发酵液中，再放入摇床上培养，即得解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)007菌剂，所述发酵液含有蒸馏水100ml、糖蜜6ml、玉米浆0.5ml、mgso40.5g和mncl20.01g，然后用koh调节发酵液ph值7.2～7.5后，再加0.3g轻质caco3。

9、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

10、1、本发明提供的解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)007相比于化学防治而言，具有对植物病害的专一性，能够对症下药，对植物本身和周围环境没有污染，具有很好的防治效果。

11、2、本发明提供的解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)007菌剂中，含有大量有益菌群，它产生的活性物质，能阻碍有害病菌的繁殖，能增强作物的免疫能力，使植株健壮生长，同时，还具有促根的效果，尤其搭配生根水溶肥一起使用，能提高地温，促进作物萌发新根、老根健壮，进而促进根系生长。

技术特征：

1.一种解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏地址是中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2022年12月23日；保藏编号：cctccno:m20222025。

2.根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)，其特征在于：所述解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007的16srrna序列如seq id no.1所示。

3.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007在防治植物病虫害中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述植物病虫害为草莓红中柱病害。

5.一种含有权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007的菌剂。

6.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007菌剂的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：

7.根据权利要求6所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007菌剂的培养方法，其特征在于，所述解淀粉芽孢杆菌采用稀释涂布平板法从草莓红中柱病原菌病发地附近土壤分离，包括如下方法：

8.根据权利要求7所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007的培养方法，其特征在于，步骤(11)中，称取1g菌株粉剂加入到100ml无菌水中。

9.根据权利要求7所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007的培养方法，其特征在于，步骤(13)中，na平板培养基包括以下成分：蛋白胨10g；氯化钠10g；酵母浸粉5g；牛肉膏5g；琼脂粉18g；无菌水1000ml；步骤(14)中，斜面培养基包括以下成分：蛋白胨5g；氯化钠5g；酵母浸粉2.5g；牛肉膏2.5g；琼脂粉9g；无菌水500ml，取7ml培养基作为斜面培养基。

10.根据权利要求6所述的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)007的培养方法，其特征在于，所述摇床温度为30℃，振荡频率为220r/min。

技术总结
本发明公开了一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)及其培养方法和应用，涉及生物工程技术领域。所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)007保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址是中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2022年12月23日；保藏编号：CCTCCNo:M20222025。本发明提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloli quefaciens)007相比于化学防治而言，具有对植物病害的专一性，能够对症下药，对植物本身和周围环境没有污染，具有很好的防治效果，且解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)007菌剂中，含有大量有益菌群，它产生的活性物质，能阻碍有害病菌的繁殖，能增强作物的免疫能力，使植株健壮生长，同时，还具有促根的效果，尤其搭配生根水溶肥一起使用，能提高地温，促进作物萌发新根、老根健壮，进而促进根系生长。

技术研发人员：王正和,刘保军,谭新国
受保护的技术使用者：武汉吾尔利生物工程有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14