一种与六孔板相适配的细胞迁移实验装置

本发明涉及细胞生物学领域，公开了一种与六孔板相适配的细胞迁移实验装置。

背景技术：

0、技术背景

1、细胞划痕实验是目前最常用的一种研究细胞迁移能力的体外实验方法，这种方法的基本原理是：当细胞长到融合成单层状态时，在融合的单层细胞上人为制造一个空白区域，成为划痕，划痕边缘的细胞会进入空白区域使得划痕愈合。通过计算细胞伤痕的愈合率从而评估细胞的迁徙能力，在一定程度上模拟了体内细胞迁移的过程。在细胞培养板中改变细胞迁移和/或生长的因素可以增加或降低伤口愈合率，因此，本实验常用于研究各种实验条件比如基因调控和药物在细胞迁移中的作用。本实验操作简单，费用低廉。

2、传统的细胞划痕实验方法是以直尺固定于孔板上方，用枪头沿直尺轻轻在单层细胞上划一道痕，划痕横穿过孔板，枪头尽量与孔板的底部垂直，划痕的距离可以选用不同型号的枪头调节。划痕在同一方向成一条直线。首先，人工制造的划痕很难保证施加的力度的一致性，导致划痕的宽窄不一致、弯曲不直且会导致随着划痕的长度增加，堆积的细胞增多，实验误差大，干扰因素多；手动划痕可能会划伤培养器皿表面的包被，进而影响实验结果；由于直尺贴于孔板上方，以及划痕的动作，不可避免增加了细胞被污染的几率。其次，细胞划痕实验需要连续观察以评估处理因素对细胞迁移的作用，传统方法是在培养板背面预先划线标记观察位置，但是在实验前无法预知细胞生长情况，在显微镜下每次的观测点也不可能做到完全一致，且传统方法计算的是某一个部位的迁移距离，只能获得局部细胞迁移的数据。

技术实现思路

1、本发明针对现有细胞划痕实验技术的不足，设计了一种与六孔板相适配的细胞迁移实验装置，可以形成圆形细胞划痕并使圆形划痕边缘更加整齐，并且能更加精确的对“划痕”进行定位以及计算细胞空白区面积的变化。

2、本发明的技术实施方案为：一种与六孔板相适配的细胞迁移实验装置，包括有一个细胞生长阻碍装置和一个细胞生长空白区定位装置，细胞生长阻碍装置呈“十”字形，上设有12个圆台形细胞生长阻碍柱，“十”字形结构的四条边，每条边各3个，并且同一边上的每两个细胞生长阻碍柱之间距离相同，细胞生长阻碍装置上还包含4个与6孔板内侧壁弧度相适配的厚度为2mm的弧形支撑板，细胞生长阻碍柱和支撑板的高度均为与六孔板深度相同的16.6mm，每个细胞生长阻碍柱的底面直径为1mm；细胞生长空白区定位装置也为“十”字形，上设有12个与细胞生长阻碍柱顶面大小、位置完全相同的圆孔，用于定位细胞生长空白区，并且也设有和上述细胞生长阻碍装置支撑板同样的支撑板，用于支撑并且定位保证定位孔与细胞空白区位置正好对应。上述一种与六孔板相适配的细胞迁移实验装置，其特征在于，具体操作方法如下。

3、第一步，安装。在加入细胞悬液之前，先将细胞生长阻碍装置置于6孔板孔内；

4、第二步，细胞培养，形成“划痕”。将六孔板置于适宜环境下培养一定时间后，待细胞贴壁长到融合成单层状态时，取出细胞生长阻碍装置，这样，在孔内便形成了12个直径与圆台形细胞生长阻碍柱底面形态、大小均相同的直径为1mm的圆形细胞生长空白区，即为传统细胞划痕实验的“划痕”；

5、第三步，定位记录。然后在相同部位置入细胞生长空白区定位装置，并在显微镜下拍照记录；

6、第四步，处理细胞。经过不同条件对细胞进行处理后，再次放入细胞生长空白区定位装置，并再次于显微镜下拍照记录；

7、第五步，计算、对比细胞空白区面积变化，从而更加精确的计算细胞的迁移能力。

8、上述技术方案所述的一种与六孔板相适配的细胞迁移实验装置，其特征在于，预先放入细胞生长阻碍柱，再加入细胞悬液待细胞贴壁长到融合成单层状态后再取出时，所形成的细胞空白区为与细胞生长阻碍柱的底面大小、位置均一样的直径为1mm的圆形，然后通过置入细胞生长空白区定位装置从而更精确的观察并拍照记录圆形细胞空白的变化，更精确的了解细胞的迁徙能力。

9、本发明技术特点是精确、简单方便又有专业性。本发明有下列有益效果：(1)制作方便、简单，成本低廉。(2)“划痕”同一性强，对比实验数据更加精确。(3)操作简单、方便。

技术特征：

1.一种与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，包括一个细胞生长阻碍装置(1)和一个细胞生长空白区定位装置(2)；细胞生长阻碍装置(1)上设有12个细胞生长阻碍柱(3)及4个支撑板(4)；细胞生长空白区定位装置(2)上面包含12个定位孔(6)及与4个支撑板(4)。

2.根据权力要求1所述的装置，其特征在于，所述细胞生长阻碍装置(1)为“十”字形支架结构，四个短边上各设有三个圆台形细胞生长阻碍柱(3)，四个短边的边缘各设置一个与6孔板内侧壁相适配的弧形支撑板(4)，十字交叉部的左上及右下象限设置对称的磨砂质地夹取板(5)；所述细胞生长空白区定位装置(2)为“十”字形支架结构，四个短边上各设有三个与细胞生长阻碍柱(3)的顶面大小及空间位置完全一致的定位孔(6)，四个短边的边缘各设置一个与6孔板内侧壁相适配的弧形支撑板(4)，十字交叉部的左上及右下象限设置对称的磨砂质地夹取板(5)。

3.根据权力要求1所述的与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，所述细胞生长阻碍装置(1)“十”字型结构的长度(l1)为31mm，与6孔板相适配的弧形支撑板(4)厚度(t1)为2mm，高度(h1)为16.6mm，圆台形细胞生长阻碍柱(3)高度(h2)为16.6mm，上表面为直径(d1)4mm的圆形，下表面为直径(d2)1mm的圆形。

4.根据权力要求1所述的与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，所述细胞生长空白区定位装置(2)“十”字型结构的长度(l2)为31mm，与6孔板相适配的弧形支撑板(4)厚度(t2)为2mm，定位孔(6)为直径(d3)为4mm的圆形孔。

5.根据权力要求1所述的的与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，所述细胞生长阻碍装置(1)和细胞生长空白区定位装置(2)可分别安装置嵌入于六孔板孔内。

6.根据权力1-5任一所述的与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，细胞生长阻碍装置(1)、细胞生长空白区定位装置(2)为聚丙烯(pp)材料。

技术总结
本发明提供了一种与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，包括一个细胞生长阻碍装置(1)和一个细胞生长空白区定位装置(2)。本发明提供一种与六孔板相适配的细胞迁移试验装置，可以形成圆形细胞划痕并使圆形划痕边缘更加整齐，并且能更加精确的对“划痕”进行定位以及计算细胞空白区面积的变化。

技术研发人员：段瑞峰,姜东强,赵慧雯,宋相仪,张红,崔铭毓,周晓滨,丁思奇,戴新羽
受保护的技术使用者：吉林大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14