一种芽孢杆菌内切几丁质酶基因PbCHI1及其编码蛋白与应用

本发明属于生物，具体涉及一种芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1及其编码蛋白与应用。

背景技术：

1、几丁质是由b-n-乙酰氨基葡萄糖通过b-(14)糖苷键聚合而成的直链线性高聚物,主要存在于真菌细胞壁虾蟹壳以及昆虫的外骨骼中。它是在自然界中含量仅次于纤维素的天然多糖,年产量至少100亿吨，是重要的可再生能源。其衍生物及水解产物几丁质寡糖具有抗菌、抗肿瘤等活性,在医学食品、能源、农业等领域具有广泛的应用前景。

2、自然界中,几丁质的降解主要是由属于18家族糖苷水解酶的几丁质酶实现的。其主要分布在以几丁质为碳源的微生物以及将几丁质作为结构成分的真菌，甲壳类动物和昆虫中。研究发现，几丁质酶可以分为内切几丁质酶和外切几丁质酶两类,内切几丁质酶能够随机的切断几丁质糖链，而外切几丁质酶能够从一端切割几丁质糖链。

3、目前研究的几丁质酶多数对于酸碱热处理后的胶体几丁质具有较高的活性。通过内切和外切几丁质酶的协同作用就可以实现几丁质的高效水解。然而,天然的几丁质结松是十分致密的，几丁质酶只能作用在几丁质的表面，效率很低，并不能破坏几丁质的致密结构，这严重的影响了几丁质的水解效率。通过酸碱热处理的方法尽管能够使几丁质变蓬松但是存在需要消耗大量的能源且污染环境的问题。如何将结构致密的几丁质变蓬松，使几丁质链释放出来,有利于几丁质酶的水解，是几丁质的降解过程中面临的难题。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足，本发明提供一种芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1及其编码蛋白与应用。

2、本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：一种芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1，其序列如seq id no.1所示，所述芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1来自贝莱斯芽孢杆菌lg-13，所述贝莱斯芽孢杆菌lg-13保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2022年6月9日，保藏编号为cgmccno.25036，拉丁文名称为bacillusvelezensis。

3、本发明的另一目的是保护上述芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1的编码蛋白pspbchi11，其序列如seq id no.2所示。

4、本发明的再一目的是保护上述芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1编码蛋白pspbchi11的应用。

5、进一步的，所述芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1编码蛋白pspbchi11的应用，具体应用于调控ph、温度、离子浓度，从而改变切几丁质酶活性。

6、本发明与现有技术相比的有益效果是：本发明通过调控芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1编码蛋白控制几丁质酶的活性，从而控制几丁质酶的产出量；这类几丁质酶可以对抗侵入植物体的真菌病原体；微生物几丁质酶主要是由链霉菌属、杆菌和大多数真菌产生的；细菌分泌几丁质酶主要用于真菌细胞壁的降解和重组，但在大多数产几丁质酶的真菌中，此酶主要用于真菌细胞壁的成型过程。而本发明可以很好的调控切几丁质酶活性。

技术特征：

1.一种芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1，其特征在于，序列如seq id no.1所示，所述芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1来自贝莱斯芽孢杆菌lg-13，所述贝莱斯芽孢杆菌lg-13，保藏编号为cgmccno.25036。

2.基于权利要求1所述的芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1的编码蛋白pspbchi11，其序列如seq id no.2。

3.基于权利要求2所述的芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1编码蛋白pspbchi11的应用。

4.根据权利要求3所述的芽孢杆菌内切几丁质酶基因pbchi1编码蛋白pspbchi11的应用，其特征在于，具体应用于调控ph、温度、离子浓度，从而改变切几丁质酶活性。

技术总结
本发明属于生物技术领域，公开了一种芽孢杆菌内切几丁质酶基因PbCHI1及其编码蛋白与应用。芽孢杆菌内切几丁质酶基因PbCHI1序列如SEQ ID NO.1所示所述芽孢杆菌内切几丁质酶基因PbCHI1来自贝莱斯芽孢杆菌LG‑13。本发明通过调控芽孢杆菌内切几丁质酶基因PbCHI1编码蛋白控制几丁质酶的活性，从而控制几丁质酶的产出量。

技术研发人员：王晓辉,吴家葳,刘烨瑀,刘星雨
受保护的技术使用者：大连大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13